一种固定线虫单条虫DNA粗提液及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN105483119A

    公开(公告)日:2016-04-13

    申请号:CN201511006217.4

    申请日:2015-12-25

    CPC classification number: C12Q1/6806 C12Q1/6888

    Abstract: 本发明属于分子生物学检测鉴定技术领域,具体涉及一种固定线虫单条虫DNA粗提液及其制备方法与应用。本发明通过线虫样品的洗涤、固定线虫样品的裂解以及DNA粗提液的制备等步骤,制备得到固定线虫单条虫DNA粗提液,该提取液进一步进行PCR扩增并检测,条带清晰,结果可靠,准确性、灵敏度和特异性高,操作简单,成本低,可用于线虫的分子鉴定。对于其他已固定植物寄生线虫的分子鉴定具有重要的理论依据和指导意义。

    用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法

    公开(公告)号:CN103014157B

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201210518233.1

    申请日:2012-12-05

    Abstract: 本发明公开了一种用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法,属于分子生物学检测鉴定技术领域。在分子生物学实验中由于线虫个体小,在提取单条线虫DNA模板的过程中存在容易混入其它试剂污染或者将单条线虫切断处理过程中易发生材料损失严重。本发明包含了一步直接在PCR管中简单刺破线虫虫体或虫卵的操作,不需要进行把线虫裂解液从其它载体转移到PCR管中,这样保证了线虫及其裂解物的存在,即DNA模板的存在,模板制备效率高。本发明对目前在植物寄生线虫鉴定研究等多个方面的分子诊断标记进行了PCR验证和部分进一步的酶切实验验证,效果显著。本发明还首次公布了用单个线虫虫卵作为模板进行植物寄生线虫的鉴定。

    用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法

    公开(公告)号:CN103014157A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201210518233.1

    申请日:2012-12-05

    Abstract: 本发明公开了一种用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法,属于分子生物学检测鉴定技术领域。在分子生物学实验中由于线虫个体小,在提取单条线虫DNA模板的过程中存在容易混入其它试剂污染或者将单条线虫切断处理过程中易发生材料损失严重。本发明包含了一步直接在PCR管中简单刺破线虫虫体或虫卵的操作,不需要进行把线虫裂解液从其它载体转移到PCR管中,这样保证了线虫及其裂解物的存在,即DNA模板的存在,模板制备效率高。本发明对目前在植物寄生线虫鉴定研究等多个方面的分子诊断标记进行了PCR验证和部分进一步的酶切实验验证,效果显著。本发明还首次公布了用单个线虫虫卵作为模板进行植物寄生线虫的鉴定。

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