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公开(公告)号:CN115747239A
公开(公告)日:2023-03-07
申请号:CN202111031228.3
申请日:2021-09-03
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/70 , C12N9/90 , C12N9/10 , C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/61 , C12N15/54 , C12N15/12 , C07K14/55 , C07K14/47 , C07K16/00 , G01N33/68 , C12N1/21 , A61K39/00 , A61P35/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域,特别是涉及用于表达黏蛋白型O‑糖基化蛋白的原核载体和系统、黏蛋白型O‑糖基化蛋白的制备方法。用于表达黏蛋白型O‑糖基化化合物的原核表达载体,其包含编码以下酶或蛋白的表达框:糖基转移酶;差向异构酶;含有丝氨酸或苏氨酸的糖基受体;和折叠酶。本发明在胞内氧化环境的大肠杆菌菌株中,差向异构酶将GlcNAc转化为GalNAc,糖基转移酶在折叠酶的存在下形成有活性的糖基转移酶,将GalNAc转移到糖基受体的丝氨酸或苏氨酸上,可直接大量获得黏蛋白型O‑糖基化蛋白。本发明黏蛋白型O‑糖基化蛋白的制备方法简单,一步表达、纯化,不需要化学合成修饰等后续操作。
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公开(公告)号:CN109752546A
公开(公告)日:2019-05-14
申请号:CN201711070938.0
申请日:2017-11-03
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/574
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及血清免疫球蛋白G糖链修饰在肺部磨玻璃结节早期诊断中的用途。本发明经过广泛而深入的研究,发现:以IgG高甘露糖型糖链、IgG多聚N-乙酰葡糖胺糖型糖链、IgG核心岩藻糖型糖链以及IgGα2,6-唾液酸糖型糖链联合共同作为血清生物标志物并辅助现有影像学CT检查,能够提高筛查高危的浸润性GGN患者的灵敏度及特异性,可提高目前对恶性程度较高的浸润性GGN患者的诊断准确性,避免临床上对于非浸润性GGN患者的过度治疗。
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公开(公告)号:CN103529220B
公开(公告)日:2015-09-23
申请号:CN201310476530.9
申请日:2013-10-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种细胞外基质组分I型胶原的羧基端肽CTx在制备诊断结直肠癌药物中的用途。本发明提供CTx在制备诊断结直肠癌药物、筛选诊断结直肠癌药物、以及筛选治疗结直肠癌药物中的用途。本发明选取结直肠癌组织、血清临床标本,研究I型胶原及CTx在结直肠癌发生发展以及分期预后等方面的临床价值。通过大量实验,本发明发明人发现CTx在不同分期结直肠癌病人血清中,表达水平的变化与病理分期呈现正相关,且CTx与现有消化道肿瘤癌胚抗原相比较,能够更好的区分转移与非转移结直肠癌病人。此外,发明人还发现CTx与结直肠癌病人3年无瘤生存率相关,其高表达预示着结直肠癌病人3年无瘤生存预后不良。
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公开(公告)号:CN103529220A
公开(公告)日:2014-01-22
申请号:CN201310476530.9
申请日:2013-10-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/94 , G01N33/6893 , G01N2800/065 , G01N2800/52 , G01N2800/56
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种细胞外基质组分I型胶原的羧基端肽CTx在制备诊断结直肠癌药物中的用途。本发明提供CTx在制备诊断结直肠癌药物、筛选诊断结直肠癌药物、以及筛选治疗结直肠癌药物中的用途。本发明选取结直肠癌组织、血清临床标本,研究I型胶原及CTx在结直肠癌发生发展以及分期预后等方面的临床价值。通过大量实验,本发明发明人发现CTx在不同分期结直肠癌病人血清中,表达水平的变化与病理分期呈现正相关,且CTx与现有消化道肿瘤癌胚抗原相比较,能够更好的区分转移与非转移结直肠癌病人。此外,发明人还发现CTx与结直肠癌病人3年无瘤生存率相关,其高表达预示着结直肠癌病人3年无瘤生存预后不良。
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公开(公告)号:CN101818134A
公开(公告)日:2010-09-01
申请号:CN201010300097.X
申请日:2010-01-07
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的ppGalNAc-T20抗原及其多克隆抗体的制备方法;本发明涉及的ppGalNAc-T20抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;本发明还涉及一种分离核酸,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示;本发明还涉及一种多克隆抗体,该多克隆抗体可用如下的方法制备得到,该方法包括如下步骤:以氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的蛋白质为抗原,采用常规多克隆抗体制备方法制备抗血清;纯化抗血清,即得;本发明还涉及一种制备多克隆抗体的方法,包括如下步骤:克隆如SEQ ID NO:1所示的核酸片段;构建重组质粒,转化大肠杆菌,培养,诱导,裂解,纯化,得蛋白质;以所得蛋白质为抗原,采用常规多克隆抗体制备方法制备抗血清,纯化抗血清,即得。本发明的方法简单,制备的抗体免疫原性强。
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公开(公告)号:CN101386650A
公开(公告)日:2009-03-18
申请号:CN200810201933.1
申请日:2008-10-30
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的ppGalNAc-T18特异性多克隆抗体的制备方法,其具体步骤为:通过序列比对确定抗原序列,构建pGEX-5X-1-shortT18重组表达质粒,然后将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在BL21(DE3)中表达目的蛋白,纯化得到重组蛋白,之后用纯化的蛋白免疫家兔,取血离心得到相应的抗血清,对抗血清纯化得到ppGalNAc-T18抗体。该抗体不与ppGalNAc-T18同源性极高的蛋白发生交叉反应,可用于细胞免疫荧光、Western Blotting检测。
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公开(公告)号:CN109752546B
公开(公告)日:2022-03-11
申请号:CN201711070938.0
申请日:2017-11-03
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/574
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及血清免疫球蛋白G糖链修饰在肺部磨玻璃结节早期诊断中的用途。本发明经过广泛而深入的研究,发现:以IgG高甘露糖型糖链、IgG多聚N‑乙酰葡糖胺糖型糖链、IgG核心岩藻糖型糖链以及IgGα2,6‑唾液酸糖型糖链联合共同作为血清生物标志物并辅助现有影像学CT检查,能够提高筛查高危的浸润性GGN患者的灵敏度及特异性,可提高目前对恶性程度较高的浸润性GGN患者的诊断准确性,避免临床上对于非浸润性GGN患者的过度治疗。
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公开(公告)号:CN111057688B
公开(公告)日:2022-09-23
申请号:CN201911267015.3
申请日:2019-12-11
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种用于表达N‑乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达系统。本发明提供一种用于表达N‑乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体,所述表达载体中包括ppGalNAc‑T蛋白表达框和PDI蛋白表达框。本发明所提供的用于表达N‑乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体和原核表达系统使用共表达单一质粒及具有胞内氧化环境的宿主细胞、并通过常规的通用培养基进行表达,表达系统和操作方法均简单,一步表达、纯化,不需要重折叠等后续操作,且获得ppGalNAc‑T2酶的产量优于人源HEK 293T细胞系表达纯化的ppGalNAc‑T2酶。
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公开(公告)号:CN111057688A
公开(公告)日:2020-04-24
申请号:CN201911267015.3
申请日:2019-12-11
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种用于表达N-乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达系统。本发明提供一种用于表达N-乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体,所述表达载体中包括ppGalNAc-T蛋白表达框和PDI蛋白表达框。本发明所提供的用于表达N-乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体和原核表达系统使用共表达单一质粒及具有胞内氧化环境的宿主细胞、并通过常规的通用培养基进行表达,表达系统和操作方法均简单,一步表达、纯化,不需要重折叠等后续操作,且获得ppGalNAc-T2酶的产量优于人源HEK 293T细胞系表达纯化的ppGalNAc-T2酶。
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公开(公告)号:CN102296052B
公开(公告)日:2013-04-10
申请号:CN201110236821.1
申请日:2011-08-17
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N1/21 , C07K16/40 , G01N33/573 , A61K39/395 , A61P35/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物化学及分子免疫学领域,公开了针对ppGalNAc-T13多克隆抗体的特异性抗原肽及其制备与应用。本发明所述抗原肽的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示或其保守性变异多肽。ppGalNAc-T13与ppGalNAc-T1相似度高达85%,但与本发明制备的特异性针对ppGalNAc-T13的多克隆抗体不与ppGalNAc-T1发生交叉反应,也不与ppGalNAc-Ts家族中的其他成员发生交叉反应;本发明采用原核表达系统获得抗原,并且抗原携带有GST标签的技术方案,使产物易于纯化。本发明所提供的制备方法简单,制备的抗体免疫原性强。
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