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公开(公告)号:CN114774457B
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202210512254.6
申请日:2022-05-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种基因PlRACK1在调控荔枝霜疫霉生长、抗氧化和致病力中的应用。本发明通过试验证明,将基因PlRACK1的上下游序列分别扩增出来,再将NPTⅡ基因序列扩增出来,与PBSSK载体相连,同源重组后通过聚乙二醇介导的原生质体转化技术与CRISPR/Cas9敲除策略进行敲除。因为基因PlRACK1的缺失,所获得的突变体与野生型相比,荔枝霜疫霉生长速率显著减慢,荔枝霜疫霉致病力显著降低,使荔枝霜疫霉对氧化胁迫的耐受性显著降低。本发明证实基因PlRACK1是荔枝霜疫霉生长发育和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明荔枝霜疫霉的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号:CN115820596B
公开(公告)日:2025-05-06
申请号:CN202211487266.4
申请日:2022-11-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了基因PlYPK1及其在防治荔枝霜疫病中的应用,属于农作物病害绿色防控技术领域。本发明应用基于聚乙二醇介导的原生质体转化技术与CRISPR/Cas9敲除策略,通过构建PlYPK1敲除载体并通过PEG介导的原生质体转化,利用同源重组的方法将基因PlYPK1从荔枝霜疫霉中敲除,获得敲除突变体。该突变体与野生型相比,生长速率基本一致,致病力明显减弱,卵孢子产量显著减少。本发明证实PlYPK1是荔枝霜疫霉生长发育、侵染致病所必须的。我们的研究有助于深入阐明荔枝霜疫霉的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号:CN114774457A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210512254.6
申请日:2022-05-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种基因PlRACK1在调控荔枝霜疫霉生长、抗氧化和致病力中的应用。本发明通过试验证明,将基因PlRACK1的上下游序列分别扩增出来,再将NPTⅡ基因序列扩增出来,与PBSSK载体相连,同源重组后通过聚乙二醇介导的原生质体转化技术与CRISPR/Cas9敲除策略进行敲除。因为基因PlRACK1的缺失,所获得的突变体与野生型相比,荔枝霜疫霉生长速率显著减慢,荔枝霜疫霉致病力显著降低,使荔枝霜疫霉对氧化胁迫的耐受性显著降低。本发明证实基因PlRACK1是荔枝霜疫霉生长发育和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明荔枝霜疫霉的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号:CN114516903A
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202210233083.3
申请日:2022-03-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种由荔枝霜疫霉分泌的植物免疫激活蛋白PlAvh23及其应用。本发明鉴定了一个新的荔枝霜疫霉RXLR类效应蛋白PlAvh23,其氨基酸序列选自如下任一序列:(a)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;(b)如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列;(c)如SEQID NO:6所示的氨基酸序列。该植物免疫激活蛋白PlAvh23能够诱导植物产生免疫反应,减少病原菌的侵染,为提高植物抗性提供了新途径,可以应用于荔枝霜疫病的防治。
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公开(公告)号:CN112143654B
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN202010933331.6
申请日:2020-09-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于植物病害生物防治技术领域,公开了一株拟康宁木霉菌及其在防治荔枝炭疽病中的应用。该菌株名称为拟康宁木霉菌(Trichoderma koningiopsis)TJ5,于2020年8月8日保藏在广东省微生物菌种保藏中心,简称GDMCC,地址:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所,保藏号为GDMCC No:61129。本发明菌株为从荔枝上筛选到的拮抗菌,由于其与荔枝长期共存,互惠共生,形成了一系列与其相似的生存机制,利用其来防治荔枝病害,对荔枝的食用及其加工产品来说更加安全可靠;该菌株对荔枝炭疽病菌具有效果极佳的抑制作用,抑菌能力强,对于防治荔枝炭疽病具有重要的现实意义。
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公开(公告)号:CN112080577B
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202010968521.1
申请日:2020-09-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/31 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了荔枝霜疫霉生长发育和侵染阶段的内参基因及其引物和应用。本发明选取4个荔枝霜疫霉基因PlACTIN、PLGAPDH、PlrpS5和Pl006400,通过实时荧光定量PCR的方法测定了这些基因在荔枝霜疫霉菌丝、孢子囊、游动孢子、休止孢、休止孢萌发和侵染个阶段的表达量变化,比较所选基因表达量稳定性,发现了Pl006400和PlACTIN表达量稳定可作为内参基因。本发明的内参基因Pl006400和PlACTIN的特异性引物引物可广泛应用于荔枝霜疫霉发育及其侵染荔枝各阶段的基因表达研究,填补了荔枝霜疫霉缺少可靠内参基因的空白,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN110468085B
公开(公告)日:2021-04-23
申请号:CN201910892912.7
申请日:2019-09-20
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物农药领域,公开了一株荔枝内生短小芽孢杆菌及其在荔枝霜疫病防治中的应用。将该荔枝内生短小芽孢杆菌命名为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)FRO26,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,简称GDMCC,地址:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所,保藏号为GDMCC No:60725,保藏时间为2019年7月11日。本发明的荔枝内生短小芽孢杆菌来源于荔枝内生细菌,能很好的在荔枝果实表面定殖;该菌株及其生物制剂均对荔枝霜疫霉病菌具有强烈的抑制作用,具有优异的防治荔枝霜疫病的生防作用;来源环保无毒性,对荔枝的食用及其加工产品更安全可靠,具有很好的开发应用前景。
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公开(公告)号:CN106434385A
公开(公告)日:2017-02-22
申请号:CN201610965043.2
申请日:2016-10-31
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12N1/14
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种从固体培养基中提取较纯净荔枝霜疫霉菌卵孢子的便捷方法。本发明方法通过在固体培养基表面覆盖尼龙薄膜后再于尼龙薄膜表面接种荔枝霜疫霉菌,按常规方法培养后,撕开薄膜,从固体培养基中得到荔枝霜疫霉卵孢子。本发明方法通过在培养基表面覆盖尼龙薄膜后再接种荔枝霜疫霉菌进行培养,菌丝基本生长在尼龙薄膜表面,而只有少量透过薄膜生长于培养基表面,且培养基表面菌落生长良好,含有大量卵孢子,撕开薄膜即可基本实现菌丝与荔枝霜疫霉卵孢子的分离,在固体培养基中获得大量、纯净且具有活力的荔枝霜疫霉卵孢子。本发明方法能快捷获得大量、纯净且具有活力的卵孢子,大大提高开发对卵孢子研究的可能性。
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公开(公告)号:CN116904485A
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202310689954.7
申请日:2023-06-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种基因Pl007944在调控荔枝霜疫霉致病力中的应用。本发明通过试验证明,将基因Pl007944的上下游序列分别扩增出来,与PBSSK载体相连,同源重组后通过聚乙二醇介导的原生质体转化技术与CRISPR/Cas9敲除策略进行敲除。因为基因Pl007944的缺失,所获得的突变体与野生型相比,荔枝霜疫霉致病力显著降低。本发明证实基因Pl007944是荔枝霜疫霉致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明荔枝霜疫霉的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号:CN114437188B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202210233084.8
申请日:2022-03-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种荔枝霜疫霉分泌型蛋白激发子PlPeL8及其应用。本发明中的蛋白激发子PlPeL8的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,将其编码基因构建入植物表达载体中再转化农杆菌并在本氏烟草细胞瞬时表达,发现其可以诱导植物防御反应,包括引起植物细胞过敏性坏死,诱导活性氧迸发和植物免疫相关通路如水杨酸和茉莉酸通路标志基因的上调表达,能够显著提高植物对疫霉菌的抗性,为提高植物抗病性、减轻病害发生提供了新的途径,在现代农业绿色发展上具有广阔的应用前景。
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