公开(公告)号：CN105018412A

公开(公告)日：2015-11-04

申请号：CN201510445685.5

申请日：2015-07-27

Applicant: 中国人民解放军第二军医大学

Inventor： 李卿 ,  陈万生 ,  肖玲 ,  陈军峰 ,  谭何新 ,  肖莹 ,  张磊

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种快速高效的曼陀罗原生质体制备方法，属于植物细胞工程领域。本发明利用茎尖组织培养技术获得了无菌的曼陀罗组培苗，以曼陀罗组培苗的幼叶为起始材料，采用纤维素酶(Cellulase)R10和离析酶(Macerozyme)R10，对曼陀罗幼叶组织进行酶解消化，并利用蔗糖密度梯度离心方法分离获得高质量的曼陀罗原生质体，产量高达1.4×106个/克。分离得到的原生质体富含叶绿体，且细胞膜完整，绝大多数呈球形，具有较高活力，能满足后续各种研究需要。

公开(公告)号：CN105018412B

公开(公告)日：2018-10-09

申请号：CN201510445685.5

申请日：2015-07-27

Applicant: 中国人民解放军第二军医大学

Inventor： 李卿 ,  陈万生 ,  肖玲 ,  陈军峰 ,  谭何新 ,  肖莹 ,  张磊

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种快速高效的曼陀罗原生质体制备方法，属于植物细胞工程领域。本发明利用茎尖组织培养技术获得了无菌的曼陀罗组培苗，以曼陀罗组培苗的幼叶为起始材料，采用纤维素酶(Cellulase)R10和离析酶(Macerozyme)R10，对曼陀罗幼叶组织进行酶解消化，并利用蔗糖密度梯度离心方法分离获得高质量的曼陀罗原生质体，产量高达1.4×106个/克。分离得到的原生质体富含叶绿体，且细胞膜完整，绝大多数呈球形，具有较高活力，能满足后续各种研究需要。

公开(公告)号：CN107227312A

公开(公告)日：2017-10-03

申请号：CN201710447660.8

申请日：2017-06-14

Applicant: 中国人民解放军第二军医大学第二附属医院

Inventor： 陈万生 ,  张磊 ,  陈亮 ,  李卿 ,  冯婧娴 ,  王芸 ,  谭何新 ,  陈昊轩

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  C12N9/02 ,  C12N15/53

Abstract: 本发明提供了一种提高丹参毛状根中丹酚酸B含量的方法，其特征在于，通过在丹参毛状根中过表达丹参漆酶SmLAC7基因或丹参漆酶SmLAC20基因从而得到丹酚酸B含量提高的转基因丹参毛状根，包括如下步骤：步骤S1，构建含有丹参漆酶SmLAC7基因或含有丹参漆酶SmLAC20基因的过表达载体；步骤S2，将步骤S1得到的过表达载体转染入农杆菌，得到重组农杆菌；步骤S3，用步骤S2得到的重组农杆菌转化丹参组织并诱导发根，获得转基因丹参毛状根，其中，丹参漆酶SmLAC7基因的序列如SEQ ID No：1所示，丹参漆酶SmLAC20基因的序列如SEQ ID No：2所示。

公开(公告)号：CN104805097A

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201410030473.6

申请日：2014-01-23

Applicant: 中国人民解放军第二军医大学

Inventor： 肖莹 ,  杨颖博 ,  宣洪娇 ,  李卿 ,  陈万生 ,  张磊

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/82 ,  C12N15/11 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明提供一种编码具有菘蓝落叶松脂素还原酶活性的蛋白的核苷酸序列，其特征在于：所述核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供一种具有菘蓝落叶松脂素还原酶活性的蛋白氨基酸序列，其特征在于：其序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了一种编码具有菘蓝落叶松脂素还原酶活性的蛋白的核苷酸序列在增强植物表达菘蓝落叶松脂素还原酶中的应用。本发明有利于在植物中高表达菘蓝落叶松脂素还原酶从而提高落叶松脂素的产量。