山羊与绵羊肠类器官的培养基及其应用

    公开(公告)号:CN117210388A

    公开(公告)日:2023-12-12

    申请号:CN202311403118.4

    申请日:2023-10-25

    Abstract: 本发明属于类器官的培养技术领域,具体涉及山羊与绵羊肠类器官的培养基及其应用。本发明通过在基础培养基上添加SB202190、LY2157299和Y‑27632,有利于维持山羊和绵羊肠道类器官的生长、分化和传代。进一步的,通过使用蛋白质物质IGF‑1和FGF‑2替代SB202190,有利于获得更优的培养效果。此外,通过优化隐窝分离方法,可以得到高质量的隐窝。通过ELISA测定炎症相关因子水平,建立患者特异性的类器官水平疾病模型,有利于高通量精准筛选患者特异性药物。因此,本发明提供的技术方案不仅能够高效、成功培养羊小肠类器官,还能将其准确用于药物筛选。

    一种适用于多种动物的染色体制备方法

    公开(公告)号:CN114720232A

    公开(公告)日:2022-07-08

    申请号:CN202210349509.1

    申请日:2022-04-02

    Abstract: 本发明提供了一种适用于多种动物的染色体制备方法,涉及生物技术领域。本发明的染色体制备方法包括如下步骤:经秋水仙素处理后的细胞,用0.2%~0.3%胰酶消化细胞2~5min后终止消化,收集细胞;将收集的细胞经低渗、预固定、固定后制成细胞悬液;将细胞悬液滴在玻片上制得染色体标本;将染色体标本用0.1%~0.2%胰蛋白酶溶液消化1~3min,再用Giemsa染液染色后用水冲洗,自然晾干即可。本发明的制备方法能够获得更多分散良好、长短适中、轮廓清晰、完整的标准分裂相,可以制出各类细胞的染色体标本。

    人胚胎干细胞向神经干细胞诱导的简易方法

    公开(公告)号:CN117511873A

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202311509073.9

    申请日:2023-11-13

    Abstract: 本发明涉及细胞工程技术领域,特别是涉及人胚胎干细胞向神经干细胞诱导的简易方法。本发明首次仅使用一种小分子抑制剂CHIR‑99021作为诱导剂,即可获得稳定传代的类神经干细胞;在之前神经干细胞诱导的报道中,诱导培养基和维持培养基需要更换不同培养基,本发明提供的方法只需使用一种培养基即可完成诱导并且支持细胞增殖和自我更新,所需成本更低,操作简单便捷,适合NSCs进行大规模生产并推向临床试验,为使用干细胞移移植治疗神经系统疾病提供材料,在未来的临床应用中拥有极大前景。

    小鼠/人胚胎干细胞来源的类囊胚诱导培养液及小鼠/人的类囊胚诱导培养方法

    公开(公告)号:CN115927167A

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202211671175.6

    申请日:2022-12-26

    Abstract: 一种小鼠和人胚胎干细胞来源的类囊胚诱导培养液及小鼠和人的类囊胚诱导培养方法,利用化学成分明确的类囊胚诱导培养液,使小鼠/人的ESCs分化成自然囊胚所包含的三种不同细胞谱系,继续利用该类囊胚诱导培养液,将上一步获得的小鼠/人的含有三种不同细胞谱系的混合状态细胞,在悬浮培养的条件下诱导获得小鼠和人的类囊胚结构。本发明利用特定的类囊胚诱导培养液及诱导培养方法,使小鼠/人的ESCs自我组装产生类囊胚结构,通过实验手段验证了小鼠和人的类囊胚在形态、大小、细胞数量、细胞分布以及基因表达特征方面与自然囊胚相似,为体外组织形态发生、类器官建模和药物筛选等提供新的研究模型。

    提高DNA甲基化的小鼠胚胎干细胞培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法

    公开(公告)号:CN110791472B

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN201911135063.7

    申请日:2019-11-19

    Abstract: 本发明公开了一种提高DNA甲基化的小鼠胚胎干细胞培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法,第一步将小鼠2i/L‑ESCs用N2B27中添加白血病抑制因子(LIF培养液)进行诱导获得只依赖LIF的小鼠胚胎干细胞(L‑ESCs),并鉴定了其多能性。第二步是将小鼠2i/LIF‑ESCs培养体系换成15%胎牛血清中添加白血病抑制因子的培养液(S/L培养液),培养5天后,再替换成LIF培养液进行培养,高效率得到L‑ESCs。更换S/L培养液的主要目的是为了提高小鼠ESCs的DNA甲基化水平,这样可有效提高LIF依赖性ESCs的重编程效率。本发明首先诱导了只依赖LIF的小鼠ESCs,并鉴定了其特性;其次利用特定的诱导方法提高了LIF依赖性小鼠ESCs重编程效率,对哺乳动物多能干细胞体外培养提供新思路。

    提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法

    公开(公告)号:CN110804581A

    公开(公告)日:2020-02-18

    申请号:CN201911136323.2

    申请日:2019-11-19

    Abstract: 本发明公开了一种提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法,第一步是从小鼠ESCs培养体系中去除胎牛血清,使小鼠ESCs仍保持原有的多能性特征。第二步是利用视黄酸(RA)在不含有胎牛血清的培养液中提高小鼠ESCs中2C-like细胞的比例,结果从对照组的0.2%提高到3.3%。本发明利用特定的诱导方法提高了小鼠ESCs中2C-like细胞比例,并通过实验手段验证了小鼠ESCs在不含有胎牛血清的培养液中2C-like基因表达水平和蛋白水平,对哺乳动物全能干细胞研究提供新思路。

    以干细胞为基础的哺乳动物人工胚胎构建‑动物克隆繁育的方法及其模型

    公开(公告)号:CN106754654A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611093084.3

    申请日:2016-12-02

    Abstract: 本发明公开了一种以干细胞为基础的哺乳动物人工胚胎构建‑动物克隆繁育的方法及其模型,以哺乳动物卵子透明带或者相当于透明带的人工合成结构作为人工胚胎的干细胞受体,置入干细胞后在体外条件下使其诱导分化成哺乳动物着床前胚胎结构。两个关键技术设计分别是以干细胞多能性向初期胚胎的分化能力应用、构建的干细胞‑卵子透明带复合体的早期胚胎分化诱导。主要四个技术步骤是干细胞的准备、动物卵子或早期胚胎透明带的准备、人工胚胎构建与细胞分化诱导、动物克隆繁育。这种方法有可能在未来成为动物克隆繁育技术产业化应用的重要技术手段,同时具有重要的医学应用价值。

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