青蒿AaGTD1基因及其编码的蛋白与应用

    公开(公告)号:CN104651373B

    公开(公告)日:2018-02-09

    申请号:CN201510054313.X

    申请日:2015-02-03

    Inventor: 谭何新 张磊 肖玲

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种青蒿中控制青蒿素合成和腺毛发育的AaGTD1基因及其编码的蛋白与在制备青蒿素中的应用。本发明提供了一种青蒿AaGTD1基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;该基因编码的蛋白AP2/ERF类转录因子的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明中所述的应用是指本发明中涉及的一种通过AaGTD1来提高青蒿中青蒿素含量的方法,包括如下步骤:将包含SEQ ID NO:1所示基因的植物表达载体转化入青蒿细胞;培育转化的青蒿细胞,得到青蒿素含量提高的青蒿植株。本发明的AaGTD1基因编码的蛋白可以用来提高青蒿素的产量,为青蒿素的规模化生产提供高产、稳定的植物材料有重要意义。

    一种快速高效的曼陀罗原生质体制备方法

    公开(公告)号:CN105018412A

    公开(公告)日:2015-11-04

    申请号:CN201510445685.5

    申请日:2015-07-27

    Abstract: 本发明公开了一种快速高效的曼陀罗原生质体制备方法,属于植物细胞工程领域。本发明利用茎尖组织培养技术获得了无菌的曼陀罗组培苗,以曼陀罗组培苗的幼叶为起始材料,采用纤维素酶(Cellulase)R10和离析酶(Macerozyme)R10,对曼陀罗幼叶组织进行酶解消化,并利用蔗糖密度梯度离心方法分离获得高质量的曼陀罗原生质体,产量高达1.4×106个/克。分离得到的原生质体富含叶绿体,且细胞膜完整,绝大多数呈球形,具有较高活力,能满足后续各种研究需要。

    一种广泛用于多种植物基因沉默的RNAi载体及其应用

    公开(公告)号:CN105274135A

    公开(公告)日:2016-01-27

    申请号:CN201510521004.9

    申请日:2015-08-24

    Abstract: 本发明公开了一种广泛用于多种植物基因沉默的RNAi载体及其应用,属于生物技术领域。本发明涉及的载体以pCAMBIA1300载体为骨架,插入pHANNIBAL载体上的Promoter(CMV),PDK和Terminator 1(OCS)序列,载体构建包括如下步骤:一,通过PCR扩增和限制性内切酶酶切、连接技术,将含有酶切位点的CMV和OCS依次连入pCAMBIA1300载体;二,在CMV和OCS之间插入PDK,最终形成pC1300-pHANNIBAL载体。本发明所涉及的载体是一种可以整合到植物基因组并可在植物宿主细胞中稳定遗传、表达的双元表达载体,且是方便、可靠、经济、实用的基因沉默手段。

    青蒿AaGTD1基因及其编码的蛋白与应用

    公开(公告)号:CN104651373A

    公开(公告)日:2015-05-27

    申请号:CN201510054313.X

    申请日:2015-02-03

    Inventor: 张磊 谭何新 肖玲

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种青蒿中控制青蒿素合成和腺毛发育的AaGTD1基因及其编码的蛋白与在制备青蒿素中的应用。本发明提供了一种青蒿AaGTD1基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;该基因编码的蛋白AP2/ERF类转录因子的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明中所述的应用是指本发明中涉及的一种通过AaGTD1来提高青蒿中青蒿素含量的方法,包括如下步骤:将包含SEQ ID NO:1所示基因的植物表达载体转化入青蒿细胞;培育转化的青蒿细胞,得到青蒿素含量提高的青蒿植株。本发明的AaGTD1基因编码的蛋白可以用来提高青蒿素的产量,为青蒿素的规模化生产提供高产、稳定的植物材料有重要意义。

    一种快速高效的曼陀罗原生质体制备方法

    公开(公告)号:CN105018412B

    公开(公告)日:2018-10-09

    申请号:CN201510445685.5

    申请日:2015-07-27

    Abstract: 本发明公开了一种快速高效的曼陀罗原生质体制备方法,属于植物细胞工程领域。本发明利用茎尖组织培养技术获得了无菌的曼陀罗组培苗,以曼陀罗组培苗的幼叶为起始材料,采用纤维素酶(Cellulase)R10和离析酶(Macerozyme)R10,对曼陀罗幼叶组织进行酶解消化,并利用蔗糖密度梯度离心方法分离获得高质量的曼陀罗原生质体,产量高达1.4×106个/克。分离得到的原生质体富含叶绿体,且细胞膜完整,绝大多数呈球形,具有较高活力,能满足后续各种研究需要。

    一种根癌农杆菌介导的转基因菘蓝再生植株转化方法

    公开(公告)号:CN109234308A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201811250112.7

    申请日:2018-10-25

    Applicant: 华侨大学

    Abstract: 本发明提供一种根癌农杆菌介导的转基因菘蓝再生植株转化方法,所述方法包括以下步骤:将预培养后的菘蓝外植体浸入已活化好的带目的基因的根癌农杆菌菌液中,振摇使充分接触后取出,无菌纸吸干多余菌液后接种于共培养培养基中进行暗培养1-4天,外植体转入抗性筛选诱导培养基进行光照培养,经历增殖、生根、壮苗的降抗筛选培养30-120天后,将阳性转基因苗经水培过渡转入土培进行炼苗培养长成菘蓝再生植株;所述菘蓝外植体为菘蓝苗叶片。本发明直接用菘蓝无菌苗叶作为外植体,取材方便,且在较短周期内可培养出菘蓝再生植株,所需设备简单,操作技术容易掌握。

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