一种猪圆环病毒2型的大规模全悬浮培养方法

    公开(公告)号:CN107312746A

    公开(公告)日:2017-11-03

    申请号:CN201710481871.3

    申请日:2017-06-22

    Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型的大规模全悬浮生产方法。本发明发明人驯化了一株适应大规模无血清全悬浮培养的猪肾细胞,命名为sPK15-YP,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其菌种保藏编号为:CGMCC NO.13846。本发明采用适应全悬浮培养的sPK15-YP细胞无血清大规模培养猪圆环病毒2型(PCV2),取代了传统的转瓶培养工艺,减少了人力资源,提高了产品的质量,解决了PCV2全病毒培养病毒含量低的瓶颈问题,通过全悬浮sPK15-YP细胞技术制备得到了高效价的PCV2半成品,利用中空纤维法对PCV2病毒培养液进行浓缩纯化获得了更加纯净的PCV2病毒浓缩抗原。本发明的提出为PCV2多联多价疫苗的研究奠定了坚实基础,减少了疫苗的用量,降低了猪群的应激,提高了猪群的免疫水平。

    猪圆环病毒2型抗原捕获ELISA试剂盒

    公开(公告)号:CN104749361A

    公开(公告)日:2015-07-01

    申请号:CN201510030198.2

    申请日:2015-01-21

    CPC classification number: G01N33/56983

    Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型抗原捕获ELISA试剂盒。所述试剂盒中包括酶标记的由保藏编号为CGMCC NO.10205的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体。本发明还公开了利用所述单克隆抗体建立的一种快速检测猪圆环病毒2型的捕获ELISA方法,其以抗猪圆环病毒2型多抗和抗猪圆环病毒2型Cap蛋白的单抗分别作为捕获抗体和检测抗体。该方法可以检测多种基因型PCV2毒株,检测敏感性为400TCID50/ml,与其它常见猪病毒无交叉反应,且与毒价测定方法符合率为88%。结果表明,该方法具有操作简单,特异性好,敏感性高,耗时短等优点,可以用于估测病毒毒价,方便快捷地控制PCV2灭活疫苗半成品的质量。

    猪圆环病毒1型感染性克隆及其所拯救的病毒和应用

    公开(公告)号:CN101423836B

    公开(公告)日:2011-04-13

    申请号:CN200810173655.3

    申请日:2008-11-05

    Abstract: 本发明公开猪圆环病毒1型感染性克隆及其所拯救的病毒和应用。本发明将猪圆环病毒1型2个基因组顺式连接插入到载体中构建得到感染性分子克隆。该感染性分子克隆中插入Sal I酶切位点作为分子靶标,所拯救出的重组病毒(PCV1/G株)带有分子标记,其保藏号是CGMCC NO.2658。本发明重组病毒的抗原性仅与PCV1/Cap蛋白单价特异性抗体发生反应,而与抗PCV2/Cap蛋白抗体无交叉。可用PCR结合RFLP将其与亲本病毒相鉴别。本发明毒株体外培养增殖性能稳定,病毒滴度高,所拯救的毒株可用于检测该病毒抗体。本发明为今后开展猪圆环病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。

    检测猪圆环病毒2型Cap蛋白的单克隆抗体及试剂盒

    公开(公告)号:CN105445457B

    公开(公告)日:2017-08-11

    申请号:CN201510762194.3

    申请日:2015-11-10

    Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型竞争ELISA抗体检测试剂盒。所述试剂盒中包括酶标记的由保藏编号为CGMCC NO.10205的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体。本发明还公开了利用所述单克隆抗体建立的一种检测猪血清PCV2抗体的竞争ELISA方法,该方法先用PCV2阳性血清包被ELISA板以捕获PCV2抗原,然后与待测猪血清抗体及HRP标记的单抗3A5进行反应,通过测定酶标单抗显示竞争ELISA检测结果。该方法与IPMA方法对237份试验猪血清样品进行了平行试验,两种方法检测符合率为94.1%,且该方法的敏感性为92.6%,特异性为98.4%,与其它几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应。本发明试剂盒具有操作简便、特异性好和敏感性高等特点,为PCV2流行病学调查及血清抗体检测提供了一种有效技术手段。

    猪圆环病毒1型感染性克隆及其所拯救的病毒和应用

    公开(公告)号:CN101423836A

    公开(公告)日:2009-05-06

    申请号:CN200810173655.3

    申请日:2008-11-05

    Abstract: 本发明公开猪圆环病毒1型感染性克隆及其所拯救的病毒和应用。本发明将猪圆环病毒1型2个基因组顺式连接插入到载体中构建得到感染性分子克隆。该感染性分子克隆中插入Sal I酶切位点作为分子靶标,所拯救出的重组病毒(PCV1/G株)带有分子标记,其保藏号是CGMCC NO.2658。本发明重组病毒的抗原性仅与PCV1/Cap蛋白单价特异性抗体发生反应,而与抗PCV2/Cap蛋白抗体无交叉。可用PCR结合RFLP将其与亲本病毒相鉴别。本发明毒株体外培养增殖性能稳定,病毒滴度高,所拯救的毒株可用于检测该病毒抗体。本发明为今后开展猪圆环病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。

Patent Agency Ranking