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公开(公告)号：CN114672447B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202011572752.7
申请日：2020-12-24
Applicant: 中国科学院微生物研究所
Abstract: 本发明公开了一种具有自絮凝能力的菌株及其制备方法与应用。本发明公开的具有自絮凝能力的菌株，其制备方法包括：敲除出发菌株中的多糖合成基因，或抑制出发菌株中多糖合成基因的表达量，或降低出发菌株中的多糖合成基因编码蛋白质的含量或活性，得到目的重组菌。本发明通过在盐单胞菌中敲除三个多糖合成基因簇PS1、PS2、PS4，获得了具有自絮凝能力的菌株ΔPS124，该菌株具有胞外多糖缺失表型和在液体培养基中自絮凝现象。
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公开(公告)号：CN108373510B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201810417080.9
申请日：2018-05-04
Applicant: 中国科学院微生物研究所
Abstract: 本发明公开了一种PhaP‑Tac的微生物合成及其对疏水材料PHBV的修饰方法，在微生物体内融合表达PHA颗粒结合蛋白PhaP和一种抗菌肽Tac(tachyplesin I,简称为Tac)所形成的一种融合蛋白PhaP‑Tac，然后利用PhaP与疏水材料表面间的疏水相互作用，将抗菌肽锚定到疏水材料表面，从而赋予疏水材料抗菌性能。其使用大肠杆菌作为表达宿主表达纯化了细菌来源的PhaP和中华鲎抗菌肽Tac的融合蛋白PhaP‑Tac，赋予PHA材料抗菌活性，经过PhaP‑Tac进行表面修饰的聚3‑羟基丁酸‑3‑羟基戊酸酯(PHBV)可有效的抑制革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的生长，而且经过修饰的PHBV材料亲水性提高，有利于成纤维细胞附着生长，通过PhaP蛋白将抗菌肽对PHBV材料进行修饰赋予材料抗菌活性，对抑制局部细菌感染是一种行之有效的策略。
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公开(公告)号：CN108373510A
公开(公告)日：2018-08-07
申请号：CN201810417080.9
申请日：2018-05-04
Applicant: 中国科学院微生物研究所
CPC classification number: C07K14/195 , C07K14/43504 , C07K2319/00 , C08G63/912 , C12N15/70 , C12N2800/22
Abstract: 本发明公开了一种PhaP-Tac的微生物合成及其对疏水材料PHBV的修饰方法，在微生物体内融合表达PHA颗粒结合蛋白PhaP和一种抗菌肽Tac(tachyplesin I,简称为Tac)所形成的一种融合蛋白PhaP-Tac，然后利用PhaP与疏水材料表面间的疏水相互作用，将抗菌肽锚定到疏水材料表面，从而赋予疏水材料抗菌性能。其使用大肠杆菌作为表达宿主表达纯化了细菌来源的PhaP和中华鲎抗菌肽Tac的融合蛋白PhaP-Tac，赋予PHA材料抗菌活性，经过PhaP-Tac进行表面修饰的聚3-羟基丁酸-3-羟基戊酸酯(PHBV)可有效的抑制革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的生长，而且经过修饰的PHBV材料亲水性提高，有利于成纤维细胞附着生长，通过PhaP蛋白将抗菌肽对PHBV材料进行修饰赋予材料抗菌活性，对抑制局部细菌感染是一种行之有效的策略。
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公开(公告)号：CN101139575A
公开(公告)日：2008-03-12
申请号：CN200710119986.4
申请日：2007-08-06
Applicant: 中国科学院微生物研究所
Abstract: 本发明公开了一种极端嗜盐古菌聚羟基脂肪酸酯合酶及其编码基因与应用。该聚羟基脂肪酸酯合酶，是由PhaEHh亚基和PhaCHh亚基组成；所述PhaEHh亚基具有序列表中序列1的氨基酸残基序列或将序列表中序列1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加的氨基酸残基序列；所述PhaCHh亚基具有序列表中序列2的氨基酸残基序列或将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加的氨基酸残基序列。本发明的聚羟基脂肪酸酯合酶具有很高的PHA合酶活性，将本发明的聚羟基脂肪酸酯合酶基因phaECHh导入宿主菌中可高效表达PHA合酶，可以提高极端嗜盐古菌PHA合酶活性及PHA产量。
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公开(公告)号：CN114507684B
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202011277932.2
申请日：2020-11-16
Applicant: 中国科学院微生物研究所
Abstract: 本发明公开了一种抑制地中海富盐菌中目的基因表达的方法。本发明公开的抑制地中海富盐菌中目的基因表达的方法，包括：1)敲除出发地中海富盐菌中cas3基因，得到cas3敲除菌；2)向cas3敲除菌中导入转录抑制目的基因表达的crRNA的表达盒，得到重组地中海富盐菌，与出发地中海富盐菌相比，重组地中海富盐菌中所述目的基因表达降低。实验证明，本发明的方法可以对地中海富盐菌的基因进行有效的抑制，最低可将目标基因的转录水平抑制到原来的2％，操作流程简单。本发明为地中海富盐菌必需基因的功能研究及合成生物学改造提供了新的工具，推进了地中海富盐菌作为生产高值产品的底盘细胞的研究进程。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114517206B
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202011277922.9
申请日：2020-11-16
Applicant: 中国科学院微生物研究所
Abstract: 本发明公开了一种重组地中海富盐菌及其在制备PHBV中的应用。本发明公开的重组地中海富盐菌，其构建方法包括：1)敲除出发地中海富盐菌中cas3基因，得到cas3敲除菌；2)向cas3敲除菌中导入转录抑制柠檬酸合酶基因表达的crRNA的表达盒，得到重组地中海富盐菌。实验证明，本发明的重组地中海富盐菌具有更高的生物量和更快的葡萄糖消耗速率，细胞干重和PHBV积累量均有明显的提升。本发明的重组地中海富盐菌具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN104448258A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410658043.9
申请日：2014-11-18
Applicant: 中国科学院微生物研究所
Abstract: 本发明公开了一种PHBV聚合物、制备方法及利用PHBV聚合物制作的止血材料，所述PHBV聚合物是3-羟基丁酸3HB和3-羟基戊酸3HV的共聚物，所述聚合物的主链上包括至少五十个聚3-羟基丁酸的嵌段和至少五十个聚3-羟基戊酸的嵌段。所述制备方法包括：将Haloferax mediterranei ES1菌株接种于发酵培养基中，在发酵温度为37℃，搅拌转速为300-500r/min，通气量为1.25:1vvm，通过2M盐酸溶液或2M氢氧化钠溶液自动流加调节pH稳定在6.9-7.1范围内；通气量为1.25:1vvm，罐体内压为1个大气压的条件下发酵36～48h；从发酵液中提取所述PHBV聚合物。
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公开(公告)号：CN102268424B
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201010195738.X
申请日：2010-06-01
Applicant: 中国科学院微生物研究所
IPC: C12N9/88 , C12N15/60 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12P7/62 , C12P7/42 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种极端嗜盐古菌中与可生物降解材料PHBV的3-HV单体合成相关的β-酮硫解酶的研究与应用，本发明提供的蛋白是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与PHBV和/或3-HV合成相关的由1)衍生的蛋白质。本发明实验证明，将与聚羟基丁酸羟基戊酸酯和/或3-羟基脂肪酸合成相关的蛋白的编码基因导入宿主菌中可以产生合成PHBV的3-HV单体摩尔百分比大于所述宿主菌产生3-HV。
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公开(公告)号：CN118028333A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202211421595.9
申请日：2022-11-14
Applicant: 中国科学院微生物研究所 , 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种提高盐单胞菌转化效率的方法及所得菌株与应用。本发明公开的一种提高盐单胞菌转化效率的方法，包括敲除出发盐单胞菌株中基因NotI或基因NotI、dptH、dptG与dptF，得到与出发盐单胞菌株相比转化效率提高的NotI缺失盐单胞菌，实现盐单胞菌转化效率的提高。本发明通过敲除出发盐单胞菌株中基因NotI可以获得转化效率提高2000倍以上的基因敲除菌株；在此基础之上，通过敲除dptH、dptG与dptF使菌株的转化效率进一步提高2倍以上，并且所得菌株对多种复杂模板的不同质粒转化效率均大幅提高。本发明的菌株可用于遗传操作、基因编辑、高通量筛选，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114717233A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202110011391.7
申请日：2021-01-06
Applicant: 中国科学院微生物研究所
Abstract: 本发明公开了一种双sgRNA结合RecET系统敲除盐单胞菌DNA大片段的方法。本发明公开的敲除盐单胞菌DNA大片段的方法中，所敲除DNA大片段大于等于10kb，该方法包括：将具有如下1)‑4)特征的重组载体导入出发盐单胞菌中，实现DNA大片段的敲除；1)能转录sgRNA1与sgRNA2，sgRNA1与sgRNA2分别靶向所敲除DNA大片段的两端；2)含有出发盐单胞菌中所敲除DNA大片段的上游同源臂和下游同源臂；3)能表达Cas9；4)能表达RecE蛋白质和RecT蛋白质。本发明解决了目前盐单胞菌中无法实验大片段DNA敲除的问题，具有广泛的应用前景。
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