公开(公告)号：CN109825516B

公开(公告)日：2020-01-14

申请号：CN201910195929.7

申请日：2016-08-19

Applicant: 南阳师范学院

Inventor： 柯涛 ,  赵珊珊 ,  吴时玺 ,  姜鹏 ,  闫沛喆 ,  徐树林

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P7/06 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提出了一种提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法。它是利用基因工程手段得到酿酒酵母的spt15定点饱和突变基因，并连接到表达载体pYES2NTc上,构建突变库，共得到了12个单点突变基因，与野生型基因spt15，spt3及对照基因Neo基因构建重组质粒，分别用醋酸锂法转入酿酒酵母INVSC1中，得到15个重组的酿酒酵母菌株。以葡萄糖为底物，将重组酿酒酵母接种发酵，测定其乙醇产率，其中重组酿酒酵母菌INVSC1‑SPT15‑M，INVSC1‑SPT15‑N，乙醇产率大幅度提高，分别为43.0±0.9g/L和43.7±0.2g/L。比对照菌株INVSC1‑Neo分别增加17.8％和19.7％。2个突变基因在127位分别由赖氨酸突变为甲硫氨酸和天冬酰胺。本发明方法简单，操作容易，乙醇产率提高效果明显。具有很好的经济效益和社会效益。

公开(公告)号：CN106434700B

公开(公告)日：2019-05-03

申请号：CN201610692224.2

申请日：2016-08-19

Applicant: 南阳师范学院

Inventor： 柯涛 ,  赵珊珊 ,  吴时玺 ,  姜鹏 ,  闫沛喆 ,  徐树林

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P7/06 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提出了一种提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法。它是利用基因工程手段得到酿酒酵母的spt15定点饱和突变基因，并连接到表达载体pYES2NTc上,构建突变库，共得到了12个单点突变基因，与野生型基因spt15，spt3及对照基因Neo基因构建重组质粒，分别用醋酸锂法转入酿酒酵母INVSC1中，得到15个重组的酿酒酵母菌株。以葡萄糖为底物，将重组酿酒酵母接种发酵，测定其乙醇产率，其中重组酿酒酵母菌INVSC1‑SPT15‑M，INVSC1‑SPT15‑N，乙醇产率大幅度提高，分别为43.0±0.9g/L和43.7±0.2g/L。比对照菌株INVSC1‑Neo分别增加17.8％和19.7％。2个突变基因在127位分别由赖氨酸突变为甲硫氨酸和天冬酰胺。本发明方法简单，操作容易，乙醇产率提高效果明显。具有很好的经济效益和社会效益。

公开(公告)号：CN106281860A

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201610853977.7

申请日：2016-09-27

Applicant: 南阳师范学院 ,  赊店老酒股份有限公司

Inventor： 柯涛 ,  郑彦平 ,  周业皓 ,  姜鹏 ,  谭莹 ,  李刚 ,  陈新建

IPC: C12G3/02

CPC classification number: C12G3/02

Abstract: 本发明提出了一种白酒生产中的优质人工窖泥及其配制方法，其组份有黄土、藕塘泥、老窖泥、泥炭、大曲粉、蚕蛹粉、骨粉、己酸菌液、磷酸氢二钾、乙酸钠、硫酸镁、硫酸铵、豆饼粉、黄水、酒尾、底锅水等。配制步骤为：一)按要求筛选原材料，按比例称量出各个配方组份；二)优质人工窖泥配制，按先干后湿的顺序混合搅拌均匀，用底锅水控制含水量在40‐45％，调节pH值在6.0‐6.8之间，将泥打入窖池中，用塑料布将窖泥盖严，四边掖紧；三)人工窖泥自然发酵培养，入窖池温度控制在30‐35℃，发酵时间30‐60天；经检测达标后，即得优质人工窖泥。本发明配制简单，发酵老化时间短，效果好，能代替优质老窖泥投入生产，有很好的经济效益和社会效益。

公开(公告)号：CN106434700A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610692224.2

申请日：2016-08-19

Applicant: 南阳师范学院

Inventor： 柯涛 ,  赵珊珊 ,  吴时玺 ,  姜鹏 ,  闫沛喆 ,  徐树林

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P7/06 ,  C12R1/865

CPC classification number: Y02E50/17 ,  C07K14/395 ,  C12N15/81 ,  C12N2800/102 ,  C12P7/06

Abstract: 本发明提出了一种提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法。它是利用基因工程手段得到酿酒酵母的spt15定点饱和突变基因，并连接到表达载体pYES2NTc上,构建突变库，共得到了12个单点突变基因，与野生型基因spt15，spt3及对照基因Neo基因构建重组质粒，分别用醋酸锂法转入酿酒酵母INVSC1中，得到15个重组的酿酒酵母菌株。以葡萄糖为底物，将重组酿酒酵母接种发酵，测定其乙醇产率，其中重组酿酒酵母菌INVSC1-SPT15-M，INVSC1-SPT15-N，乙醇产率大幅度提高，分别为43.0±0.9g/L和43.7±0.2g/L。比对照菌株INVSC1-Neo分别增加17.8％和19.7％。2个突变基因在127位分别由赖氨酸突变为甲硫氨酸和天冬酰胺。本发明方法简单，操作容易，乙醇产率提高效果明显。具有很好的经济效益和社会效益。

公开(公告)号：CN105647955A

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201610066098.X

申请日：2016-01-25

Applicant: 南阳师范学院

Inventor： 牛秋红 ,  张林 ,  惠丰立 ,  柯涛 ,  董冰雪 ,  韩雪梅

IPC: C12N15/75 ,  C12N15/66 ,  C12N15/65

CPC classification number: C12N15/75 ,  C12N15/65 ,  C12N15/66 ,  C12N2800/101

Abstract: 本发明公开了一种基于芽孢杆菌的穿梭质粒pPG及其制备方法，所述穿梭质粒pPG的碱基序列如SEQ IN NO.1所示，所述穿梭质粒pPG的制备方法包括，分别PCR扩增获得启动子Pxyl序列、gfp序列和终止子terminator序列，并以启动子Pxyl序列、gfp序列和终止子terminator序列为材料制备Pxyl-gfp-terminator模块序列，然后将芽孢杆菌表达载体pHY300PLK和Pxyl-gfp-terminator模块序列经BamHI和XbaI双酶切，并将双酶切产物经T4DNA连接酶连接，构建通用的表达芽孢杆菌绿色荧光蛋白的穿梭质粒pPG。本发明穿梭质粒pPG可以转化入宿主菌，实现芽孢杆菌内绿色荧光蛋白的稳定表达，且适用于所有芽孢杆菌。

公开(公告)号：CN119119219A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411277202.0

申请日：2024-09-12

Applicant: 南阳师范学院

Inventor： 柯涛 ,  牛秋红 ,  惠丰立

IPC: C07K14/395 ,  C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P7/06 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提供了一种酵母起始转录因子突变蛋白及其衍生产物在生产工业乙醇中的应用，属于微生物基因改造技术领域。本发明利用gTME技术对酵母转录因子(spt15)进行突变，编码基因突变库，得到了酵母起始转录因子第127位赖氨酸突变分别为甘氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、异亮氨酸和天冬氨酸的酵母spt15突变蛋白，利用基因工程手段构建得到重组酿酒酵母菌株。经发酵环境参数耐受性检测，获得耐乙酸、乙醇、高温和高渗性中至少两种耐性的酿酒酵母菌株，为工业乙醇高效发酵生产提供了新手段。

公开(公告)号：CN116376879A

公开(公告)日：2023-07-04

申请号：CN202310489482.0

申请日：2023-04-28

Applicant: 南阳师范学院

Inventor： 柯涛 ,  张婉莹 ,  孙君珂 ,  邓箬竹 ,  王云 ,  牛秋红

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种具有降解葡聚糖和壳聚糖的双功能酶、基因及应用，该双功能酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码该双功能酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用宏基因组测序数据筛选出了一种新的水解纤维素及多糖复合物的酶基因，为挖掘微生物中酶基因资源提供了一种新思路。因该双功能酶可高效降解葡聚糖和壳聚糖，因此，该双功能酶在动物饲料、畜禽养殖等领域有更广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN111807908A

公开(公告)日：2020-10-23

申请号：CN202010714488.X

申请日：2020-07-23

Applicant: 南阳师范学院

Inventor： 王云 ,  柯涛 ,  周索 ,  宋建平 ,  徐静

IPC: C05G3/80 ,  A01C21/00 ,  C12N1/36 ,  C12N1/20 ,  C12R1/385 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种提高果树品质的芳烃降解菌菌肥及其制备方法和应用，制备方法包括以下步骤：选取萎蔫果树根系附近土壤，冷冻干燥，得预处理土壤；向培养基中添加果树根系分泌物标品和预处理土壤，震荡培养，得芳烃降解菌一；向培养基中加入果树根系分泌物标品和预处理土壤，倒平板培养，得芳烃降解菌二；在芳烃降解菌一和芳烃降解菌二中选取降解率高的芳烃降解菌，然后添加到土壤原有菌群中，得降解菌菌群；将降解菌菌群制成微囊体，与复合肥料混合，得提高果树品质的芳烃降解菌菌肥。本发明还包括上述方法制得的芳烃降解菌菌肥及其应用。本发明将芳烃降解菌添加到土壤原有菌群中，有效解决了分泌物过多产生毒害作用和果实品质较低等问题。

公开(公告)号：CN106544211A

公开(公告)日：2017-03-29

申请号：CN201610840992.8

申请日：2016-09-22

Applicant: 南阳师范学院

Inventor： 柯涛 ,  周业皓 ,  姜鹏 ,  徐树林 ,  郑彦平 ,  谭莹 ,  马向东

IPC: C12G3/02 ,  C12N1/20 ,  C12N1/16 ,  C12N1/14 ,  C12R1/125 ,  C12R1/10 ,  C12R1/72 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12G3/02 ,  C12N1/14 ,  C12N1/16 ,  C12N1/20

Abstract: 本发明公开了一种增香高酯强化中高温大曲的生产方法，包括以下步骤：(1)在白酒生产发酵堆积过程中，随机取样，筛选和鉴定出3株增香细菌种子BSM1、BSM2、BSM3，并制备成三级菌种；子曲和曲母接种于到种曲培养基中，接种重量比分别为0.05～0.15％、0.5～1.5％、0.5～1.5％和0.5～1.5％，其余为种曲培养基；(3)混合压制成型；(4)自然发酵30天左右；(5)库房存放3个月后出库。本发明筛选产香细菌种子，人为改变大曲的微生物群落的比例，制得的增香高酯强化中高温大曲，具有产生特殊香味物质、强化了大曲功能等显著特点。此大曲应用于浓香型白酒的生产，极大地满足了浓香型白酒规模生产的需求，具有较高的经济和社会效益。(2)将增香细菌种子、产酯酵母种子、酯化红曲种

公开(公告)号：CN109825516A

公开(公告)日：2019-05-31

申请号：CN201910195929.7

申请日：2016-08-19

Applicant: 南阳师范学院

Inventor： 柯涛 ,  赵珊珊 ,  吴时玺 ,  姜鹏 ,  闫沛喆 ,  徐树林

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P7/06 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提出了一种提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法。它是利用基因工程手段得到酿酒酵母的spt15定点饱和突变基因，并连接到表达载体pYES2NTc上,构建突变库，共得到了12个单点突变基因，与野生型基因spt15，spt3及对照基因Neo基因构建重组质粒，分别用醋酸锂法转入酿酒酵母INVSC1中，得到15个重组的酿酒酵母菌株。以葡萄糖为底物，将重组酿酒酵母接种发酵，测定其乙醇产率，其中重组酿酒酵母菌INVSC1-SPT15-M，INVSC1-SPT15-N，乙醇产率大幅度提高，分别为43.0±0.9g/L和43.7±0.2g/L。比对照菌株INVSC1-Neo分别增加17.8％和19.7％。2个突变基因在127位分别由赖氨酸突变为甲硫氨酸和天冬酰胺。本发明方法简单，操作容易，乙醇产率提高效果明显。具有很好的经济效益和社会效益。