公开(公告)号：CN119372280A

公开(公告)日：2025-01-28

申请号：CN202411585746.3

申请日：2024-11-08

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 柯嘉豪 ,  李培 ,  叶春意 ,  缪雨杰 ,  庄诺 ,  王鑫林 ,  田梓熠 ,  李悦

IPC: C12Q1/02 ,  C12N5/04 ,  C12N15/65 ,  C12N15/82 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种利用红椿叶片原生质体检测亚细胞定位的方法，在红椿原生质体分离体系的基础上，利用红椿原生质体瞬时表达体系进行检测红椿TcDXS1和TcDXS5的亚细胞定位情况，简便、高效、快捷以及节约成本，能够快速高效地将外源基因在红椿叶片原生质体中瞬时表达，便于快速应用于红椿各类基因表达产物的亚细胞定位，为红椿基因功能研究提供了便捷的技术。

公开(公告)号：CN113215191B

公开(公告)日：2022-12-23

申请号：CN202110452887.8

申请日：2021-04-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 李培 ,  毛文迈 ,  宋慧云 ,  李悦 ,  王悦阳 ,  林慧娟 ,  姚驰 ,  陈晓阳

IPC: C12N15/84 ,  C12N1/20 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导的红椿遗传转化方法，所述方法包括如下步骤：以红椿的叶片为外植体，用携带有植物表达载体的根癌农杆菌的菌液侵染所述外植体；将经过侵染的所述外植体接种于共培养培养基，共培养；对经过共培养的所述外植体进行诱导培养，诱导培养包括：愈伤组织的诱导培养、不定芽的诱导培养、芽的诱导培养、根的诱导培养；所述菌液中含有乙酰丁香酮，所述共培养培养基中含有乙酰丁香酮。采用本发明的方法，成功实现农杆菌介导的红椿遗传转化，并且遗传转化率保持在10％左右，采用本发明的方法重复性及稳定性好，适用于批量化育苗，有利于农业产业化发展。

公开(公告)号：CN116355828A

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202310345770.9

申请日：2023-04-03

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 李培 ,  李悦 ,  宋慧云 ,  王志 ,  吴劲松 ,  周瑜

IPC: C12N5/04 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  A01H5/12 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种红椿原生质体分离与瞬时转化方法。本发明首次在红椿中建立了原生质体分离和瞬时表达体系，利用本发明方法得到的红椿原生质体产量可达89.17×106个/g，活力可达92.62％，瞬时表达转化效率可达29.02％；利用红椿原生质体作受体进行转化，绿色荧光蛋白GFP能够成功表达。本发明方法可为红椿相关基因功能验证和基因改良等提供技术支持。

公开(公告)号：CN110982928B

公开(公告)日：2022-06-21

申请号：CN201911397798.7

申请日：2019-12-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 宋慧云 ,  李培 ,  周玮 ,  段志豪 ,  毛文迈 ,  陈晓阳

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了虫害胁迫下红椿叶和茎组织的内参基因及其引物和应用。本发明筛选表达丰富且相对稳定的17个候选内参基因并设计其引物，利用麻楝蛀斑螟啃食后的红椿叶和嫩茎样品的cDNA为模板进行候选内参基因的qPCR扩增，得到CP值；采用GeNorm、NormFinder和BestKeeper这三个软件对候选内参基因的稳定性进行评价；获得虫害胁迫下红椿叶组织的内参基因PP2C59和UBC5B，虫害胁迫下红椿茎组织的内参基因Actin‑7和UBC5B；本发明的内参基因提高了红椿在麻楝蛀斑螟胁迫下相关基因表达量分析研究的稳定性和可靠性，填补了红椿虫害研究领域中缺少内参基因的空白。

公开(公告)号：CN110982928A

公开(公告)日：2020-04-10

申请号：CN201911397798.7

申请日：2019-12-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 宋慧云 ,  毛文迈 ,  李培 ,  周玮 ,  陈晓阳 ,  段志豪

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了虫害胁迫下红椿叶和茎组织的内参基因及其引物和应用。本发明筛选表达丰富且相对稳定的17个候选内参基因并设计其引物，利用麻楝蛀斑螟啃食后的红椿叶和嫩茎样品的cDNA为模板进行候选内参基因的qPCR扩增，得到CP值；采用GeNorm、NormFinder和BestKeeper这三个软件对候选内参基因的稳定性进行评价；获得虫害胁迫下红椿叶组织的内参基因PP2C59和UBC17，虫害胁迫下红椿茎组织的内参基因Actin-7和UBC5B；本发明的内参基因提高了红椿在麻楝蛀斑螟胁迫下相关基因表达量分析研究的稳定性和可靠性，填补了红椿虫害研究领域中缺少内参基因的空白。

公开(公告)号：CN106171993B

公开(公告)日：2019-01-08

申请号：CN201610567282.2

申请日：2016-07-15

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 欧阳昆唏 ,  李景剑 ,  陈晓阳 ,  张俊杰 ,  李俊成 ,  李培 ,  周玮

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开一种以黄梁木叶片为外植体的高效再生方法，属于植物组织培养技术领域。本发明以叶片作为外植体有其巨大的优势，取材方便、操作容易、来源广泛，有利于再生及遗传转化的重复进行等。因此，本发明以黄梁木无菌苗嫩叶为外植体，通过不定芽诱导、增殖、生根、炼苗移栽等过程成功获得了黄梁木离体再生植株，建立黄梁木高效再生体系，对于进行黄梁木优良品种的快速繁殖和大面积推广、促进黄梁木的产业化发展具有重要意义，并且为黄梁木遗传转化体系的构建奠定了基础，从而为在黄梁木中进行基因功能等分子生物学研究提供平台。

公开(公告)号：CN106818469A

公开(公告)日：2017-06-13

申请号：CN201611247958.6

申请日：2016-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 李培 ,  陈晓阳 ,  商园园 ,  李俊成 ,  张俊杰 ,  周玮

IPC: A01H4/00

CPC classification number: A01H4/001 ,  A01H4/008

Abstract: 本发明公开了一种以叶片为外植体的红椿再生方法。本发明的以叶片为外植体的高效组织培养和植株再生方法，可摆脱外界条件的影响，规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的红椿组培幼苗；与已经报道的以红椿大树茎段作为外植体构建再生体系相比，具有操作方便、取材广泛、可重复性强及效率高等优势。该方法可满足市场对种苗的需求，为红椿种质资源可持续利用奠定基础。

公开(公告)号：CN106718919A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611245113.3

申请日：2016-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈晓阳 ,  李培 ,  张俊杰 ,  李景剑 ,  周玮

IPC: A01H4/00

CPC classification number: A01H4/001 ,  A01H4/008

Abstract: 本发明公开了一种以下胚轴为外植体的红椿再生方法。本发明的以下胚轴为外植体的红椿高效组织培养和植株再生方法，可摆脱外界条件的影响，规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的红椿组培幼苗；与已经报道的以红椿大树茎段作为外植体构建再生体系相比，具有操作方便、取材广泛、可重复性强及效率高等优势。该方法可能满足市场对种苗的需求，为红椿种质资源可持续利用奠定基础。

公开(公告)号：CN106688890A

公开(公告)日：2017-05-24

申请号：CN201611247938.9

申请日：2016-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈晓阳 ,  李培 ,  商园园 ,  张俊杰 ,  李俊成 ,  周玮

IPC: A01H4/00

CPC classification number: A01H4/001 ,  A01H4/008

Abstract: 本发明公开了一种以子叶为外植体的红椿再生方法。本发明的以子叶为外植体的红椿高效组织培养和植株再生方法，可摆脱外界条件的影响，规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的红椿组培幼苗；与已经报道的以红椿大树茎段及种子作为外植体构建再生体系相比，具有操作方便、取材广泛、可重复性强及效率高等优势。该方法可满足市场对大量优质红椿种苗的需求，为红椿优质种质资源可持续利用及基因工程研究奠定基础。

公开(公告)号：CN113215191A

公开(公告)日：2021-08-06

申请号：CN202110452887.8

申请日：2021-04-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 毛文迈 ,  宋慧云 ,  李悦 ,  李培 ,  王悦阳 ,  林慧娟 ,  姚驰 ,  陈晓阳

IPC: C12N15/84 ,  C12N1/20 ,  A01H5/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导的红椿遗传转化方法，所述方法包括如下步骤：以红椿的叶片为外植体，用携带有植物表达载体的根癌农杆菌的菌液侵染所述外植体；将经过侵染的所述外植体接种于共培养培养基，共培养；对经过共培养的所述外植体进行诱导培养，诱导培养包括：愈伤组织的诱导培养、不定芽的诱导培养、芽的诱导培养、根的诱导培养；所述菌液中含有乙酰丁香酮，所述共培养培养基中含有乙酰丁香酮。采用本发明的方法，成功实现农杆菌介导的红椿遗传转化，并且遗传转化率保持在10％左右，采用本发明的方法重复性及稳定性好，适用于批量化育苗，有利于农业产业化发展。