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公开(公告)号：CN118240735A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410627089.8
申请日：2024-05-21
申请人： 华南理工大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/57 , C12N15/53 , C12N15/54 , C07K14/78 , C12N15/70 , A61K8/65 , A61Q19/00 , A61L27/24 , A61L27/50 , A61L31/04 , A61L31/14 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种能表达外源蛋白的菌株、重组人源胶原蛋白及合成方法与应用。本发明首先提供了一种能表达外源蛋白的菌株，该菌株为脯氨酸营养缺陷型大肠杆菌，能高效表达外源蛋白。以该菌株为宿主表达重组人源胶原蛋白，外源掺入脯氨酸和羟脯氨酸，通过调控培养基中脯氨酸与羟脯氨酸的比例，可实现对胶原蛋白羟化率的精准调控。通过该合成方法，能得到羟化率与天然人胶原蛋白接近的重组胶原蛋白，具有更好的细胞粘附性及蛋白稳定性。
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公开(公告)号：CN118028207B
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202410447714.0
申请日：2024-04-15
申请人： 华南理工大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/33 , C12N15/70 , A61K39/39 , A61K39/00 , A61K47/46 , A61P35/00 , A61P37/04 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种菌影的制备方法、应用该菌影的组合物及其制备方法，该菌影的制备方法包括：将pET29a‑E‑α3质粒与EcN/ΔtnaA::T7 RNAP感受态细胞混合后在28‑40℃下孵育0.5‑1小时，以将质粒转入到感受态细胞中，筛选得到重组菌株；将所述重组菌株于LB培养基中培养并加入IPTG诱导噬菌体α3裂解蛋白表达；收集培养后的所得溶液中的菌影加入冻干保存剂进行冻干保存，得到的大肠杆菌菌影。与现有技术相比，本发明利用特定方法制备大肠杆菌菌影作为免疫治疗的佐剂后与肿瘤抗原进行组合，使大肠杆菌菌影具有免疫活性成分和药物载体双重功能，可以携带和释放药物，同时还能够激活免疫系统，增强免疫治疗的效果，也即提高了基于大肠杆菌菌影作为佐剂用于免疫治疗时的应用效果。
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公开(公告)号：CN116808309A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310386209.5
申请日：2023-04-12
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开了一种胶原蛋白壳聚糖复合支架及其制备方法及应用。本发明通过将胶原蛋白与甲基丙烯酸缩水甘油酯混合反应，得到甲基丙烯酸缩水甘油酯胶原蛋白；将壳聚糖溶液和甲基丙烯酸酐反应，得到甲基丙烯酸壳聚糖；将甲基丙烯酸酐和多巴胺反应，得到甲基丙烯酸多巴胺；再将甲基丙烯酸缩水甘油酯胶原蛋白、甲基丙烯酸壳聚糖、甲基丙烯酸多巴胺和铜离子混合，在苯基(2,4,6‑三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐的引发下进行光固化反应，得到胶原蛋白壳聚糖复合支架。该支架既具有一定的机械强度、韧性、抗疲劳性和粘弹性，同时还兼具良好的生物相容性、黏附性、抗菌抗氧化性，还对急性创面愈合方面具有突出的应用前景。
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公开(公告)号：CN110890129B
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN201911149071.7
申请日：2019-11-21
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开一种单增李斯特菌血清型特异性SNP的挖掘方法及其应用。通过该方法成功挖掘到多种血清型特异性SNP。将不同血清型特异性SNP组合使用，通过将血清型特异性SNP置于引物的3′末端，使某种血清型高效扩增，而其他血清型扩增效率极低，达到区分出主要血清型的目的，另外，通过同时使用某一基因的两个SNP区域设计两个特异性引物，再设计一条共用引物，可以三条引物区分两种型，最大化节省引物的数量。因此，本发明从特异性碱基出发开发了一种用于鉴定单增李斯特菌主要血清型的方法，且相比现有的多重PCR方法实现了引物用量的减少，且准确率较高，与Doumith的方法对比，对60株单增李斯特分型一致性达100％。
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公开(公告)号：CN114736273A
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202210251931.3
申请日：2022-03-15
申请人： 华南理工大学
IPC分类号： C07K14/005 , C12N15/33 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12R1/19
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种噬菌体alpha3裂解蛋白E及其应用，所述裂解蛋白E与噬菌体phiX174的裂解蛋白一样拥有一个保守的跨膜区，能有效抑制大肠杆菌的生长，该裂解蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO:2所示，编码该裂解蛋白的多核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过将噬菌体alpha3的裂解蛋白E的基因克隆到表达载体上，进而得到可高效表达裂解基因E的重组大肠杆菌。实验证明，所述裂解蛋白E可以有效在大肠杆菌表面形成孔道，起始诱导OD高，裂解持续时间长，裂解效率可达99.99％，为进一步大规模制备大肠杆菌菌影提供基础。
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公开(公告)号：CN109021086B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN201810868364.X
申请日：2018-08-02
申请人： 华南理工大学
IPC分类号： C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , A61K38/17 , A61P31/04
摘要： 本发明公开了一种抗菌肽天蚕素A突变体及其编码基因、制备方法和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID No：3所示。编码上述突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID No：4所示。根据设计处的抗菌肽突变体PEW300的基因序列进行分子克隆，将其基因克隆至重组表达载体中，通过与自聚集短肽ELK16融合表达，实现突变体PEW300的高效表达。然后对获得的突变体肽PEW300进行9种指示菌的抑菌性能测试，结果显示抗菌肽PEW300的抑菌性能大大提高。并且具有较强的pH、热稳定性。添加高浓度的抗菌肽PEW300也不会出现溶血现象。
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公开(公告)号：CN110938644A
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201911142081.8
申请日：2019-11-20
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明属于快速检测领域，公开了一种可视化的非细胞体外显色体系及其制备方法和应用，包括如下步骤：(1)工程菌的制备：利用Red重组法敲除大肠杆菌菌株中β-半乳糖苷酶基因，获得工程菌；(2)工程菌裂解液的制备：测定上述工程菌的生长曲线，制备工程菌裂解液；(3)显色体系的配制：配制显色体系，包括工程菌裂解液、能量供应体系、氨基酸混合液和其他蛋白质合成所需的底物混合液；所述能量供应体系含磷酸烯醇式丙酮酸。此非细胞显色体系可应用于病原微生物快速检测。本发明所建立的非细胞显色体系，操作简便，耗时短，成本低，微量化并可肉眼观察反应情况。以该体系为基础，可实现通过肉眼观察来判断反应情况，在可视化快速检测方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN106279410B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201610864043.3
申请日：2016-09-29
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开一种二型登革热病毒NS1蛋白多价纳米抗体及制备方法，属于基因工程和生物制药技术领域。该多价纳米抗体是由VHH抗体片段通过连接肽连接构成；所述VHH抗体片段的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过构建表达载体pET‑22b‑VHH‑linker‑VHH、pET‑22b‑VHH‑linker‑VHH‑linker‑VHH，分别成功在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶表达。与单价抗体相比，重复串联后得到的二价及多价VHH抗体的亲和力有显著提高。本发明实现了二型登革热病毒NS1蛋白多价纳米抗体的高效可溶表达，易于放大生产，成本低廉；具有更高稳定性和亲和力；更有大规模生产及应用的潜能。
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公开(公告)号：CN110079542A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910302244.8
申请日：2019-04-16
申请人： 华南理工大学
IPC分类号： C12N15/70 , C12N15/62 , C07K14/415 , A61K38/16 , A61P3/10
摘要： 本发明属于基因工程和生物制药技术领域，具体公开了一种降糖肽Aglycin的重组表达方法及其应用，将Aglycin通过自剪切内含肽、连接肽与自组装肽进行连接，构建能在体外自剪切的重组表达载体，将重组表达载体在大肠杆菌体内表达，获得重组表达菌株；重组表达菌株加入诱导剂进行诱导表达，离心收集菌体，对菌体进行破碎离心后得到沉淀，经诱导剂切割并离心得到上清，然后对切割后上清进行纯化，获得高纯度Aglycin。本发明首次通过基因工程的方法实现了Aglycin的可溶性表达，并且多肽具有一定α-葡萄糖苷酶抑制的降糖活性，可用于制备降糖多肽药物。
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公开(公告)号：CN109021086A
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201810868364.X
申请日：2018-08-02
申请人： 华南理工大学
IPC分类号： C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , A61K38/17 , A61P31/04
CPC分类号： C07K14/43563 , A61K38/00 , A61P31/04 , C12N15/70
摘要： 本发明公开了一种抗菌肽天蚕素A突变体及其编码基因、制备方法和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID No：3所示。编码上述突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID No：4所示。根据设计处的抗菌肽突变体PEW300的基因序列进行分子克隆，将其基因克隆至重组表达载体中，通过与自聚集短肽ELK16融合表达，实现突变体PEW300的高效表达。然后对获得的突变体肽PEW300进行9种指示菌的抑菌性能测试，结果显示抗菌肽PEW300的抑菌性能大大提高。并且具有较强的pH、热稳定性。添加高浓度的抗菌肽PEW300也不会出现溶血现象。
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