非人灵长类动物的精子冷冻保存及复苏方法

    公开(公告)号:CN106962323A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710125218.3

    申请日:2017-03-03

    IPC分类号: A01N1/02 C12N5/076

    摘要: 本发明公开一种非人灵长类动物的精子冷冻保存及复苏方法,将精液在常温下液化30分钟,用HTF培养液将猴精液稀释10倍,根据精液的体积,添加甘油,使甘油的体积终浓度达10%,分装于1.5mL冻存管中,4℃下放置30分钟,再转移到液氮上方悬挂30分钟,最后置于液氮中保存即可。复苏时,将所述置于液氮中保存的冻存管在水浴37℃下轻轻摇动1~3分钟至完全融化,使其复苏。与先前研究的冷冻复苏效果相比,本发明的复苏后存活率及受精率都有提高。是一种有效、快速且简便的冷冻及复苏方法,可推广至非人灵长类其它动物的精子冷冻保存及种质资源的保护。

    一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用

    公开(公告)号:CN115161267B

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202210993447.8

    申请日:2022-08-18

    IPC分类号: C12N5/075 C12N5/073

    摘要: 本发明公开一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用,在商品化的基础培养液TL‑FERT中添加组合营养添加剂FBS+猴血清+100×非必须氨基酸+50×必须氨基酸,取出未成熟卵母细胞放置其中培养,培养液上方添加矿物油,于培养箱中培养即可。与先前研究的培养液为成熟卵母细胞发育效果相比,本发明的未成熟卵母细胞体外成熟率及ICSI后的受精率和优质胚胎率都有显著提高,证明了食蟹猴未成熟卵母细胞的再利用价值。本发明是一种有效、经济、简便的卵母细胞及胚胎培养方法,可推广至非人灵长类其它动物的未成熟卵母细胞及胚胎培养中,获得更多可移植用的胚胎及子代动物。

    非人灵长类动物的精子冷冻保存及复苏方法

    公开(公告)号:CN106962323B

    公开(公告)日:2020-12-15

    申请号:CN201710125218.3

    申请日:2017-03-03

    IPC分类号: A01N1/02 C12N5/076

    摘要: 本发明公开一种非人灵长类动物的精子冷冻保存及复苏方法,将精液在常温下液化30分钟,用HTF培养液将猴精液稀释10倍,根据精液的体积,添加甘油,使甘油的体积终浓度达10%,分装于1.5mL冻存管中,4℃下放置30分钟,再转移到液氮上方悬挂30分钟,最后置于液氮中保存即可。复苏时,将所述置于液氮中保存的冻存管在水浴37℃下轻轻摇动1~3分钟至完全融化,使其复苏。与先前研究的冷冻复苏效果相比,本发明的复苏后存活率及受精率都有提高。是一种有效、快速且简便的冷冻及复苏方法,可推广至非人灵长类其它动物的精子冷冻保存及种质资源的保护。

    一种物理性去除卵母细胞透明带的方法

    公开(公告)号:CN111004775A

    公开(公告)日:2020-04-14

    申请号:CN202010019282.5

    申请日:2020-01-08

    IPC分类号: C12N5/075

    摘要: 本发明公开一种物理性去除卵母细胞透明带的方法,将待去除透明带的卵母细胞置于显微操作液微滴中,吸取无菌生理盐水或者无菌PBS溶液至注射针尖端内腔中,使卵母细胞、持卵针和注射针处于同一水平线的位置,预设显微注射仪在清洗模式下的注射压力和平衡压力,使卵子固定于持卵针前端,将注射针刺入卵母细胞透明带,按清洗按钮,溶液快速注入到卵母细胞的卵周间隙,致使卵母细胞的胞质从注射针刺穿的透明带孔中跃出,即得到去除透明带的卵母细胞。本发明去透明带快,效率高,去透明带后完整光滑,能较好保持卵母细胞活性,避免了酶对卵母细胞的影响。

    水迷宫空间学习记忆树鼩模型的建立方法

    公开(公告)号:CN102499105B

    公开(公告)日:2013-07-24

    申请号:CN201110293451.5

    申请日:2011-10-06

    IPC分类号: A01K15/02

    摘要: 一种水迷宫空间学习记忆树鼩模型的建立方法,包括实验前对动物的筛选,实验装置准备,实验操作以及成模指标四个步骤,确定水迷宫空间学习树鼩模型的建立方法成模指标为:在定位航行实验中,正确率在90%以上;平均潜伏期介于20-25s之间作为判定树鼩在水迷宫实验中建立了空间学习性学习模型的标准;在空间探索实验中,以在靶象限活动时间的比率和穿台次数在训练前后有显著性差异作为判定树鼩在水迷宫实验中建立了空间记忆性模型的标准。

    水迷宫空间学习记忆树鼩模型的建立方法

    公开(公告)号:CN102499105A

    公开(公告)日:2012-06-20

    申请号:CN201110293451.5

    申请日:2011-10-06

    IPC分类号: A01K15/02

    摘要: 一种水迷宫空间学习记忆树鼩模型的建立方法,包括实验前对动物的筛选,实验装置准备,实验操作以及成模指标四个步骤,确定水迷宫空间学习树鼩模型的建立方法成模指标为:在定位航行实验中,正确率在90%以上;平均潜伏期介于20-25s之间作为判定树鼩在水迷宫实验中建立了空间学习性学习模型的标准;在空间探索实验中,以在靶象限活动时间的比率和穿台次数在训练前后有显著性差异作为判定树鼩在水迷宫实验中建立了空间记忆性模型的标准。