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公开(公告)号：CN118480512B
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410928778.2
申请日：2024-07-11
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种A3Z2基因敲除的ST细胞株的构建方法，采用慢病毒感染ST细胞株，经筛选得到A3Z2基因敲除的ST细胞株；所述ST细胞株为能表达Cas9蛋白的ST细胞株；所述慢病毒为用于敲除ST细胞株的A3Z2基因的慢病毒。流式细胞术分析发现，与ST细胞株（ST‑WT）相比，敲除A3Z2基因的ST细胞株（ST‑A3Z2‑KO），处于G1期的细胞数量明显增多；当PDCoV感染ST‑A3Z2‑KO细胞后，该细胞株中处于G1期的细胞数量明显减少；由此可见，PDCoV可以利用细胞G1期的有利条件进行高效增殖。因此，该发现不仅仅可以应用于PDCoV的增殖，对于其他病毒的增殖也是有着积极意义的。同时，本发明还提供细胞系的构建方法以及用途。
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公开(公告)号：CN118480512A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410928778.2
申请日：2024-07-11
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种A3Z2基因敲除的ST细胞株的构建方法，采用慢病毒感染ST细胞株，经筛选得到A3Z2基因敲除的ST细胞株；所述ST细胞株为能表达Cas9蛋白的ST细胞株；所述慢病毒为用于敲除ST细胞株的A3Z2基因的慢病毒。流式细胞术分析发现，与ST细胞株（ST‑WT）相比，敲除A3Z2基因的ST细胞株（ST‑A3Z2‑KO），处于G1期的细胞数量明显增多；当PDCoV感染ST‑A3Z2‑KO细胞后，该细胞株中处于G1期的细胞数量明显减少；由此可见，PDCoV可以利用细胞G1期的有利条件进行高效增殖。因此，该发现不仅仅可以应用于PDCoV的增殖，对于其他病毒的增殖也是有着积极意义的。同时，本发明还提供细胞系的构建方法以及用途。
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公开(公告)号：CN111676316B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN202010489411.7
申请日：2020-06-02
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种快速区分非洲猪瘟病毒基因II型与其它基因型的荧光检测方法、引物及探针。该方法结合了实时荧光PCR技术及熔解曲线分析技术，根据熔解曲线Tm值差异鉴定非洲猪瘟病毒基因II型与其它基因型；操作简单、检测速度快且高通量，本发明的检测方法准确性高、特异性好，重复性好，可以准确、快速、高通量地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号：CN108315483B
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN201810303944.4
申请日：2018-03-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于区分鸭坦布苏病毒野毒株和疫苗株的方法以及相应的引物和探针。本发明首次建立了一种可快速区分鸭坦布苏病毒野毒株与疫苗株(WF100株和FX2010‑180P株)的荧光PCR检测方法，该检测方法操作简单，全部操作过程不需3小时，显著缩短了病毒野毒株与疫苗株鉴别与检测所需时间，并且准确性高、特异性好，重复性好，可以准确、快速、高通量地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号：CN112226460A
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN202011140121.8
申请日：2020-10-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
IPC: C12N15/85 , C12N15/50 , C12N5/10 , C12Q1/6851 , G01N33/68 , G01N33/569 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达猪源宿主限制因子A3Z2分子的细胞系的筛选、培育方法及其应用，1)猪源A3Z2真核表达载体的构建；2)稳定表达猪源宿主限制因子A3Z2的细胞系的筛选；3)观察检测分析；4)接种病毒；5)数据收集；本发明成功构建的表达猪源A3Z2分子的IPEC‑J2细胞系，接种猪流行性腹泻病毒(PEDV)后，能在48h内持续明显抑制细胞病变；该细胞系不仅可用于猪源抗病毒蛋白A3Z2的制备，还可以用于研究PEDV与A3Z2相互作用的分子机制，并以此为靶点为抗PEDV新药的筛选提供思路。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106520710B
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201611065393.X
申请日：2016-11-28
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种表达鸭坦布苏病毒prm和E蛋白重组新城疫病毒的制备方法，包括以下步骤：1）构建致弱新城疫GM株全长质粒；2）构建表达鸭坦布苏病毒prm和E蛋白重组新城疫病毒质粒；3）拯救重组病毒aGM‑prm/E并鉴定。并公开了利用这种方法制备的病毒aGM‑prm/E，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC V201644。利用该病毒制备的疫苗可以预防新城疫和鸭坦布苏病毒病，并减少新城疫病毒强毒感染后排毒。
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公开(公告)号：CN106520710A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201611065393.X
申请日：2016-11-28
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种表达鸭坦布苏病毒prm和E蛋白重组新城疫病毒的制备方法，包括以下步骤：1）构建致弱新城疫GM株全长质粒；2）构建表达鸭坦布苏病毒prm和E蛋白重组新城疫病毒质粒；3）拯救重组病毒aGM-prm/E并鉴定。并公开了利用这种方法制备的病毒aGM-prm/E，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC V201644。利用该病毒制备的疫苗可以预防新城疫和鸭坦布苏病毒病，并减少新城疫病毒强毒感染后排毒。
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公开(公告)号：CN105907890A
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201610296854.8
申请日：2016-05-05
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗GDr180株与野毒株的引物、探针及方法。该方法结合了实时荧光定量PCR技术及熔解曲线分析技术，根据熔解曲线Tm值差异鉴定GDr180株与野毒株；操作简单：只需在PCR反应之前加探针即可；检测速度快且高通量：全部操作过程只需3小时，极大缩短了分型所需时间；费用相对较低：只需要一条普通探针即可达到鉴别检测的目地；准确性高、特异性好，重复性好，可以准确、快速、高通量地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号：CN105838826A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610296557.3
申请日：2016-05-05
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒疫苗株与野毒株的双色荧光PCR引物、探针及方法。该方法结合了实时荧光PCR技术及熔解曲线分析技术，根据熔解曲线峰型及Tm值差异鉴定犬细小病毒疫苗与野毒株；操作简单：只需一个反应即可实现三种基因型野毒株及两种疫苗与的鉴别检测；检测速度快且高通量：全部操作过程不需3小时，不需要病毒的细胞培养，极大缩短了病毒三种不同基因型及两种疫苗与野毒株的鉴别检测所需时间；准确性高、特异性好，重复性好，可以准确、快速、高通量地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号：CN104195265B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201410419410.X
申请日：2014-08-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒野毒株与疫苗株的PCR-HRM引物和方法。该方法为先从样品中提取病毒DNA作为模板，利用所设计的2对特异性引物和荧光饱和染料进行PCR扩增，并分别以野毒株和疫苗株标准品作为对照对检测样品进行HRM分析，确定犬细小病毒的类型。本发明操作简单，只需PCR反应前加荧光饱和染料即可；检测速度快且高通量，全部操作过程只需3小时，不需要病毒的细胞培养，极大缩短了区分检测所需时间；费用低，不需要特异性探针，荧光饱和染料廉价易得；准确性高、特异性好，重复性好，可以准确、快速、高通量地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。
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