一种抑制地中海富盐菌中目的基因表达的方法

    公开(公告)号:CN114507684B

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202011277932.2

    申请日:2020-11-16

    Inventor: 向华 韩静 林琳

    Abstract: 本发明公开了一种抑制地中海富盐菌中目的基因表达的方法。本发明公开的抑制地中海富盐菌中目的基因表达的方法,包括:1)敲除出发地中海富盐菌中cas3基因,得到cas3敲除菌;2)向cas3敲除菌中导入转录抑制目的基因表达的crRNA的表达盒,得到重组地中海富盐菌,与出发地中海富盐菌相比,重组地中海富盐菌中所述目的基因表达降低。实验证明,本发明的方法可以对地中海富盐菌的基因进行有效的抑制,最低可将目标基因的转录水平抑制到原来的2%,操作流程简单。本发明为地中海富盐菌必需基因的功能研究及合成生物学改造提供了新的工具,推进了地中海富盐菌作为生产高值产品的底盘细胞的研究进程。

    一种重组地中海富盐菌及其在制备PHBV中的应用

    公开(公告)号:CN114517206B

    公开(公告)日:2024-05-24

    申请号:CN202011277922.9

    申请日:2020-11-16

    Inventor: 韩静 向华 林琳

    Abstract: 本发明公开了一种重组地中海富盐菌及其在制备PHBV中的应用。本发明公开的重组地中海富盐菌,其构建方法包括:1)敲除出发地中海富盐菌中cas3基因,得到cas3敲除菌;2)向cas3敲除菌中导入转录抑制柠檬酸合酶基因表达的crRNA的表达盒,得到重组地中海富盐菌。实验证明,本发明的重组地中海富盐菌具有更高的生物量和更快的葡萄糖消耗速率,细胞干重和PHBV积累量均有明显的提升。本发明的重组地中海富盐菌具有很好的应用前景。

    一种PHBV聚合物、制备方法及利用PHBV聚合物制作的止血材料

    公开(公告)号:CN104448258A

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201410658043.9

    申请日:2014-11-18

    Inventor: 韩静 向华 侯靖

    Abstract: 本发明公开了一种PHBV聚合物、制备方法及利用PHBV聚合物制作的止血材料,所述PHBV聚合物是3-羟基丁酸3HB和3-羟基戊酸3HV的共聚物,所述聚合物的主链上包括至少五十个聚3-羟基丁酸的嵌段和至少五十个聚3-羟基戊酸的嵌段。所述制备方法包括:将Haloferax mediterranei ES1菌株接种于发酵培养基中,在发酵温度为37℃,搅拌转速为300-500r/min,通气量为1.25:1vvm,通过2M盐酸溶液或2M氢氧化钠溶液自动流加调节pH稳定在6.9-7.1范围内;通气量为1.25:1vvm,罐体内压为1个大气压的条件下发酵36~48h;从发酵液中提取所述PHBV聚合物。

    一种基于地中海富盐菌和pyrF基因的遗传操作系统及其应用

    公开(公告)号:CN102676415B

    公开(公告)日:2014-01-01

    申请号:CN201110054456.2

    申请日:2011-03-08

    Inventor: 向华 刘海龙

    Abstract: 本发明公开了一种基于地中海富盐菌和pyrF基因的遗传操作系统及其应用。该遗传操作系统包括重组嗜盐古菌和重组质粒载体;重组嗜盐古菌按照包括如下步骤的方法制备得到:使含有SEQ ID NO:1所示蛋白的编码基因的出发嗜盐古菌中的SEQ IDNO:1所示蛋白的编码基因的功能丧失,得到的重组菌为所述重组嗜盐古菌;重组质粒载体中至少含有如下元件:在大肠杆菌中复制所需的复制原点、用于筛选大肠杆菌转化子的抗性选择标记基因的表达盒、SEQ ID NO:1所示蛋白的编码基因的表达盒、供外源基因插入的多克隆位点。该遗传操作系统可作为一个高效的基因敲除系统,可以对Hfx.mediterranei进行广泛的基因功能研究和代谢途径阐明。实验证明,用本发明系统进行遗传转化获得阳性重组子的频率大大提高。

    一种热稳定海藻糖合成酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN1746299A

    公开(公告)日:2006-03-15

    申请号:CN200410073883.5

    申请日:2004-09-07

    Abstract: 本发明公开了海藻糖合成酶及其编码基因与应用,其目的是提供一种热稳定的海藻糖合成酶及其编码基因与该海藻糖合成酶的表达方法,和利用该海藻糖合成酶生产海藻糖的方法。本发明所提供的海藻糖合成酶,是具有序列表中的SEQ ID №:2的氨基酸残基序列的蛋白质或是将序列表中SEQ ID №:2的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且可催化海藻糖合成的蛋白质。本发明的海藻糖合成酶可以葡萄糖和α-1-磷酸葡萄糖为反应底物,催化合成海藻糖,为工业化酶法生产海藻糖提供了一条新的途径。

    一株嗜盐碱杆菌及其专有质粒与应用

    公开(公告)号:CN1432644A

    公开(公告)日:2003-07-30

    申请号:CN02100714.4

    申请日:2002-01-18

    Abstract: 本发明的名称为一株嗜盐碱杆菌及其专有质粒与应用。本发明提供了一株极端嗜盐嗜碱古菌—嗜盐碱杆菌(Natronobacterium sp.AS-7091)CGMCC №0673,该嗜盐碱杆菌具有序列1的质粒pNB101。由嗜盐碱杆菌(Natronobacteriumsp.AS-7091)及其突变体或变异体提供的质粒pNB101及其衍生质粒和重组载体,可转化极端嗜盐嗜碱古菌,尤其是嗜盐碱杆菌属(Natronobacterium)及与其极端嗜盐嗜碱古菌亲缘较近的中性极端嗜盐古菌,用于研究和开发这类微生物资源。

    一种重组地中海富盐菌及其在制备PHBV中的应用

    公开(公告)号:CN114517206A

    公开(公告)日:2022-05-20

    申请号:CN202011277922.9

    申请日:2020-11-16

    Inventor: 韩静 向华 林琳

    Abstract: 本发明公开了一种重组地中海富盐菌及其在制备PHBV中的应用。本发明公开的重组地中海富盐菌,其构建方法包括:1)敲除出发地中海富盐菌中cas3基因,得到cas3敲除菌;2)向cas3敲除菌中导入转录抑制柠檬酸合酶基因表达的crRNA的表达盒,得到重组地中海富盐菌。实验证明,本发明的重组地中海富盐菌具有更高的生物量和更快的葡萄糖消耗速率,细胞干重和PHBV积累量均有明显的提升。本发明的重组地中海富盐菌具有很好的应用前景。

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