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公开(公告)号：CN110988355A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911212520.8
申请日：2019-11-29
Applicant: 南方医科大学南方医院
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种基于磁性分离和催化发夹组装的外泌体双膜蛋白共表达检测平台及其制备方法与应用，本发明将外泌体与包被抗体CD63的磁珠共孵育，通过磁性分离法分离富集外泌体，以AptEpCAM-T作为外泌体的识别元件及催化反应启动元件，然后与发卡结构H1及发卡结构H2共同构建成检测平台，可实现外泌体双膜蛋白共表达的定性检测。本发明采用磁性分离法有效排除了游离或杂质蛋白的干扰，提高检测的准确性和特异性；并采取催化发夹组装技术将单一的目标蛋白转化为大量可检测荧光信号，提高了检测灵敏度，同时，外泌体双膜蛋白检测的设计还提升了检测效率和诊断效能。
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公开(公告)号：CN110988355B
公开(公告)日：2022-11-18
申请号：CN201911212520.8
申请日：2019-11-29
Applicant: 南方医科大学南方医院
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种基于磁性分离和催化发夹组装的外泌体双膜蛋白共表达检测平台及其制备方法与应用，本发明将外泌体与包被抗体CD63的磁珠共孵育，通过磁性分离法分离富集外泌体，以AptEpCAM‑T作为外泌体的识别元件及催化反应启动元件，然后与发夹结构H1及发夹结构H2共同构建成检测平台，可实现外泌体双膜蛋白共表达的定性检测。本发明采用磁性分离法有效排除了游离或杂质蛋白的干扰，提高检测的准确性和特异性；并采取催化发夹组装技术将单一的目标蛋白转化为大量可检测荧光信号，提高了检测灵敏度，同时，外泌体双膜蛋白检测的设计还提升了检测效率和诊断效能。
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公开(公告)号：CN109679961A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201811348118.8
申请日：2018-11-13
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: C12N15/115 , G01N21/64
CPC classification number: C12N15/115 , C12N2310/16 , G01N21/6428 , G01N21/6486 , G01N2021/6432
Abstract: 本发明提供一种自组装树状纳米复合物及其应用，其触发链包括识别区、触发区。本发明基于适配体识别及催化DNA探针自组装成树状纳米复合物，该复合物的组装合成方法简单、稳定性好，DNA链在催化链存在下能够自组装成树状纳米复合物，而不需要苛刻的反应条件和贵重的仪器；DNA树状纳米复合物检测肿瘤细胞表面膜蛋白含量的同时也能成像肿瘤细胞表面膜蛋白；通过利用适配体和催化链结合在一起能够特异性识别并主动靶向癌细胞膜蛋白和荧光成像；该DNA树状纳米复合物是由DNA链自组装而成，具有较低的生物毒性和免疫原性，利于其生物应用。
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公开(公告)号：CN107843629A
公开(公告)日：2018-03-27
申请号：CN201710997151.2
申请日：2017-10-20
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: G01N27/327 , G01N27/48 , G01N33/543 , G01N33/574
CPC classification number: G01N27/3277 , G01N27/48 , G01N33/5438 , G01N33/574
Abstract: 本发明涉及一种检测A549肿瘤细胞电化学传感器工作电极的制备方法，该方法由对裸金电极进行抛光处理、滴涂捕获探针、封闭非特异性位点、滴涂燃料探针、制备Apt-T双链复合物、往Apt-T双链复合物中加入待测细胞液杂交、扩增并固定H1-H2双链复合物和碱性磷酸酶处理8个步骤组成，其中所述的燃料探针的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的方法增设了在裸金电极表面滴涂所述燃料探针的步骤，因此可实现双向催化发夹自组装反应，显著提高了检测的灵敏度。
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公开(公告)号：CN113388668A
公开(公告)日：2021-09-14
申请号：CN202110575085.6
申请日：2021-05-25
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: C12Q1/6841 , C12Q1/682 , C12Q1/6886 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA纳米线的局域催化发夹自组装技术检测外泌体miRNA的方法，采用DNA纳米线‑CHA荧光探针，所述荧光探针包括Trigger、L1、L2及H1、H2，其中H1带有荧光基团和淬灭基团；靶标miRNA存在时启动CHA反应，打开DNA四面体上的H1发夹结构，H1暴露出来的“立足点”片段继续打开H2的发夹结构，在纳米线上形成H1/H2双链复合体并将H1上的荧光基团和淬灭基团分开，从而发出荧光信号，检测荧光值即可对靶标miRNA定量分析。本发明是一种能与外泌体进行快速、灵敏、特异、高效反应的信号放大技术，能够原位检测外泌体中特异miRNA。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112899348B
公开(公告)日：2024-04-23
申请号：CN202110078844.8
申请日：2021-01-20
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: C12Q1/6825 , G01N27/26
Abstract: 本发明属于外泌体miRNA检测技术领域，具体公开了一种用于检测外泌体miRNA的MDTs‑CHA体系、电化学传感器及其应用。所述MDTs‑CHA体系包括N层相互叠加的T1结构和T2结构，T1结构包括一个DNA四面体DT1及两个发夹H1、H2，T2结构包括一个DNA四面体DT2及两个发夹H3、H4。本发明基于所述MDTs‑CHA体系构建了一种用于检测外泌体miRNA的电化学传感器，通过层叠、局域化的催化发夹组装反应，以MDTs作为电化学报告信号分子的载体，检测快速、灵敏且高效；MDTs‑CHA体系组装及合成方法简单，且稳定性好。本发明可以检测不同细胞系及血浆的外泌体miRNA，且由于MDTs‑CHA体系是由DNA链组装形成，具有较低的生物毒性和免疫原性，有利于其生物应用。
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公开(公告)号：CN112899348A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110078844.8
申请日：2021-01-20
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: C12Q1/6825 , G01N27/26
Abstract: 本发明属于外泌体miRNA检测技术领域，具体公开了一种用于检测外泌体miRNA的MDTs‑CHA体系、电化学传感器及其应用。所述MDTs‑CHA体系包括N层相互叠加的T1结构和T2结构，T1结构包括一个DNA四面体DT1及两个发夹H1、H2，T2结构包括一个DNA四面体DT2及两个发夹H3、H4。本发明基于所述MDTs‑CHA体系构建了一种用于检测外泌体miRNA的电化学传感器，通过层叠、局域化的催化发夹组装反应，以MDTs作为电化学报告信号分子的载体，检测快速、灵敏且高效；MDTs‑CHA体系组装及合成方法简单，且稳定性好。本发明可以检测不同细胞系及血浆的外泌体miRNA，且由于MDTs‑CHA体系是由DNA链组装形成，具有较低的生物毒性和免疫原性，有利于其生物应用。
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公开(公告)号：CN107860912B
公开(公告)日：2019-12-17
申请号：CN201711088994.7
申请日：2017-11-08
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: C07H21/04 , G01N33/533
Abstract: 本发明涉及一种双功能化核酸适体介导的A549肿瘤细胞检测方法，该方法制备适体—抑制链复合物、制备细胞悬液、制备发夹催化自组装反应液、采集荧光强度、建立标准品曲线方程和计算细胞浓度6个步骤。本发明所述检测方法能够在均相体系实现肿瘤细胞快速检测，且具有灵敏高、特异性好和可用于快速筛查的优点。
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公开(公告)号：CN107860912A
公开(公告)日：2018-03-30
申请号：CN201711088994.7
申请日：2017-11-08
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: G01N33/533 , C12Q1/02 , G01N33/574 , G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一种双功能化核酸适体介导的A549肿瘤细胞检测方法，该方法制备适体—抑制链复合物、制备细胞悬液、制备发夹催化自组装反应液、采集荧光强度、建立标准品曲线方程和计算细胞浓度6个步骤。本发明所述检测方法能够在均相体系实现肿瘤细胞快速检测，且具有灵敏高、特异性好和可用于快速筛查的优点。
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公开(公告)号：CN107843629B
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201710997151.2
申请日：2017-10-20
Applicant: 南方医科大学南方医院
IPC: G01N27/327 , G01N27/48 , G01N33/543 , G01N33/574
Abstract: 本发明涉及一种检测A549肿瘤细胞电化学感器工作电极的制备方法，该方法由对裸金电极进行抛光处理、滴涂捕获探针、封闭非特异性位点、滴涂燃料探针、制备Apt‑T双链复合物、往Apt‑T双链复合物中加入待测细胞液杂交、扩增并固定H1‑H2双链复合物和碱性磷酸酶处理8个步骤组成，其中所述的燃料探针的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的方法增设了在裸金电极表面滴涂所述燃料探针的步骤，因此可实现双向催化发夹自组装反应，显著提高了检测的灵敏度。
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