用于肺炎支原体的CRISPR检测引物组及其用途

    公开(公告)号:CN110804669A

    公开(公告)日:2020-02-18

    申请号:CN201911192004.3

    申请日:2019-11-28

    摘要: 本发明涉及一种用于肺炎支原体的CRISPR检测引物组及其用途,属于CRISPR技术的基因检测技术领域。该引物组包括扩增引物对和crRNA;所述扩增引物对用于扩增肺炎支原体如SEQ ID NO.1所示序列;所述crRNA包括锚定序列和向导序列,所述锚定序列与Cas蛋白特异性识别,所述向导序列与所述SEQ ID NO.1序列中的靶向序列片段相匹配。采用该引物组以CRISPR技术检测肺炎支原体,缩短了肺炎支原体的检测时间,可在60min内完成检测。本发明通过筛选得到了特定的序列组合作为引物组进行检测,具有灵敏性高、特异性强的优势,其检测限可达30copies。并且采用该引物组对肺炎支原体进行CRISPR检测,摆脱了对qPCR仪等复杂变温扩增仪器的依赖,使得CRISPR-Cas技术在肺炎支原体的即时诊断方面具有广阔的应用前景。

    去除宏基因组中宿主DNA的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN111455021A

    公开(公告)日:2020-07-28

    申请号:CN201910047978.6

    申请日:2019-01-18

    IPC分类号: C12Q1/6806

    摘要: 本发明涉及一种去除宏基因组中宿主DNA的方法及试剂盒,属于微生物基因检测技术领域。该方法包括以下步骤:DNA片段化:将宿主基因组DNA进行片段化处理,得到宿主DNA片段;氨基化:对上述宿主DNA片段进行氨基化处理;偶联磁珠:将上述经氨基化处理的宿主DNA片段与磁珠偶联,得捕获磁珠;杂交捕获:将待测样本采用上述方法进行DNA片段化,加入上述制备得到的捕获磁珠,进行杂交反应,磁力吸附磁珠,转移上清液,即得去除宿主DNA的待测宏基因组样本。上述方法通过将片段化的宿主DNA氨基化后,偶联到磁珠上,再通过磁珠与宏基因组样本核酸杂交的方式,把宏基因组样本核酸中的宿主源DNA分离开,从而使宏基因组样本核酸中病原微生物核酸的占比大大提高。