一种橡胶树半胱氨酸蛋白酶编码基因HbSAG12H1及其应用

    公开(公告)号:CN104212824B

    公开(公告)日:2017-04-12

    申请号:CN201410356280.X

    申请日:2014-07-24

    发明人: 邹智 龚俊 杨礼富

    IPC分类号: C12N15/57 C12N9/50 C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种橡胶树半胱氨酸蛋白酶编码基因HbSAG12H1,具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,其cDNA长1524bp,包含一1038bp的开放读码框(ORF),编码345个氨基酸,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。根据基因序列设计引物,可对基因的表达水平进行定量,其表达丰度与叶片衰老水平的变化趋势一致,可用于评估叶片是否衰老及衰老水平。该基因的获得,为筛选橡胶树衰老叶片及建立橡胶树叶片衰老诱导体系创造了条件,具有重要的理论意义和潜在的商业价值。

    一种诱导橡胶树叶片衰老的方法

    公开(公告)号:CN103907638A

    公开(公告)日:2014-07-09

    申请号:CN201410106701.3

    申请日:2014-03-21

    发明人: 邹智 龚俊 杨礼富

    IPC分类号: A01N57/20 A01P21/00 A01G7/06

    摘要: 本发明公开了一种诱导橡胶树叶片衰老的方法。本发明方法包括如下步骤:1)将橡胶树叶片置于液体A中浸泡30-180s;所述液体A为添加有表面活性剂的乙烯利溶液,所述乙烯利在所述液体A中的终浓度为5μM-0.5M;2)将步骤1)浸泡过的所述橡胶树叶片用透明塑料袋密封,18-36h后去袋;3)直至所述橡胶树叶片中叶绿素含量低于未经所述液体A浸泡处理的对照橡胶树叶片中叶绿素含量时,即获得橡胶树衰老叶片。实验证明,本发明达到诱导叶片衰老的效果,且该方法不仅避免了橡胶树自然衰老叶片的获取受季节限制的缺陷,同时具成本低、操作简单、周期短、单次处理可获得大量均一性材料等优点,可满足相关分子生物学研究需要,具良好的现实意义和应用价值。

    一种橡胶树乳管表达的多酚氧化酶、其编码基因及应用

    公开(公告)号:CN102719409B

    公开(公告)日:2015-02-11

    申请号:CN201210215924.4

    申请日:2012-06-28

    摘要: 本发明公开了一种橡胶树乳管表达的多酚氧化酶、其编码基因及应用。该多酚氧化酶基因可在橡胶树的乳管细胞中表达,具有序列表中SEQ ID NO:1的序列,命名为HbPPO1。HbPPO1编码600个氨基酸,具有序列表中SEQ ID NO:2的序列,其分子量约为68kDa,等电点约为8.45,带电荷数约为7.96,碱性蛋白;该酶或其衍生蛋白至少可用于食品和工业领域中漂白或氧化有色物质;利用该基因的部分或全部序列反义表达至少可抑制橡胶树组培中的褐化现象以及延长橡胶树的排胶时间,从而提高橡胶产量;利用该基因或经过一个或几个碱基对的替代和/或插入和/或缺失而获得的功能性衍生基因过量表达至少可以提高橡胶树的抗病虫能力。

    一种规模化筛选微生物耐碱相关基因的方法

    公开(公告)号:CN101063174A

    公开(公告)日:2007-10-31

    申请号:CN200710099677.5

    申请日:2007-05-28

    发明人: 杨礼富 王真辉

    IPC分类号: C12Q1/68 C12P19/34

    摘要: 本发明属于微生物工程领域,涉及一种规模化筛选微生物耐碱相关基因的方法。特点是采集典型的碱性环境土壤样品,通过粗提和纯化获得土壤样品的宏基因组DNA,然后用宏基因组DNA部分酶切片段与载体之间的连接产物电激转化大肠杆菌缺陷株E,通过筛选获得阳性克隆,并对阳性克隆携带的耐碱相关基因进行亚克隆和功能鉴定。本发明可以规模化克隆微生物的耐碱相关基因,用于耐碱作物和微生物的分子育种,进而充分开发和利用盐碱地以及进行高(盐)碱环境的污染修复。

    一种橡胶树HbWRKY82基因及其应用

    公开(公告)号:CN109097367A

    公开(公告)日:2018-12-28

    申请号:CN201710467754.1

    申请日:2017-06-20

    摘要: 本发明提供了一种橡胶树HbWRKY82基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了该HbWRKY82基因编码的蛋白质及该基因的应用。本发明首次从橡胶树中克隆得到HbWRKY82基因,该基因具有转录因子功能,定位于细胞核中,该基因的表达受乙烯利诱导,且在叶片衰老过程中和死皮橡胶树中下调表达,具有反向调控功能。过量表达后能提高转基因植株对高盐和干旱等胁迫环境的耐受力,同时还具有调控叶片衰老的功能,在橡胶树的生长发育及响应生物与非生物逆境胁迫反应中起着重要的调控作用。将来利用HbWRKY82基因对植物进行遗传改良,可为提高植物耐盐性和耐旱性等抗逆性,以及延迟叶片衰老提供有效的基因资源。

    一种橡胶树死皮康复营养液

    公开(公告)号:CN103708904A

    公开(公告)日:2014-04-09

    申请号:CN201310554320.7

    申请日:2013-11-08

    IPC分类号: C05G3/00

    摘要: 本发明提供一种橡胶树死皮康复营养液,其组成为:四水硝酸钙1-30g/L、七水硫酸镁1-10g/L、磷酸二氢钾0.1-10g/L、七水硫酸锰0.01-0.1g/L、七水硫酸锌0.001-0.01g/L、硼酸0.01-0.1g/L、钼酸0.0001-0.01g/L、多聚磷酸铵0.1-1g/L、腐植酸钾0.1-10g/L、硫代硫酸钠0.1-1g/L、桉油0.01-1mL/L、解磷细菌wpm-01 2.5×1012CFU/L、解磷细菌wpm-02 2.5×1012CFU/L、渗透剂0.1-2mL/L,以水配制。本品能够有效地预防和减缓橡胶树死皮发生,对于橡胶树死皮修复效果显著。

    一种高通量克隆微生物Na+/H+逆向转运蛋白基因的方法

    公开(公告)号:CN101092629A

    公开(公告)日:2007-12-26

    申请号:CN200710099676.0

    申请日:2007-05-28

    发明人: 杨礼富 王真辉

    IPC分类号: C12N15/31 C12Q1/68

    摘要: 本发明属于微生物工程领域,涉及一种从高盐环境微生物中高通量克隆微生物Na+/H+逆向转运蛋白基因的方法。特点是采集典型的高盐环境土壤样品,通过粗提和纯化获得土壤样品的宏基因组DNA,然后用宏基因组DNA部分酶切片段与载体之间的连接产物电激转化大肠杆菌缺陷株K,通过筛选获得阳性克隆,并对阳性克隆携带的Na+/H+逆向转运蛋白基因进行功能鉴定。本发明可以规模化克隆微生物来源的Na+/H+逆向转运蛋白基因,用于构建转基因耐盐作物和微生物,进而充分开发和利用盐碱地。

    一种橡胶树HbWRKY82基因及其应用

    公开(公告)号:CN109097367B

    公开(公告)日:2021-03-16

    申请号:CN201710467754.1

    申请日:2017-06-20

    摘要: 本发明提供了一种橡胶树HbWRKY82基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了该HbWRKY82基因编码的蛋白质及该基因的应用。本发明首次从橡胶树中克隆得到HbWRKY82基因,该基因具有转录因子功能,定位于细胞核中,该基因的表达受乙烯利诱导,且在叶片衰老过程中和死皮橡胶树中下调表达,具有反向调控功能。过量表达后能提高转基因植株对高盐和干旱等胁迫环境的耐受力,同时还具有调控叶片衰老的功能,在橡胶树的生长发育及响应生物与非生物逆境胁迫反应中起着重要的调控作用。将来利用HbWRKY82基因对植物进行遗传改良,可为提高植物耐盐性和耐旱性等抗逆性,以及延迟叶片衰老提供有效的基因资源。

    一种橡胶树HbWRKY83基因及其应用

    公开(公告)号:CN109097368A

    公开(公告)日:2018-12-28

    申请号:CN201710467921.2

    申请日:2017-06-20

    摘要: 本发明提供了一种橡胶树HbWRKY83基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了该HbWRKY83基因编码的蛋白质及该基因的应用。本发明首次从橡胶树中克隆得到HbWRKY83基因,该基因编码的蛋白具有转录激活活性且定位于细胞核中,可在橡胶树中发挥转录因子的功能。该基因在橡胶树乳管细胞中胶乳代谢和乙烯等激素信号转导中具有重要作用。过表达后能提高转基因植株的耐盐性和耐旱性等抗逆能力并延迟叶片衰老过程,在橡胶树的生长发育及生物与非生物逆境胁迫应答中起着重要的调控作用。将来利用HbWRKY83基因对植物进行遗传改良,可为提高植物耐受高盐性和干旱等胁迫以及延迟叶片衰老提供有效的基因资源。