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公开(公告)号:CN116254225A
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202310315720.6
申请日:2023-03-27
Applicant: 南方医科大学南方医院
Abstract: 本发明公开了一种膜蛋白双阳性特异细胞外囊泡亚群分离富集方法、试剂盒及其应用。所述方法,包括如下步骤:将待处理的细胞外囊泡(EVs)样本、两个特异性靶向EVs膜蛋白标志物的抗体核酸复合物与能连接两个抗体核酸复合物的RNA连接链孵育,得到DNA‑RNA杂合体,实现EVs双阳性膜蛋白的捆绑;通过功能化磁珠特异性地捕获DNA‑RNA杂合体,实现膜蛋白双阳性特异EVs亚群的分离;通过酶切核酸链实现膜蛋白双阳性特异EVs亚群的富集。本发明提供的技术可实现膜蛋白双阳性特异EVs亚群无损分离富集,既能保证EVs数量,又能保证质量,还具有通用性,可根据实际需要更换抗体或靶向膜表面分子的识别原件实现双靶标阳性EVs亚群无损分离富集。
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公开(公告)号:CN115501383B
公开(公告)日:2023-09-08
申请号:CN202210528977.5
申请日:2022-05-16
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: A61L26/00
Abstract: 本发明公开了一种近红外二区响应的纳米复合温敏水凝胶的制备和应用。本发明将抗生素亚胺培南IMP装入脂质体囊泡中制备得到亚胺培南@脂质体复合物IL,然后在IL外膜上修饰金纳米壳G,并连接靶向革兰阴性菌脂多糖的核酸适配体A以合成ILGA,进一步将ILGA包被于温敏水凝胶中得到ILGA@Gel复合温敏水凝胶。本发明的水凝胶在室温下具有良好流动性,适用于各种形状的伤口;在近红外二区1064nm波长激光照射下能够迅速升温释放出亚胺培南,高效杀菌;同时温度升高使得水凝胶从液态转换成固态,在伤口表面原位形成凝胶膜,保护伤口免受二次感染;本发明产品还具有良好的止血、减少炎症、保湿以及加速伤口修复作用,是一种适用于复杂感染伤口管理的凝胶敷料。
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公开(公告)号:CN115044653A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202210588597.0
申请日:2022-05-26
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/06
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体公开了一种基于液滴微流控联合检测单个细胞外囊泡内核酸和膜蛋白标志物的数字化分析方法及其应用。所述方法包括:将细胞外囊泡EVs与抗体核酸复合物一起孵育得到EVs检测复合物,然后将EVs检测复合物、引物、探针与EVs裂解液配制成信号反应体系在液滴微流控芯片上产生微液滴,微液滴中裂解释放其内部的核酸分子,EVs膜上的抗体核酸复合物经PCR扩增反应产生荧光信号,EVs释放的mRNA经RT‑PCR反应产生荧光信号;随后将微液滴转移至液滴分析芯片,通过液滴分析仪识别读取实现单个EV内核酸和膜蛋白标志物联合检测的数字化分析,对相关疾病的早期诊断效能评估具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114277106A
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202111631583.4
申请日:2021-12-28
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/06
Abstract: 本发明公开了一种单囊泡膜蛋白表达谱分析用于多亚群细胞外囊泡计数的方法及其应用所述方法包括:将细胞外囊泡(EVs)与抗体偶联核酸复合物一起孵育,所述抗体偶联核酸复合物由EVs普适性表达和/或特异的抗体与核酸偶联而成;然后将EVs和抗体偶联核酸复合物的混合物与引物、探针一起配制成反应体系,经液滴生成仪产生微液滴,实现单个EV的包裹,将所述液滴用PCR仪进行热循环扩增反应,随后通过液滴生成仪识别读取液滴,从而对EVs亚群进行分离分析。本发明能实现EVs数字化绝对定量,只需更换抗体就可实现多种EV亚群的精准检测分析;技术简单、稳定、成熟,利用普通PCR仪就可实现临床疾病诊断,利于临床推广转化。
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公开(公告)号:CN110988355A
公开(公告)日:2020-04-10
申请号:CN201911212520.8
申请日:2019-11-29
Applicant: 南方医科大学南方医院
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了一种基于磁性分离和催化发夹组装的外泌体双膜蛋白共表达检测平台及其制备方法与应用,本发明将外泌体与包被抗体CD63的磁珠共孵育,通过磁性分离法分离富集外泌体,以AptEpCAM-T作为外泌体的识别元件及催化反应启动元件,然后与发卡结构H1及发卡结构H2共同构建成检测平台,可实现外泌体双膜蛋白共表达的定性检测。本发明采用磁性分离法有效排除了游离或杂质蛋白的干扰,提高检测的准确性和特异性;并采取催化发夹组装技术将单一的目标蛋白转化为大量可检测荧光信号,提高了检测灵敏度,同时,外泌体双膜蛋白检测的设计还提升了检测效率和诊断效能。
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公开(公告)号:CN119667173A
公开(公告)日:2025-03-21
申请号:CN202411939080.7
申请日:2024-12-26
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: G01N33/68 , A61K31/05 , A61P19/02 , A61P19/08 , C12Q1/6883 , C12Q1/6851 , G01N21/78 , G01N21/31 , G01N24/08
Abstract: 本发明公开了香芹酚在减少软骨细胞凋亡及治疗骨关节炎中的应用,属于医学领域,该应用方法具体步骤如下:S1:建立动物模型并分组,培养一个月后,检测各组动物模型的炎症因子、软骨变化、基质代谢及肝肾毒性;S2:检测不同浓度CAR对ADTC5细胞的影响,以及炎症环境中CAR对细胞增殖的影响;S3:构建细胞炎症模型,并进行CAR治疗,之后提取mRNA进行RT‑qPCR检测,评估CAR对炎症因子的影响;S4:运用流式细胞术、TUNEL染色和Western blot方法检测CAR在炎症环境中对细胞凋亡的影响;本发明相较于传统的治疗方法,香芹酚可减少软骨基质降解,可抑制炎症因子表达,对肝、肾组织毒副作用少,药品价格低。
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公开(公告)号:CN118795148A
公开(公告)日:2024-10-18
申请号:CN202310401035.5
申请日:2023-04-14
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: G01N33/68 , G01N21/64 , G01N33/543 , G01N33/58 , C12N15/115 , G01N33/569
Abstract: 本申请公开了一种用于程序性细胞死亡配体‑1膜蛋白阳性细胞外囊泡检测的试剂盒。本申请试剂盒包括捕获分离试剂和检测试剂;捕获分离试剂由金属有机骨架和结合在其表面的捕获元件组成,捕获元件为5’端修饰磷酸根的PD‑L1核酸适配体;检测试剂包括5’端修饰胆固醇的DNA单链,和与DNA单链互补的探针,探针两端分别修饰荧光基团和淬灭基团。本申请利用结合PD‑L1核酸适配体的金属有机骨架进行EVs捕获分离,具有稳定性好、亲和力高、成本低、速度快等优点。获得的PD‑L1阳性EVs结构完整,可直接接驳下游分析检测;利用胆固醇修饰DNA单链、探针,在核酸内切酶作用下,通过荧光信号放大检测体系,提高了检测灵敏度。
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公开(公告)号:CN110082531A
公开(公告)日:2019-08-02
申请号:CN201910289902.4
申请日:2019-04-11
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: G01N33/574 , G01N33/53
Abstract: 本发明提供一种肿瘤外泌体纳米荧光检测试剂盒及其应用,该试剂盒包括识别元件、荧光报告基团、荧光猝灭基团。本发明不仅证实了人体血浆来源外泌体上PSMA可以作为鉴别健康受试者和前列腺癌患者的生物标志物,而且进一步证明我们的方法可有效避免临床血浆标本中正常细胞来源外泌体对其检测结果的影响,具有良好的抗干扰能力,在进行前列腺癌PSMA(+)外泌体亚群分析方面具有较大的临床应用潜力。
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公开(公告)号:CN116333325A
公开(公告)日:2023-06-27
申请号:CN202111583593.5
申请日:2021-12-22
Applicant: 南方医科大学南方医院
Abstract: 本发明公开了一种用于细胞外囊泡(EVs)分离的金属有机骨架材料,包括金属有机骨架及结合在其表面的EVs捕获元件,所述EVs捕获元件由核酸及修饰在其5’端的磷酸根基团和3’端的胆固醇组成。所述金属有机骨架材料通过捕获元件3’端修饰的胆固醇分子嵌入到EVs脂质双分子层当中,离心后即可实现从生物样本中EVs的富集,进一步加入切割单元核酸酶剪切下捕获元件,可分离得到纯化的EVs,分离后的EVs能够进行荧光标记用于流式细胞术检测。本发明提供了一种快速简便的EVs分离试剂盒平台,用于解决现有技术中EVs分离样品需求量大、分离时间长、蛋白污染难去除、操作繁琐、不适用于临床应用等问题。
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公开(公告)号:CN110095608A
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201910294220.2
申请日:2019-04-12
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: G01N33/577 , G01N33/574 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明提供一种基于磁性分离和DNA自组装的肿瘤外泌体纳米荧光传感器,包括偶联GPC-1抗体的功能化磁珠、触发链、三个茎环状核酸探针。本发明实现了乳腺癌GPC-1(+)外泌体亚群的定量检测,检测特异性高、灵敏度高、检测范围宽,通过对临床血浆来源标本中的乳腺癌GPC-1(+)外泌体亚型进行检测以评估该方法的临床应用价值,该方法具有普适性,可运用于其它已筛出特异核酸适体的生物标志物。可用于其它外泌体亚型、蛋白、细胞和金属离子等的检测。
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