非人灵长类动物的精子冷冻保存及复苏方法

    公开(公告)号:CN106962323A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710125218.3

    申请日:2017-03-03

    IPC分类号: A01N1/02 C12N5/076

    摘要: 本发明公开一种非人灵长类动物的精子冷冻保存及复苏方法,将精液在常温下液化30分钟,用HTF培养液将猴精液稀释10倍,根据精液的体积,添加甘油,使甘油的体积终浓度达10%,分装于1.5mL冻存管中,4℃下放置30分钟,再转移到液氮上方悬挂30分钟,最后置于液氮中保存即可。复苏时,将所述置于液氮中保存的冻存管在水浴37℃下轻轻摇动1~3分钟至完全融化,使其复苏。与先前研究的冷冻复苏效果相比,本发明的复苏后存活率及受精率都有提高。是一种有效、快速且简便的冷冻及复苏方法,可推广至非人灵长类其它动物的精子冷冻保存及种质资源的保护。

    一种基孔肯尼雅热病毒感染小鼠适应毒株的制备方法

    公开(公告)号:CN117230023A

    公开(公告)日:2023-12-15

    申请号:CN202310855773.7

    申请日:2023-07-13

    IPC分类号: C12N7/00 C12N15/40 C12R1/93

    摘要: 本发明公开了一种基孔肯尼雅热病毒感染小鼠适应株的制备方法,包括如下步骤:基孔肯尼雅热病毒(CHIKV)野生型毒株通过后足皮下注射方式感染成年A129小鼠,注射剂量100ul共105 TCID50,感染3天后处死,收集小鼠血清及通过qPCR检测血液病毒载量,确认被A129感染小鼠具有病毒血症后,以该血清作为感染源继续以同样的方法感染野生型C57小鼠,感染3天后检测小鼠血液病毒载量,继续以上述同样方式感染C57野生型小鼠,共持续5代后待小鼠持续出现病毒血症和全身性组织器官病毒感染后分离血清病毒,测序鉴定,同时以分离出的毒株作为感染源继续感染野生型C57小鼠,检测小鼠全身性病毒感染情况和病理损伤情况,以建立感染野生型小鼠适应性较好的CHIKV‑E2K200R毒株。