公开(公告)号：CN104263857B

公开(公告)日：2017-07-11

申请号：CN201410514088.9

申请日：2014-09-29

Applicant: 中国农业科学院特产研究所 ,  吉林特研生物技术有限责任公司 ,  李丽爽

Inventor： 王建科 ,  程悦宁 ,  易立 ,  赵航 ,  程世鹏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种快速检测水貂肠炎病毒的纳米PCR试剂盒及其应用，所述的试剂盒包括：2×Nano PCR缓冲液，DNA聚合酶，引物混合物，无核酸ddH2O以及阳性质粒，所述的引物为上游引物5‑ACAAGCGGCAAGCAATCCTC‑3以及下游引物：5‑CTGCCTCTATTTCGGACCAT‑3。本发明的试剂盒提高了检测的灵敏度和缩短了反应时间，具有良好的特异性，检测灵敏度与使用重组质粒pEASY‑T1‑MEV‑NS1结果相似，灵敏度是传统PCR的100倍。

公开(公告)号：CN105572375A

公开(公告)日：2016-05-11

申请号：CN201511027669.0

申请日：2015-12-31

Applicant: 中国农业科学院特产研究所

Inventor： 王建科 ,  程悦宁 ,  张淼 ,  程世鹏 ,  林鹏 ,  赵航 ,  易立 ,  仝明薇 ,  曹智刚 ,  孙亚茹 ,  闫喜军 ,  陈立志

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/558

CPC classification number: G01N33/577 ,  G01N33/558 ,  G01N33/56983 ,  G01N2333/015

Abstract: 水貂细小病毒性肠炎病原体抗原胶体金检测试纸条及其制备方法，涉及毛皮动物病毒性传染病病原的检测技术领域。本发明的胶体金检测试纸条包括：样品垫、金标垫、NC膜和吸收垫，所述NC膜的检测线上喷涂VP2蛋白，所述NC膜的质控线上喷涂羊抗鼠二抗。本发明的水貂细小病毒性肠炎病原体抗原胶体金检测试纸条的制备方法，主要包括以下步骤：原核表达水貂细小病毒(MEV)VP2及VP1蛋白及其纯化；水貂细小病毒(MEV)单克隆抗体的制备；胶体金溶液的制备；金标抗体溶液的制备；金标垫的制备；NC膜的预处理；组装。本发明有助于毛皮动物养殖场净化水貂细小病毒性肠炎，方便基层兽医人员的操作。

公开(公告)号：CN104263857A

公开(公告)日：2015-01-07

申请号：CN201410514088.9

申请日：2014-09-29

Applicant: 中国农业科学院特产研究所

Inventor： 王建科 ,  程悦宁 ,  易立 ,  赵航 ,  程世鹏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2563/159

Abstract: 本发明公开了一种快速检测水貂肠炎病毒的纳米PCR试剂盒及其应用，所述的试剂盒包括：2×Nano PCR缓冲液，DNA聚合酶，引物混合物，无核酸ddH2O以及阳性质粒，所述的引物为上游引物5-ACAAGCGGCAAGCAATCCTC-3以及下游引物：5-CTGCCTCTATTTCGGACCAT-3。本发明的试剂盒提高了检测的灵敏度和缩短了反应时间，具有良好的特异性，检测灵敏度与使用重组质粒pEASY-T1-MEV-NS1结果相似，灵敏度是传统PCR的100倍。

公开(公告)号：CN105572375B

公开(公告)日：2018-06-12

申请号：CN201511027669.0

申请日：2015-12-31

Applicant: 中国农业科学院特产研究所

Inventor： 王建科 ,  程悦宁 ,  张淼 ,  程世鹏 ,  林鹏 ,  赵航 ,  易立 ,  仝明薇 ,  曹智刚 ,  孙亚茹 ,  闫喜军 ,  陈立志

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/558

Abstract: 水貂细小病毒性肠炎病原体抗原胶体金检测试纸条及其制备方法，涉及毛皮动物病毒性传染病病原的检测技术领域。本发明的胶体金检测试纸条包括：样品垫、金标垫、NC膜和吸收垫，所述NC膜的检测线上喷涂VP2蛋白，所述NC膜的质控线上喷涂羊抗鼠二抗。本发明的水貂细小病毒性肠炎病原体抗原胶体金检测试纸条的制备方法，主要包括以下步骤：原核表达水貂细小病毒(MEV)VP2及VP1蛋白及其纯化；水貂细小病毒(MEV)单克隆抗体的制备；胶体金溶液的制备；金标抗体溶液的制备；金标垫的制备；NC膜的预处理；组装。本发明有助于毛皮动物养殖场净化水貂细小病毒性肠炎，方便基层兽医人员的操作。

公开(公告)号：CN104450967A

公开(公告)日：2015-03-25

申请号：CN201410777738.9

申请日：2014-12-15

Applicant: 中国农业科学院特产研究所

Inventor： 易立 ,  程悦宁 ,  程世鹏 ,  陈立志 ,  仝明薇 ,  岳志刚 ,  王建科 ,  赵航 ,  林鹏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/701

Abstract: 检测水貂阿留申病毒的特异性引物及其在筛选健康水貂中的应用，本发明的目的是针对水貂的阿留申病毒设计高灵敏度特异性检测引物，并将该引物应用于筛选未患阿留申病的水貂，该方法通过快速准确的检测水貂粪便是否携带阿留申病毒，进而判定宿主水貂是否适合作为育种的种貂，避免了用繁琐的CIEP方法检测。这种筛选方法稳定、有效、适用几乎所有品种水貂并且与CIEP结果符合率高，在不伤害水貂的前提下，能迅速的检测出携带病毒的阳性水貂，几乎所有简易实验室均可应用。