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公开(公告)号：CN116590251A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202310298532.7
申请日：2023-03-24
Applicant: 华南理工大学 , 广东优酶生物制造研究院有限公司
Abstract: 本发明涉及一种醇氧化酶突变体，其氨基酸序列为在PcAOX的氨基酸构成发生了在PcAOX的氨基酸构成发生R61E、Y407F、W560M、和N604H突变。本发明还以pET28a(+)为表达载体，以E.coli BL21(DE3)为表达宿主获得了突变体PcAOX，最终获得了具有显著苄基醇底物活性的突变体PcAOX‑EFMH。所述突变体PcAOX提高了醇氧化酶PcAOX针对芳香醇底物，例如苯甲醇的活性，使得其与过氧合酶级联催化合成多种具有重要应用价值的原料成为可能，这为绿色环保合成化工原料提供了新思路和技术基础。
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公开(公告)号：CN114774479A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210575134.0
申请日：2022-05-24
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12P7/26
Abstract: 本发明涉及一种酶法合成芳香族酮类香料化合物的方法，包括如下步骤：在氯化胆碱的存在下，芳香仲醇在非特异性过氧合酶和胆碱氧化酶的共同催化下进行氧化反应，即得所述芳香族酮类香料化合物。本发明的酶法合成芳香族酮类香料化合物的方法既能利用氯化胆碱原位产生H2O2，维持体系中H2O2浓度在可高效催化且不破坏酶活性的稳定水平；同时拓宽了UPO的催化应用范围，合成了一系列高价值的芳香族酮类香料化合物。本发明方法的反应条件温和，操作简单，且无需使用大量有毒有害有机试剂，副产物仅仅为水，绿色环保，为芳香族酮类香料的合成提供了一条全新的生物酶级联催化路径。
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公开(公告)号：CN114774478A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210573227.X
申请日：2022-05-24
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明涉及一种酶法合成芳香族醛类香料化合物的方法，包括如下步骤：芳香醇在芳基醇氧化酶与非特异性过氧合酶的共同催化下进行氧化反应，即得所述芳香族醛类香料化合物。本发明首次将“PeAAOx偶联AaeUPO”级联催化反应应用于制备芳香族醛类香料化合物，该方法在消除H2O2潜在危害的同时，两种酶具有协同增效的作用，大大提高了酶催化效果，提高了底物转化率和产物醛的收率。本发明的酶法合成芳香族醛类香料化合物的方法在催化过程中不依赖于昂贵的烟酰胺辅助因子，而只需分子氧作为最终电子受体，副产物仅仅为水，反应条件温和，操作简单，且无需使用大量有毒有害有机试剂，绿色环保。
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公开(公告)号：CN116790570A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310394506.4
申请日：2023-04-13
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种脂肪酸光脱羧酶CsoFAP的突变体，该突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该脂肪酸光脱羧酶CsoFAP的突变体对碳原子数为6‑20的直链脂肪酸均具有良好的脱羧效果，尤其对碳原子数为8‑16的直链脂肪酸的脱羧效果更为优异，进一步将该突变体的第176位亮氨酸突变成半胱氨酸或将177位的酪氨酸突变为半胱氨酸后，其在蓝光下的半衰期能够由原来的0.84h延长至1.90h，进一步提高光耐受性。因此，该脂肪酸光脱羧酶CsoFAP的突变体有着更为广泛的底物谱、优异的催化脱羧效果及光稳定性，扩宽了脂肪酸光脱羧酶在工业生产中的应用，提供了新的技术基础与思路。
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公开(公告)号：CN113215205B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202110476712.0
申请日：2021-04-29
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12P7/6409
Abstract: 本发明公开了一种制备羟基脂肪酸的方法，将脱胶副产物溶解在乙腈中，超声分散，离心去除沉淀，得到有机相，将磷脂酶B、磷脂酶D、非特异性过氧合酶和胆碱氧化酶溶于缓冲液中，将有机相与复合酶液混合，反应至少1h，制得羟基脂肪酸。本发明为催化合成羟基脂肪酸提供了新思路，实现了油脂脱胶副产物的循环利用，减少了工业浪费。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116445428A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310396939.3
申请日：2023-04-13
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种非特异性过氧合酶MroUPO与脂肪酶在催化脂肪酸合成大环内酯反应中的应用，以及该非特异性过氧合酶MroUPO的表达方法；其中该非特异性过氧合酶MroUPO的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该非特异性过氧合酶MroUPO能够催化脂肪酸进行脂肪酸末端羟基化修饰，催化得到的末端羟基化修饰的反应产物再以脂肪酶为催化剂进行酯化反应后能够生成大环内酯。在该非特异性过氧合酶MroUPO的表达方法中，通过构建MroUPO重组菌，并通过对MroUPO重组菌发酵的条件进行优化，实现产MroUPO重组菌的高密度发酵，从而实现MroUPO的高效表达，为MroUPO的工业化生产提供了理论依据。
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公开(公告)号：CN115927226A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210900526.X
申请日：2022-07-28
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种醇氧化酶PcAOX的突变体及其应用，所述醇氧化酶PcAOX的突变体的氨基酸序列如SEQIDNo.3所示。本发明通过对醇氧化酶PcAOX的三维结构进行多方面对比分析，分析关键氨基酸位点并设计一系列突变体，得到了一个不仅具有醇氧化酶活性，且具有转酰基活性的醇氧化酶PcAOX的突变体，利用该突变体，使得合成某些特殊产物成为可能，为绿色环保合成化工原料提供了新思路和技术基础。
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公开(公告)号：CN118222557A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410457064.8
申请日：2024-04-16
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明涉及一种光脱羧酶CtFAP以及其突变体CtFAP，其氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:3所示。本发明还提供了光脱羧酶突变体CtFAP‑S基因的载体，以及一种脂肪酸脱羧反应的方法。本发明所述的CtFAP对芳香酸具有较好的脱羧活性。此外本发明通过添加抗氧化剂显著提高了CtFAP无底物添加状态下的蓝光耐受性。本发明拓宽了脂肪酸光脱羧酶应用的可能性，为其在工业上广泛应用提供了条件。
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公开(公告)号：CN118222529A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410457092.X
申请日：2024-04-16
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种非特异性过氧合酶突变体及其应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示或如SEQ ID NO:5所示。本发明的非特异性过氧合酶MroUPO突变体F160C和I84C的最适过氧化氢浓度不变，在40mM过氧化氢的环境孵育90min，仍然保存33.8％和17.2％的残余酶活力，半衰期分别为野生型的6倍和5倍。因此，本发明的非特异性过氧合酶突变体可在生物催化过程中应用，具有良好的稳定性能，可在应用过程中寿命延长和提高催化效率，更适用于工业领域上的应用，初步解决了UPO在工业生产中的瓶颈问题，为其在产业化、商品化提供了工具指导。
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公开(公告)号：CN114854726B
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202210708763.6
申请日：2022-06-21
Applicant: 华南理工大学 , 广东优酶生物制造研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种脂肪酸光脱羧酶McFAP的突变体及其应用，所述脂肪酸光脱羧酶McFAP的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明的McFAP的突变体，丰富了FAP的种类，填补了现有FAP不能对碳原子数6～12的饱和直链脂肪酸催化脱羧的空白，脱羧底物谱明显更广、脱羧效果更好，使燃料的高效可持续生物合成成为可能，有着广阔的工业应用前景。
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