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公开(公告)号：CN101423836B
公开(公告)日：2011-04-13
申请号：CN200810173655.3
申请日：2008-11-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/34 , C12N15/63 , C12N7/01 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开猪圆环病毒1型感染性克隆及其所拯救的病毒和应用。本发明将猪圆环病毒1型2个基因组顺式连接插入到载体中构建得到感染性分子克隆。该感染性分子克隆中插入Sal I酶切位点作为分子靶标，所拯救出的重组病毒(PCV1/G株)带有分子标记，其保藏号是CGMCC NO.2658。本发明重组病毒的抗原性仅与PCV1/Cap蛋白单价特异性抗体发生反应，而与抗PCV2/Cap蛋白抗体无交叉。可用PCR结合RFLP将其与亲本病毒相鉴别。本发明毒株体外培养增殖性能稳定，病毒滴度高，所拯救的毒株可用于检测该病毒抗体。本发明为今后开展猪圆环病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101358182A
公开(公告)日：2009-02-04
申请号：CN200710143417.3
申请日：2007-07-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/866 , A61K39/12 , A61P31/12 , G01N33/53
CPC classification number: Y02A50/407
Abstract: 本发明公开了一种高效表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒毒株rBac/PCV2Cap(微生物保藏号是：CGMCC NO.2083)及其用途。本发明构建的重组杆状病毒毒株rBac/PCV2Cap可在昆虫细胞中高效表达重组PCV2－Cap蛋白，所表达的重组Cap蛋白具有良好的免疫活性和抗原性，可作为预防猪圆环病毒2型感染引起的相关疫病用亚单位疫苗，也可作为猪圆环病毒2型血清抗体检测诊断抗原。
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公开(公告)号：CN101423836A
公开(公告)日：2009-05-06
申请号：CN200810173655.3
申请日：2008-11-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/34 , C12N15/63 , C12N7/01 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开猪圆环病毒1型感染性克隆及其所拯救的病毒和应用。本发明将猪圆环病毒1型2个基因组顺式连接插入到载体中构建得到感染性分子克隆。该感染性分子克隆中插入Sal I酶切位点作为分子靶标，所拯救出的重组病毒(PCV1/G株)带有分子标记，其保藏号是CGMCC NO.2658。本发明重组病毒的抗原性仅与PCV1/Cap蛋白单价特异性抗体发生反应，而与抗PCV2/Cap蛋白抗体无交叉。可用PCR结合RFLP将其与亲本病毒相鉴别。本发明毒株体外培养增殖性能稳定，病毒滴度高，所拯救的毒株可用于检测该病毒抗体。本发明为今后开展猪圆环病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102120988B
公开(公告)日：2012-12-19
申请号：CN201010591971.X
申请日：2010-12-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01
Abstract: 本发明公开了表达V5表位标签的重组猪圆环病毒2型毒株及其应用。本发明以PCV2基因组为骨架，在ORF2编码Cap蛋白的C末端插入了源自副流感病毒5型的一个含14氨基酸序列的V5表位标签，用构建感染性分子克隆重组质粒转染细胞，拯救出一株表达V5表位标签的重组毒株，其微生物保藏号是：CGMCC No.4310。本发明重组毒株在繁殖动力学和形态学上与亲本病毒基本一致，可以采用PCR、IPMA和捕获ELISA方法将其与亲本毒株相鉴别。本发明重组毒株经细胞连续传10代，体外培养增殖性能稳定，毒价可达106.25TCID50/mL。
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公开(公告)号：CN102120987A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010591968.8
申请日：2010-12-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , G01N33/569 , C12Q1/70 , A61K39/12 , A61P31/12
Abstract: 本发明公开了猪圆环病毒2型标记毒株及其构建及其应用。本发明构建了4个PCV2不同基因亚型的感染性分子克隆，经转化细胞后拯救4株毒株，其微生物保藏号分别是：CGMCC No.4306、CGMCCNo.4307、CGMCC No.4308和CGMCC No.4309。本发明所拯救的4个克隆毒株属于不同基因型的PCV2毒株，所拯救的毒株均通过细胞连续传10代，病毒增殖能力稳定，毒价均可达到105.0TCID50/ml；本发明所构建和拯救的4个代表不同基因型PCV2克隆毒株为进一步研究其致病性差异奠定了基础，可作为PCV2流行毒株基因分型的鉴定。
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公开(公告)号：CN102120988A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010591971.X
申请日：2010-12-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , A61K39/12 , A61P31/12 , G01N33/569 , C12Q1/70
Abstract: 本发明公开了表达V5表位标签的重组猪圆环病毒2型毒株及其应用。本发明以PCV2基因组为骨架，在ORF2编码Cap蛋白的C末端插入了源自副流感病毒5型的一个含14氨基酸序列的V5表位标签，用构建感染性分子克隆重组质粒转染细胞，拯救出一株表达V5表位标签的重组毒株，其微生物保藏号是：CGMCC No.4310。本发明重组毒株在繁殖动力学和形态学上与亲本病毒基本一致，可以采用PCR、IPMA和捕获ELISA方法将其与亲本毒株相鉴别。本发明重组毒株经细胞连续传10代，体外培养增殖性能稳定，毒价可达106.25TCID50/mL。
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公开(公告)号：CN100489092C
公开(公告)日：2009-05-20
申请号：CN200610086918.8
申请日：2006-06-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种带有分子标记的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2)毒株PCV2/PE，保藏号是：CGMCC No.1617，还涉及该毒株的应用。本发明以临床分离的猪圆环病毒2型为材料，利用PCR法扩增病毒基因组，将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆，通过引物设计替换碱基，在病毒基因组内插入SalI限制性内切酶位点作为遗传标记，经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株。本发明毒株经过细胞传代培育，病毒的繁殖能力显著提高，具备疫苗种毒的基本要求。本发明毒株具有特有的遗传标记，可与亲本野生型病毒相鉴别，在建立动物感染模型，探讨猪圆环病毒的致病机理、分子诊断及疫苗免疫效力的评价等方面均有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN101089177A
公开(公告)日：2007-12-19
申请号：CN200610086918.8
申请日：2006-06-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种带有分子标记的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2)毒株PCV2/PE，保藏号是：CGMCC No.1617，还涉及该毒株的应用。本发明以临床分离的猪圆环病毒2型为材料，利用PCR法扩增病毒基因组，将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆，通过引物设计替换碱基，在病毒基因组内插入SalI限制性内切酶位点作为遗传标记，经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株。本发明毒株经过细胞传代培育，病毒的繁殖能力显著提高，具备疫苗种毒的基本要求。本发明毒株具有特有的遗传标记，可与亲本野生型病毒相鉴别，在建立动物感染模型，探讨猪圆环病毒的致病机理、分子诊断及疫苗免疫效力的评价等方面均有重要的应用价值。
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