-
公开(公告)号:CN114487396A
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202111565323.1
申请日:2021-12-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577 , G01N33/532 , G01N33/58 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了用于检测猪圆环病毒2型的红色乳胶微球免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括PVC底板,以及在PVC底板上从左到右依次组装的结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述的结合垫上涂覆有红色乳胶微球偶联的抗猪圆环病毒2型单克隆抗体7C7,所述的硝酸纤维素膜上设有包被抗猪圆环病毒2型单克隆抗体9H4的检测线以及包被山羊抗鼠IgG的质控线。本发明中标记抗体和捕获抗体是挑选的最为广谱性的单抗,故对三种基因型的PCV2都具有较好的检测敏感性,与其他的病毒均无交叉反应。因此,本发明成功筛选出PCV2的广谱性单抗且成功建立了检测PCV2抗原的红色乳胶微球免疫层析试纸条,为后续的PCV2流行病学调查和净化提供了新的技术手段。
-
公开(公告)号:CN101358182A
公开(公告)日:2009-02-04
申请号:CN200710143417.3
申请日:2007-07-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/866 , A61K39/12 , A61P31/12 , G01N33/53
CPC classification number: Y02A50/407
Abstract: 本发明公开了一种高效表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒毒株rBac/PCV2Cap(微生物保藏号是:CGMCC NO.2083)及其用途。本发明构建的重组杆状病毒毒株rBac/PCV2Cap可在昆虫细胞中高效表达重组PCV2-Cap蛋白,所表达的重组Cap蛋白具有良好的免疫活性和抗原性,可作为预防猪圆环病毒2型感染引起的相关疫病用亚单位疫苗,也可作为猪圆环病毒2型血清抗体检测诊断抗原。
-
公开(公告)号:CN107312746A
公开(公告)日:2017-11-03
申请号:CN201710481871.3
申请日:2017-06-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型的大规模全悬浮生产方法。本发明发明人驯化了一株适应大规模无血清全悬浮培养的猪肾细胞,命名为sPK15-YP,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其菌种保藏编号为:CGMCC NO.13846。本发明采用适应全悬浮培养的sPK15-YP细胞无血清大规模培养猪圆环病毒2型(PCV2),取代了传统的转瓶培养工艺,减少了人力资源,提高了产品的质量,解决了PCV2全病毒培养病毒含量低的瓶颈问题,通过全悬浮sPK15-YP细胞技术制备得到了高效价的PCV2半成品,利用中空纤维法对PCV2病毒培养液进行浓缩纯化获得了更加纯净的PCV2病毒浓缩抗原。本发明的提出为PCV2多联多价疫苗的研究奠定了坚实基础,减少了疫苗的用量,降低了猪群的应激,提高了猪群的免疫水平。
-
公开(公告)号:CN104749361A
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201510030198.2
申请日:2015-01-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型抗原捕获ELISA试剂盒。所述试剂盒中包括酶标记的由保藏编号为CGMCC NO.10205的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体。本发明还公开了利用所述单克隆抗体建立的一种快速检测猪圆环病毒2型的捕获ELISA方法,其以抗猪圆环病毒2型多抗和抗猪圆环病毒2型Cap蛋白的单抗分别作为捕获抗体和检测抗体。该方法可以检测多种基因型PCV2毒株,检测敏感性为400TCID50/ml,与其它常见猪病毒无交叉反应,且与毒价测定方法符合率为88%。结果表明,该方法具有操作简单,特异性好,敏感性高,耗时短等优点,可以用于估测病毒毒价,方便快捷地控制PCV2灭活疫苗半成品的质量。
-
公开(公告)号:CN101423836B
公开(公告)日:2011-04-13
申请号:CN200810173655.3
申请日:2008-11-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/34 , C12N15/63 , C12N7/01 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开猪圆环病毒1型感染性克隆及其所拯救的病毒和应用。本发明将猪圆环病毒1型2个基因组顺式连接插入到载体中构建得到感染性分子克隆。该感染性分子克隆中插入Sal I酶切位点作为分子靶标,所拯救出的重组病毒(PCV1/G株)带有分子标记,其保藏号是CGMCC NO.2658。本发明重组病毒的抗原性仅与PCV1/Cap蛋白单价特异性抗体发生反应,而与抗PCV2/Cap蛋白抗体无交叉。可用PCR结合RFLP将其与亲本病毒相鉴别。本发明毒株体外培养增殖性能稳定,病毒滴度高,所拯救的毒株可用于检测该病毒抗体。本发明为今后开展猪圆环病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。
-
公开(公告)号:CN114487396B
公开(公告)日:2024-11-12
申请号:CN202111565323.1
申请日:2021-12-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577 , G01N33/532 , G01N33/58 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了用于检测猪圆环病毒2型的红色乳胶微球免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括PVC底板,以及在PVC底板上从左到右依次组装的结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述的结合垫上涂覆有红色乳胶微球偶联的抗猪圆环病毒2型单克隆抗体7C7,所述的硝酸纤维素膜上设有包被抗猪圆环病毒2型单克隆抗体9H4的检测线以及包被山羊抗鼠IgG的质控线。本发明中标记抗体和捕获抗体是挑选的最为广谱性的单抗,故对三种基因型的PCV2都具有较好的检测敏感性,与其他的病毒均无交叉反应。因此,本发明成功筛选出PCV2的广谱性单抗且成功建立了检测PCV2抗原的红色乳胶微球免疫层析试纸条,为后续的PCV2流行病学调查和净化提供了新的技术手段。
-
公开(公告)号:CN110124026B
公开(公告)日:2023-06-20
申请号:CN201910353467.7
申请日:2019-04-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及一种多价免疫原性组合物,其包含猪圆环病毒2型(PCV2)抗原和猪鼻支原体抗原,该组合物能够抵抗猪圆环病毒2型和猪鼻支原体的攻击,不管是临床病理还是解剖病理免疫组与健康对照组无显著差异,而攻毒对照组却出现了显著的临床病理和解剖病理。并且猪鼻支原体能够促进猪圆环病毒2型抗体的滴度,为猪圆环病毒相关疾病的综合防控起到了促进作用。
-
公开(公告)号:CN110124026A
公开(公告)日:2019-08-16
申请号:CN201910353467.7
申请日:2019-04-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及一种多价免疫原性组合物,其包含猪圆环病毒2型(PCV2)抗原和猪鼻支原体抗原,该组合物能够抵抗猪圆环病毒2型和猪鼻支原体的攻击,不管是临床病理还是解剖病理免疫组与健康对照组无显著差异,而攻毒对照组却出现了显著的临床病理和解剖病理。并且猪鼻支原体能够促进猪圆环病毒2型抗体的滴度,为猪圆环病毒相关疾病的综合防控起到了促进作用。
-
公开(公告)号:CN105445457B
公开(公告)日:2017-08-11
申请号:CN201510762194.3
申请日:2015-11-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/00 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型竞争ELISA抗体检测试剂盒。所述试剂盒中包括酶标记的由保藏编号为CGMCC NO.10205的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体。本发明还公开了利用所述单克隆抗体建立的一种检测猪血清PCV2抗体的竞争ELISA方法,该方法先用PCV2阳性血清包被ELISA板以捕获PCV2抗原,然后与待测猪血清抗体及HRP标记的单抗3A5进行反应,通过测定酶标单抗显示竞争ELISA检测结果。该方法与IPMA方法对237份试验猪血清样品进行了平行试验,两种方法检测符合率为94.1%,且该方法的敏感性为92.6%,特异性为98.4%,与其它几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应。本发明试剂盒具有操作简便、特异性好和敏感性高等特点,为PCV2流行病学调查及血清抗体检测提供了一种有效技术手段。
-
公开(公告)号:CN101423836A
公开(公告)日:2009-05-06
申请号:CN200810173655.3
申请日:2008-11-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/34 , C12N15/63 , C12N7/01 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开猪圆环病毒1型感染性克隆及其所拯救的病毒和应用。本发明将猪圆环病毒1型2个基因组顺式连接插入到载体中构建得到感染性分子克隆。该感染性分子克隆中插入Sal I酶切位点作为分子靶标,所拯救出的重组病毒(PCV1/G株)带有分子标记,其保藏号是CGMCC NO.2658。本发明重组病毒的抗原性仅与PCV1/Cap蛋白单价特异性抗体发生反应,而与抗PCV2/Cap蛋白抗体无交叉。可用PCR结合RFLP将其与亲本病毒相鉴别。本发明毒株体外培养增殖性能稳定,病毒滴度高,所拯救的毒株可用于检测该病毒抗体。本发明为今后开展猪圆环病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。
-
-
-
-
-
-
-
-
-