稳定表达T7 RNA聚合酶的ST细胞系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN101285054A

    公开(公告)日:2008-10-15

    申请号:CN200810093214.2

    申请日:2008-04-23

    Abstract: 本发明公开了一株稳定表达T7 RNA聚合酶的细胞系ST/T7,其微生物保藏号是:CGMCC No.2444。本发明将T7 RNA聚合酶基因插入到真核表达载体pIRES2-EGFP中,得到pIRES2-EGFP-T7,转染ST细胞,筛选得到稳定表达T7 RNA聚合酶的细胞系ST/T7。通过RT-PCR检测,可以从ST/T7细胞系中扩增到T7 RNA聚合酶基因的转录产物,用含有T7启动子控制下的红色荧光蛋白基因的表达质粒转染该细胞系,可观察到红色荧光蛋白的表达。本发明ST/T7细胞系能反式提供T7 RNA聚合酶,可用于猪瘟病毒等一些正链RNA病毒的反向遗传操作,还可作为体外转录表达系统,用于研究基因的结构与功能。

    腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗及其应用

    公开(公告)号:CN101966341B

    公开(公告)日:2012-06-27

    申请号:CN201010297576.0

    申请日:2010-09-30

    Abstract: 本发明公开了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗及其应用。本发明利用基因转移能力极强的腺病毒来递送表达猪瘟病毒E2蛋白的甲病毒复制子载体,构建了高效表达CSFV E2蛋白的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体疫苗,其微生物保藏号是:CGMCC No.4146;本发明嵌合载体疫苗通过腺病毒载体递送表达CSFV E2蛋白的甲病毒复制子载体疫苗,既能发挥腺病毒载体的高效转移外源基因的能力,又能发挥甲病毒复制子载体自我复制后高效表达外源基因及其诱导强大细胞免疫应答的优势,大大增强了疫苗的免疫效力,免疫剂量也大大减少。本发明嵌合载体疫苗在猪体上能诱导高水平的免疫反应,可对致死性猪瘟病毒强毒的攻击提供完全的保护。

    腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗及其应用

    公开(公告)号:CN101966341A

    公开(公告)日:2011-02-09

    申请号:CN201010297576.0

    申请日:2010-09-30

    Abstract: 本发明公开了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗及其应用。本发明利用基因转移能力极强的腺病毒来递送表达猪瘟病毒E2蛋白的甲病毒复制子载体,构建了高效表达CSFV E2蛋白的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体疫苗,其微生物保藏号是:CGMCC No.4146;本发明嵌合载体疫苗通过腺病毒载体递送表达CSFV E2蛋白的甲病毒复制子载体疫苗,既能发挥腺病毒载体的高效转移外源基因的能力,又能发挥甲病毒复制子载体自我复制后高效表达外源基因及其诱导强大细胞免疫应答的优势,大大增强了疫苗的免疫效力,免疫剂量也大大减少。本发明嵌合载体疫苗在猪体上能诱导高水平的免疫反应,可对致死性猪瘟病毒强毒的攻击提供完全的保护。

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