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公开(公告)号：CN101358182A
公开(公告)日：2009-02-04
申请号：CN200710143417.3
申请日：2007-07-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/866 , A61K39/12 , A61P31/12 , G01N33/53
CPC classification number: Y02A50/407
Abstract: 本发明公开了一种高效表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒毒株rBac/PCV2Cap(微生物保藏号是：CGMCC NO.2083)及其用途。本发明构建的重组杆状病毒毒株rBac/PCV2Cap可在昆虫细胞中高效表达重组PCV2－Cap蛋白，所表达的重组Cap蛋白具有良好的免疫活性和抗原性，可作为预防猪圆环病毒2型感染引起的相关疫病用亚单位疫苗，也可作为猪圆环病毒2型血清抗体检测诊断抗原。
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公开(公告)号：CN101831506B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN201010146353.4
申请日：2010-04-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种快速检测和鉴别伪狂犬病病毒(PRV)gE缺失疫苗株和野毒株的环介导等温扩增试剂盒，其组成成分包括：等温反应混合缓冲液，DNA聚合酶，蒸馏水，引物混合物1和引物混合物2，所述的引物混合物1由3对引物组成，引物混合物2由3对引物组成。本发明采用环介导等温扩增(LAMP)技术，特异性强，且比PCR检测方法有更高的灵敏度，不需昂贵的PCR仪，只需普通的金属浴或水浴箱，可用凝胶电泳方法来观察检测结果，也可通过离心的方法来观察沉淀，简单而快速，既可用于PRV野毒的检测，也可用于PRV gE缺失疫苗株和野毒株的鉴别检测，特别适合于基层兽医检测机构和规模化养猪场对于PRV的检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101948872B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201010261045.6
申请日：2010-08-24
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪源启动子蛋白表达载体及其构建方法与应用。本发明表达载体为环状，包含原核复制起点、真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒，所述外源基因表达盒自上游至下游依次由转录启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成；所述转录启动子是MLP6启动子。本发明表达载体可在猪类细胞中高效表达外源蛋白，因含有一个真核复制起点，可在表达T抗原的细胞中大量增值，从而提高蛋白表达水平。本发明利用同源重组构建表达外源基因的重组载体，避免了传统的酶切，连接等环节，比传统的连接过程省略了2-3个步骤。使用本发明载体构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效，可以快速完成大量外源基因的表达载体的构建。
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公开(公告)号：CN101831506A
公开(公告)日：2010-09-15
申请号：CN201010146353.4
申请日：2010-04-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种快速检测和鉴别伪狂犬病病毒(PRV)gE缺失疫苗株和野毒株的环介导等温扩增试剂盒，其组成成分包括：等温反应混合缓冲液，DNA聚合酶，蒸馏水，引物混合物1和引物混合物2，所述的引物混合物1由3对引物组成，引物混合物2由3对引物组成。本发明采用环介导等温扩增(LAMP)技术，特异性强，且比PCR检测方法有更高的灵敏度，不需昂贵的PCR仪，只需普通的金属浴或水浴箱，可用凝胶电泳方法来观察检测结果，也可通过离心的方法来观察沉淀，简单而快速，既可用于PRV野毒的检测，也可用于PRV？gE缺失疫苗株和野毒株的鉴别检测，特别适合于基层兽医检测机构和规模化养猪场对于PRV的检测。
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公开(公告)号：CN101948872A
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN201010261045.6
申请日：2010-08-24
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪源启动子蛋白表达载体及其构建方法与应用。本发明表达载体为环状，包含原核复制起点、真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒，所述外源基因表达盒自上游至下游依次由转录启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成；所述转录启动子是MLP6启动子。本发明表达载体可在猪类细胞中高效表达外源蛋白，因含有一个真核复制起点，可在表达T抗原的细胞中大量增值，从而提高蛋白表达水平。本发明利用同源重组构建表达外源基因的重组载体，避免了传统的酶切，连接等环节，比传统的连接过程省略了2-3个步骤。使用本发明载体构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效，可以快速完成大量外源基因的表达载体的构建。
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公开(公告)号：CN100489092C
公开(公告)日：2009-05-20
申请号：CN200610086918.8
申请日：2006-06-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种带有分子标记的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2)毒株PCV2/PE，保藏号是：CGMCC No.1617，还涉及该毒株的应用。本发明以临床分离的猪圆环病毒2型为材料，利用PCR法扩增病毒基因组，将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆，通过引物设计替换碱基，在病毒基因组内插入SalI限制性内切酶位点作为遗传标记，经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株。本发明毒株经过细胞传代培育，病毒的繁殖能力显著提高，具备疫苗种毒的基本要求。本发明毒株具有特有的遗传标记，可与亲本野生型病毒相鉴别，在建立动物感染模型，探讨猪圆环病毒的致病机理、分子诊断及疫苗免疫效力的评价等方面均有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN101089177A
公开(公告)日：2007-12-19
申请号：CN200610086918.8
申请日：2006-06-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种带有分子标记的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2)毒株PCV2/PE，保藏号是：CGMCC No.1617，还涉及该毒株的应用。本发明以临床分离的猪圆环病毒2型为材料，利用PCR法扩增病毒基因组，将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆，通过引物设计替换碱基，在病毒基因组内插入SalI限制性内切酶位点作为遗传标记，经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株。本发明毒株经过细胞传代培育，病毒的繁殖能力显著提高，具备疫苗种毒的基本要求。本发明毒株具有特有的遗传标记，可与亲本野生型病毒相鉴别，在建立动物感染模型，探讨猪圆环病毒的致病机理、分子诊断及疫苗免疫效力的评价等方面均有重要的应用价值。
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