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公开(公告)号:CN105200162A
公开(公告)日:2015-12-30
申请号:CN201510481153.7
申请日:2015-08-06
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗JXA1-R株与野毒株的HRM检测方法及其引物,操作简单:只需PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量:全部操作过程只需3小时,极大缩短了分型所需时间;费用低,不需要特异性荧光标记探针,每个样品的饱和染料成本为1.6RMB;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN104198357A
公开(公告)日:2014-12-10
申请号:CN201410493364.8
申请日:2014-09-24
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: G01N15/14
Abstract: 本发明公开一种流式细胞术方法在疫苗生产实时监测中的应用。该应用是将流式细胞术方法应用于疫苗生产过程中,实时监测疫苗生产过程中的活菌数。本发明通过荧光染料对菌细胞进行着染,用流式细胞仪检测细菌荧光信号的变化,通过测定细菌荧光信息的变化,得到具有如下参数中的至少两种的FCM图谱:活菌数、死菌数和总菌数;依据FCM图谱得到活菌数的比例;通过绝对计数法得到目标菌菌液的浓度;依据活菌数的比例和目标菌菌液的浓度,得到目标菌的活菌量和死菌量。本发明为疫苗生产过程提供一种简便、快速、可靠的细菌活性监测方法,其简便易行,操作时间仅需30min,且能精确控制疫苗生产过程的质量。
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公开(公告)号:CN103757041A
公开(公告)日:2014-04-30
申请号:CN201310750013.6
申请日:2013-12-31
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种制备猪源干扰素-λ3(IFN-λ3)蛋白的方法和应用,属于基因工程产品制备领域。包括编码猪源干扰素-λ3基因的克隆,含不包括信号肽序列的猪源干扰素-λ3基因的原核表达载体的构建,用所述含猪源干扰素-λ3基因的重组原核表达载体转化大肠杆菌和诱导表达,最佳诱导温度、时间和IPTG浓度分别为诱导温度20℃,时间16h,IPTG浓度0.4mM。通过本方法制备的产品为研究猪源干扰素-λ3生物活性及其作用机理提供了基础,也可在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中应用。
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公开(公告)号:CN104195265B
公开(公告)日:2016-04-20
申请号:CN201410419410.X
申请日:2014-08-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒野毒株与疫苗株的PCR-HRM引物和方法。该方法为先从样品中提取病毒DNA作为模板,利用所设计的2对特异性引物和荧光饱和染料进行PCR扩增,并分别以野毒株和疫苗株标准品作为对照对检测样品进行HRM分析,确定犬细小病毒的类型。本发明操作简单,只需PCR反应前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量,全部操作过程只需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了区分检测所需时间;费用低,不需要特异性探针,荧光饱和染料廉价易得;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN103866048A
公开(公告)日:2014-06-18
申请号:CN201410069519.5
申请日:2014-02-27
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2531/113 , C12Q2527/107
Abstract: 本发明公开了一种番鸭细小病毒和鹅细小病毒的HRM鉴别方法、试剂盒和引物组,所述检测方法包括如下步骤:(1)设计一组可同时扩增番鸭细小病毒和鹅细小病毒的通用PCR引物;(2)从待测样品中提取病毒基因组DNA作为模板DNA;(3)利用步骤(1)的引物组对模板DNA进行PCR扩增;(4)对扩增产物进行HRM分析,鉴别MDPV和GPV。本发明方法:可快速、有效鉴别MDPV和GPV;检测速度快且高通量:5~10分钟即可完成96/384孔板的PCR产物检测,极大缩短了检测时间;对PCR产物无损害,检测后还可以进行后续分析,如测序和凝胶电泳等。
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公开(公告)号:CN103320535B
公开(公告)日:2014-11-26
申请号:CN201310265390.0
申请日:2013-06-27
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种鉴别猪瘟病毒野毒株与疫苗株的方法。本发明在两者共同的保守区域设计了用于鉴别猪瘟野毒株与疫苗弱毒株的专用引物,其特异性好,能够很好的扩增出野毒株与疫苗弱毒株,结合RT-PCR与HRM技术,能够明显的区分野毒株与疫苗毒株。本发明方法是一种简便、快捷、实用的鉴别猪瘟病毒野毒株与疫苗株的新型技术。
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公开(公告)号:CN103074447A
公开(公告)日:2013-05-01
申请号:CN201310012045.6
申请日:2013-01-11
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴别诊断不同血清型禽白血病病毒PCR-HRM分析方法的建立。本发明的通用引物,简并性好,对禽白血病病毒A、B、C、D和E亚型均有很好地的扩增性,有助于提高PCR的效率,减少病毒鉴别分型的时间;本发明的特异性引物,特异性好,可以特异性扩增出J亚型。对使用本发明引物得到的扩增产物进行HRM分析,与已知亚型的标准HRM曲线进行比对,就可以准确、快速、高通量地进行禽白血病病毒分型,特别是可以快速、准确地区分内源型和外源型禽白血病病毒。
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公开(公告)号:CN105200162B
公开(公告)日:2018-05-25
申请号:CN201510481153.7
申请日:2015-08-06
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种快速区分高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗JXA1‑R株与野毒株的HRM检测方法及其引物,操作简单:只需PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量:全部操作过程只需3小时,极大缩短了分型所需时间;费用低,不需要特异性荧光标记探针,每个样品的饱和染料成本为1.6 RMB;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN104198357B
公开(公告)日:2016-08-24
申请号:CN201410493364.8
申请日:2014-09-24
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: G01N15/14
Abstract: 本发明公开一种流式细胞术方法在疫苗生产实时监测中的应用。该应用是将流式细胞术方法应用于疫苗生产过程中,实时监测疫苗生产过程中的活菌数。本发明通过荧光染料对菌细胞进行着染,用流式细胞仪检测细菌荧光信号的变化,通过测定细菌荧光信息的变化,得到具有如下参数中的至少两种的FCM图谱:活菌数、死菌数和总菌数;依据FCM图谱得到活菌数的比例;通过绝对计数法得到目标菌菌液的浓度;依据活菌数的比例和目标菌菌液的浓度,得到目标菌的活菌量和死菌量。本发明为疫苗生产过程提供一种简便、快速、可靠的细菌活性监测方法,其简便易行,操作时间仅需30min,且能精确控制疫苗生产过程的质量。
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公开(公告)号:CN105154584A
公开(公告)日:2015-12-16
申请号:CN201510412700.6
申请日:2015-07-14
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q1/70 , C12Q2527/107 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种快速区分PRRSV经典和变异毒株HRM非标记探针方法及其引物和探针,操作简单:只需PCR反应之前加UN-Probe和荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量:全部操作过程只需3小时,极大缩短了分型所需时间;费用低,不需要特异性荧光标记探针,每个样品的饱和染料成本为1.6RMB;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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