公开(公告)号：CN103266127B

公开(公告)日：2014-10-01

申请号：CN201310160840.X

申请日：2013-05-03

Applicant: 安徽工程大学

Inventor： 薛正莲 ,  苏燕南 ,  王洲 ,  马琦亚 ,  赵世光 ,  杨超英

IPC: C12N15/75

Abstract: 本发明提供了一种电击转化枯草芽孢杆菌的方法，包括制备感受态细胞和电击转化两个步骤；其中，制备感受态细胞包括如下步骤：将枯草芽孢杆菌在LB培养基中活化，将活化后的枯草芽孢杆菌接种于SLB培养基中，振荡培养，培养至OD600nm=0.7；SLB培养基的制备方法为：将10g蛋白胨，5g酵母粉，10gNaCl，0.5mol山梨醇和蒸馏水充分混匀，并用蒸馏水定容至1L；电击转化包括如下步骤：将待转化的质粒与所述感受态细胞混匀并冰浴，进行电击，得到导入所述待转化质粒的重组枯草芽孢杆菌。应用本发明的方法，转化效率可达8×106cfu/μg，大大提高了枯草芽孢杆菌的转化效率。

公开(公告)号：CN103333229B

公开(公告)日：2015-09-30

申请号：CN201310178411.5

申请日：2013-05-14

Applicant: 安徽工程大学

Inventor： 薛正莲 ,  苏燕南 ,  王洲 ,  马琦亚 ,  张爽 ,  陈环

IPC: C07K14/24 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19 ,  C12R1/43

Abstract: 本发明提供了一种粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子，并提出了其在宿主菌中的作用。本发明的粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子，其序列为SEQ ID NO：2 所示序列。本发明还提供所述的锚蛋白重复子在宿主菌中的抑制作用。本发明的第三个目的是提供锚蛋白重复子对磷脂酶A1在大肠杆菌中表达的促进作用。本发明还提供含有粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子的重组载体和重组菌株。由实验可知，粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子的表达对宿主菌具有明显的抑制作用；粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子对磷脂酶A1在大肠杆菌中的高活性表达具有较大的促进作用。

公开(公告)号：CN103333229A

公开(公告)日：2013-10-02

申请号：CN201310178411.5

申请日：2013-05-14

Applicant: 安徽工程大学

Inventor： 薛正莲 ,  苏燕南 ,  王洲 ,  马琦亚 ,  张爽 ,  陈环

IPC: C07K14/24 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19 ,  C12R1/43

Abstract: 本发明提供了一种粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子，并提出了其在宿主菌中的作用。本发明的粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子，其序列为SEQIDNO：2所示序列。本发明还提供所述的锚蛋白重复子在宿主菌中的抑制作用。本发明的第三个目的是提供锚蛋白重复子对磷脂酶A1在大肠杆菌中表达的促进作用。本发明还提供含有粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子的重组载体和重组菌株。由实验可知，粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子的表达对宿主菌具有明显的抑制作用；粘质沙雷氏菌锚蛋白重复子对磷脂酶A1在大肠杆菌中的高活性表达具有较大的促进作用。

公开(公告)号：CN103266127A

公开(公告)日：2013-08-28

申请号：CN201310160840.X

申请日：2013-05-03

Applicant: 安徽工程大学

Inventor： 薛正莲 ,  苏燕南 ,  王洲 ,  马琦亚 ,  赵世光 ,  杨超英

IPC: C12N15/75

Abstract: 本发明提供了一种电击转化枯草芽孢杆菌的方法，包括制备感受态细胞和电击转化两个步骤；其中，制备感受态细胞包括如下步骤：将枯草芽孢杆菌在LB培养基中活化，将活化后的枯草芽孢杆菌接种于SLB培养基中，振荡培养，培养至OD600nm=0.7；SLB培养基的制备方法为：将10g蛋白胨，5g酵母粉，10gNaCl，0.5mol山梨醇和蒸馏水充分混匀，并用蒸馏水定容至1L；电击转化包括如下步骤：将待转化的质粒与所述感受态细胞混匀并冰浴，进行电击，得到导入所述待转化质粒的重组枯草芽孢杆菌。应用本发明的方法，转化效率可达8×106cfu/μg，大大提高了枯草芽孢杆菌的转化效率。