公开(公告)号：CN116987739A

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202310177138.8

申请日：2023-02-28

Applicant: 兰州大学

Inventor： 祝秉东 ,  王娟 ,  米友军 ,  谢涛 ,  徐昆 ,  龚洋 ,  何朴 ,  杜蕴杰 ,  张丹 ,  刘昱淇

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/64 ,  C12N15/44 ,  C12N15/62 ,  C07K14/11 ,  C07K19/00 ,  A61K39/04 ,  A61K39/39 ,  A61P31/06

Abstract: 本发明提供一种包含结核分枝杆菌抗原的重组病毒样颗粒的制备方法，步骤如下：在双表达载体的pPH启动子后面插入序列表中SEQ ID No.6，在pP10启动子后面插入序列表中SEQ ID No.7，得到pFastBacDual‑MS质粒；将LT20融合蛋白通过NdeⅠ和EcoRⅠ酶构建入pFastBacDual‑MS质粒中，得到重组质粒pFastBacDual‑MS‑L20；然后转化至DH10BacTM大肠杆菌菌株，转座后形成重组杆状病毒质粒Bacmid‑MS‑L20，最后转染ExpiSf9细胞，胞内共表达结构蛋白，自组装形成重组病毒样颗粒。本发明的病毒样颗粒能够制备结核亚单位疫苗。

公开(公告)号：CN119345344A

公开(公告)日：2025-01-24

申请号：CN202411300382.X

申请日：2024-09-18

Applicant: 兰州大学

Inventor： 祝秉东 ,  刘昱淇 ,  李菲 ,  米友军 ,  王娟 ,  姚田莉 ,  陈丹丹 ,  王亚红 ,  何朴 ,  徐晓楠

IPC: A61K39/04 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  A61P31/06 ,  A61K39/39 ,  A61P37/04

Abstract: 本发明属于生物技术领域，尤其涉及基于融合蛋白的结核亚单位疫苗及其制备方法，本发明涉及两种结核亚单位疫苗及其制备方法，每种疫苗包含一个融合蛋白。通过基因工程技术，将MPT6461‑170、Rv2660c、Rv264521‑80基因重组入原核表达载体获得融合蛋白LT30；将Rv2645、Rv2660c基因重组入原核表达载体获得融合蛋白LT25。这两种融合蛋白在原核表达系统中大量表达，经过凝胶过滤层析纯化，并进行质粒保有率和规模化制备研究。LT30和LT25分别与DP(佐剂)构成亚单位疫苗，在小鼠体内有效诱导结核抗原特异性细胞免疫应答。特别是，LT25/DP能够提高小鼠针对结核分枝杆菌H37Ra感染的保护效果，有望成为新型结核亚单位疫苗。