一种窄谱抗菌肽及其应用

    公开(公告)号:CN114106197B

    公开(公告)日:2023-06-16

    申请号:CN202111298440.6

    申请日:2021-11-04

    Inventor: 王菊芳 王蒙 马毅

    Abstract: 本发明属于蛋白质工程和生物制药技术领域,公开了一种窄谱抗菌肽及其应用,窄谱抗菌肽(G2)的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。所述的窄谱抗菌肽在制备抗微生物感染药物中的应用,所述微生物主要为肠道及食源性致病菌。结果显示本发明G2抗菌肽抗菌谱窄,对艰难梭菌(Clostridium difficile)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)及大肠杆菌(Escherichia coli)O157具有较强的抗菌活性,并且具有良好的温度、pH和血清稳定性;生物安全性实验显示G2抗菌肽无明显的溶血活性及细胞毒性。

    一种检测食品中VBNC状态醋酸菌的复苏培养基及方法

    公开(公告)号:CN115537365A

    公开(公告)日:2022-12-30

    申请号:CN202211525559.7

    申请日:2022-12-01

    Abstract: 本发明公开了一种检测食品中VBNC状态醋酸菌的复苏培养基及方法。本发明的复苏培养基是先配置AS培养基,然后在AS培养基中加入EMEM培养液和/或椰子汁,使得EMEM培养液体积分数为25%~50%、椰子汁体积分数为25%~50%,或者他们的总和为体积分数25%~50%,其中AS培养基每升含有胰蛋白胨4.0g~8.0g,酵母膏1.5g~10g,葡萄糖0.5g~8g,余量为水。检测方法是取食品样品加入复苏培养基中振荡培养,食品中VBNC状态醋酸菌即可复苏并恢复生长能力。本发明方法简便快速,为公共卫生安全提供了准确、高效的检测方法,可用于食品中VBNC状态醋酸菌的快速检测。

    一种肠杆菌科细菌菌影的高效制备方法

    公开(公告)号:CN115044598A

    公开(公告)日:2022-09-13

    申请号:CN202210710693.8

    申请日:2022-06-22

    Abstract: 本发明属于微生物学和基因工程领域,公开了一种肠杆菌科细菌菌影的高效制备方法,包括以下步骤:采用RF克隆方法将噬菌体ID52裂解基因E与温控载体连接,构建温控重组质粒;将所述重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞中,以氯霉素为抗性筛选,得到重组大肠杆菌单克隆;将得到的重组大肠杆菌单克隆接种至含有氯霉素的LB液体培养基中振荡培养;当菌液OD600值达到0.8以上时,诱导裂解基因E表达,最后收集诱导表达后的菌影。本发明噬菌体ID52‑E裂解蛋白的裂解活性更强,菌影形成率更高。当起始诱导OD600值达到2.0时,加入诱导剂L‑阿拉伯糖,其OD600值可降低至0.3‑0.4,本发明显著提高了菌影的产量。

    免疫磁珠的保存液以及免疫磁珠试剂

    公开(公告)号:CN114397443A

    公开(公告)日:2022-04-26

    申请号:CN202111499935.5

    申请日:2021-12-09

    Abstract: 本发明公开了一种免疫磁珠的保存液,包括稳定剂、增稠剂、防腐剂以及作为溶剂的缓冲液,保存液的pH为6.5~8.5。增稠剂为蛋白胨,蛋白胨的浓度不低于0.2g/mL。现有技术中,蛋白胨虽然也用于免疫磁珠的保存液,但是通常是作为稳定剂存在,且现有技术中保存液内的蛋白胨浓度一般不超过15g/L。本申请中创造性的采用蛋白胨作为增稠剂,利用蛋白胨在2℃~6℃的低温环境凝固的特点,将蛋白胨的浓度设置成不低于0.2g/mL,使得免疫磁珠的保存液可以在2℃~6℃的低温环境下呈半固体状态,从而既可以避免由于干燥导致免疫磁珠的聚集以及免疫配基的失活,又可以使得免疫磁珠充分分散并且不会发生聚集,从而避免出现免疫磁珠结块的现象,可以用于免疫磁珠的较长期保存。

    一种丁酸梭菌及其应用
    5.
    发明授权

    公开(公告)号:CN110218676B

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN201910510790.0

    申请日:2019-06-13

    Abstract: 本发明公开了一种丁酸梭菌及其应用,该菌为丁酸梭菌(Clostridium butyricum)SCUT620,于2019年3月29日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,其保藏编号为GDMCC NO:60623,保藏地址:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼,广东省微生物研究所。该菌株从健康奶牛粪便中分离得到,可直接利用廉价淀粉基质如玉米淀粉、木薯淀粉发酵生产丁酸,具有较高的丁酸转化率;该菌株在利用淀粉发酵生产丁酸的同时还能制备丁酸梭菌活菌制剂,该方法可通过一次发酵同时生产丁酸和丁酸梭菌活菌制剂,具有工艺简单、生产成本低的优点,具有广阔的应用前景。

    一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法

    公开(公告)号:CN106244610B

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201610586211.7

    申请日:2016-07-22

    Abstract: 本发明公开一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法。该方法是通过构建表达载体pET21a‑hEGF‑Mxe‑SUMO,实现了不带任何外源氨基酸的hEGF蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效可溶表达。本发明为促进外源蛋白在大肠杆菌可溶表达提供了一种有效的思路和方法,SUMO标签融合到目的蛋白C端,能够有效地提高融合蛋白的功能性表达效率,进一步在融合蛋白中间加入可以自剪切的内含肽,在还原环境中切除融合蛋白的内含肽和SUMO蛋白,获得不带任何外源氨基酸序列且具有生物学活性的人表皮细胞生长因子。本方法为复杂的真核生物蛋白质在原核表达系统的高效生产提供了理论基础与设计新思路。

    一种人糖化血红蛋白的制备方法

    公开(公告)号:CN105241728B

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201510633962.5

    申请日:2015-09-28

    Abstract: 本发明公开了一种人糖化血红蛋白的制备方法,包括以下步骤:从血液样品中提取红细胞,对所得红细胞进行洗涤,释放红细胞中的血红蛋白,对所得血红蛋白进行分离纯化,即可。现有技术很难获得高纯度糖化血红蛋白,并且存在回收率低和通量低的不足。本发明以成人健康志愿者和糖尿病患者的血液样本为原料,采用自由流等电聚焦模式高效制备。本发明方法可以得到纯度达96%以上的人糖化血红蛋白,并且人糖化血红蛋白的回收率可达到98%以上,比文献报道提高近30%。本发明具有很大的市场前景,制备的人糖化血红蛋白可以作为糖尿病检测标准品、制备多克隆抗体和单克隆抗体的抗原等。

    一种发酵生产丁酸的方法

    公开(公告)号:CN109355318A

    公开(公告)日:2019-02-19

    申请号:CN201811322835.3

    申请日:2018-11-08

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种发酵生产丁酸的方法,包括如下步骤:(1)将酪丁酸梭菌(Clostrdium tyrobutyricum)活化,制备成种子液;(2)以甘露醇和葡萄糖的混合物为碳源,配制液体培养基,并经过灭菌;(3)将步骤(1)种子液接种于步骤(2)的液体培养基中,在温度为35-39℃,pH为5-7,转速为100-300rpm的条件下,进行细胞发酵,得到丁酸。本发明可以降低副产物乙酸的积累,提高目标产物丁酸的转化率和选择性,从而降低后续的分离纯化成本。此外,该发明中的混合底物还可以用褐藻水解液或褐藻加工废弃物作为替代,从而实现廉价海洋生物质向高选择性丁酸的高效生物转化。

    一株耐受多种纤维素水解液抑制物的丙酮丁醇梭菌及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN109355239A

    公开(公告)日:2019-02-19

    申请号:CN201811173004.4

    申请日:2018-10-09

    CPC classification number: C07K14/33 C12P7/16

    Abstract: 本发明公开一株耐受多种纤维素水解液抑制物的丙酮丁醇梭菌及其制备方法和应用,属于生物技术领域。该菌株为丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum)824(proABC),于2018年08月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号:CGMCC NO.16223。该菌株对多种纤维素水解液抑制物(甲酸、阿魏酸、丁香醛和香豆酸)有较强的耐受性,能直接利用未脱毒的大豆秸秆、水稻秸秆和玉米秸秆等纤维素生物质水解液进行丙酮-丁醇-乙醇(ABE)发酵,其丁醇产量分别是野生菌的2倍、3.4倍和4.4倍。本发明为高效利用纤维素生物质进行丁醇生产提供了有效的菌株及方法。

    一种重组人Ⅰ型胶原蛋白及其固定化发酵生产的方法

    公开(公告)号:CN105061589B

    公开(公告)日:2018-02-27

    申请号:CN201510535383.7

    申请日:2015-08-26

    Abstract: 本发明公开了一种重组类人Ⅰ型胶原蛋白及其固定化发酵生产的方法,它的全长为344个氨基酸,以人Ⅰ型胶原蛋白α1链660‑964位肽段为基本构架,在其N端添加680‑694位的15个氨基酸、在C端添加950‑964位的15个氨基酸以及3组GER氨基酸三联体。本发明类人Ⅰ型胶原蛋白由毕赤酵母分泌表达,无需破碎细胞,经过凝胶过滤一步纯化,可以得到纯度>95%的重组蛋白。同时,利用纤维床生物反应器系统,固定化发酵重组工程菌。具有不需反复接种、细胞密度高、传质效率好、制作简单等优点,可以显著地提高重组类人Ⅰ型胶原蛋白的产量。该蛋白可以应用于化妆品行业,也可以应用于组织工程领域。

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