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公开(公告)号：CN102051358B
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN200910198575.8
申请日：2009-11-10
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体提供一种嵌合的肿瘤特异性基因表达调控盒。它包含肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区、多克隆位点、基因表达增强子和多聚腺苷酸信号区；肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区、基因表达增强子和多聚腺苷酸信号区依次连接，多克隆位点位于肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区和多聚腺苷酸信号区之间，与基因表达增强子相互独立。本发明通过有效调控肿瘤治疗基因的表达使之局限于肿瘤细胞内，显著提高了治疗基因表达的特异性，进而有效提高肿瘤基因治疗的安全性，降低其对正常组织和细胞的损害。
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公开(公告)号：CN102191224A
公开(公告)日：2011-09-21
申请号：CN201010124995.4
申请日：2010-03-12
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属医药生物技术领域，具体涉及一种单纯疱疹病毒的重靶向修饰方法，本发明使用外源靶向物质尤其通过聚乙二醇化叶酸化学改性或修饰单纯疱疹病毒HSV的表面糖蛋白，使其天然的细胞嗜性丧失，而是被特异性地转导入肿瘤细胞或组织，对其它正常细胞或组织不感染。应用本方法能有效提高单纯疱疹病毒特异性地感染肿瘤细胞的能力，规避免疫反应和体内中和抗体，降低毒副作用，提高安全性。
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公开(公告)号：CN102051358A
公开(公告)日：2011-05-11
申请号：CN200910198575.8
申请日：2009-11-10
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体提供一种嵌合的肿瘤特异性基因表达调控盒。它包含肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区、多克隆位点、基因表达增强子和多聚腺苷酸信号区；肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区、基因表达增强子和多聚腺苷酸信号区依次连接，多克隆位点位于肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区和多聚腺苷酸信号区之间，与基因表达增强子相互独立。本发明通过有效调控肿瘤治疗基因的表达使之局限于肿瘤细胞内，显著提高了治疗基因表达的特异性，进而有效提高肿瘤基因治疗的安全性，降低其对正常组织和细胞的损害。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101157934B
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：CN200710046172.2
申请日：2007-09-20
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术和基因工程技术领域，具体涉及一种基于Phi BT1整合酶及Phi C31整合酶的基因克隆质粒(pBCFX+和pBCFX-)及其应用。该质粒使用含有Phi BT1整合酶及PhiC整合酶对应attP位点串连序列的中间插入LacZ表达框架作为质粒载体(pBCFX+和pBCFX-)置换克隆位点，采用插入失活作蓝白筛选。基于该质粒的克隆方法主要包括使用Phi BT1整合酶及Phi C31整合酶混合物作为定点整合催化酶，插入DNA片段依据目的要求可以通过PCR等技术在两侧附加对应的attB序列，从而决定插入片段方向性。该克隆系可以方便操作含有特别内切酶位点的插入DNA，在大片段基因操作方面有独到优因为该体系不需要限制性酶，磷酸酶和连接酶操作，可以简化重组DNA操作方法。基因工程中有广泛应用前景。
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公开(公告)号：CN102051379A
公开(公告)日：2011-05-11
申请号：CN200910198576.2
申请日：2009-11-10
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/869 , C12N7/00 , C12N7/01
Abstract: 本发明属于医药生物技术领域，提供了一种重组单纯疱疹病毒遗传操作系统。该重组单纯疱疹病毒遗传操作系统，包括HSV骨架载体和穿梭质粒；所述的HSV骨架载体包含HSV基因组DNA、BAC质粒骨架、多克隆位点、真核抗性基因以及原核抗性基因，在多克隆位点和真核抗性基因的外侧融入位点特异性重组酶系统识别序列；所述的穿梭质粒是包含多克隆位点的细菌克隆载体，并且在多克隆位点外侧融入位点特异性重组酶系统识别序列。该系统有效提高了单纯疱疹病毒遗传操作的便利性和可操作性，可广泛应用于复制缺陷型重组单纯疱疹病毒和选择复制型溶瘤单纯疱疹病毒的建立。
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公开(公告)号：CN101157934A
公开(公告)日：2008-04-09
申请号：CN200710046172.2
申请日：2007-09-20
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术和基因工程技术领域，具体涉及一种基于Phi BT1整合酶及Phi C31整合酶的基因克隆质粒(pBCFX+和pBCFX－)及其应用。该质粒使用含有Phi BT1整合酶及PhiC31整合酶对应attP位点串连序列的中间插入LacZ表达框架作为质粒载体(pBCFX+和pBCFX－)置换克隆位点，采用插入失活作蓝白筛选。基于该质粒的克隆方法主要包括使用PhiBT1整合酶及Phi C31整合酶混合物作为定点整合催化酶，插入DNA片段依据目的要求可以通过PCR等技术在两侧附加对应的attB序列，从而决定插入片段方向性。该克隆体系可以方便操作含有特别内切酶位点的插入DNA，在大片段基因操作方面有独到优势，因为该体系不需要限制性酶，磷酸酶和连接酶操作，可以简化重组DNA操作方法。在基因工程中有广泛应用前景。
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公开(公告)号：CN101157919A
公开(公告)日：2008-04-09
申请号：CN200710046169.0
申请日：2007-09-20
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术和基因治疗技术领域，具体为一种用于哺乳动物细胞内反式提供rep蛋白的表达质粒。该表达质粒具有负反馈调节机制，即在rep达到一定水平后反馈关闭rep蛋白的表达，并且该质粒有自身不整合到宿主基因组的特性。该质粒的特性源于对AAV病毒P5启动子的RBE的定向突变，使其在细胞内可以如野生P5启动子一样具有负反馈作用，但是不像野生P5一样具有整合到基因组的能力，一方面保证rep适度表达，避免rep短期细胞毒性，同时防止自身整合到基因组，提高长期遗传安全性。该质粒可以广泛用于需要适度反式提供rep蛋白的基因操作和基因治疗体系，如AAV病毒包装体系和依赖RBE介导的基因定点整合操作与基因治疗。
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公开(公告)号：CN101157906A
公开(公告)日：2008-04-09
申请号：CN200710046170.3
申请日：2007-09-20
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术和基因工程技术领域，具体涉及一种用于定点整合的蛋白酶Phi BT1－TAT－NLS－HIS6整合酶及其制备方法，其多克隆抗体及其应用。首先表达纯化Phi BT1－TAT－NLS－HIS6整合酶蛋白质，该蛋白质保持PhiBT1整合酶的基本特性，但是其可以通过蛋白转导进入高等生物细胞，并增加蛋白向细胞核转移的能力，同时适用于细胞外体系以及活细胞体系中介导特异性附加在attP与attB上的DNA分子之间的交换与转移等基因操作。用Phi BT1－TAT－NLS－HIS6整合酶蛋白质直接与佐剂相混合，注射免疫动物，制得Phi BT1整合酶多克隆抗体。该抗体可以用于特异性识别Phi BT1整合酶蛋白质。
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