公开(公告)号：CN111057688A

公开(公告)日：2020-04-24

申请号：CN201911267015.3

申请日：2019-12-11

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张延 ,  梁涛 ,  许之珏 ,  贾文娟

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种用于表达N-乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达系统。本发明提供一种用于表达N-乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体，所述表达载体中包括ppGalNAc-T蛋白表达框和PDI蛋白表达框。本发明所提供的用于表达N-乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体和原核表达系统使用共表达单一质粒及具有胞内氧化环境的宿主细胞、并通过常规的通用培养基进行表达，表达系统和操作方法均简单，一步表达、纯化，不需要重折叠等后续操作，且获得ppGalNAc-T2酶的产量优于人源HEK 293T细胞系表达纯化的ppGalNAc-T2酶。

公开(公告)号：CN111057688B

公开(公告)日：2022-09-23

申请号：CN201911267015.3

申请日：2019-12-11

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张延 ,  梁涛 ,  许之珏 ,  贾文娟

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种用于表达N‑乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达系统。本发明提供一种用于表达N‑乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体，所述表达载体中包括ppGalNAc‑T蛋白表达框和PDI蛋白表达框。本发明所提供的用于表达N‑乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体和原核表达系统使用共表达单一质粒及具有胞内氧化环境的宿主细胞、并通过常规的通用培养基进行表达，表达系统和操作方法均简单，一步表达、纯化，不需要重折叠等后续操作，且获得ppGalNAc‑T2酶的产量优于人源HEK 293T细胞系表达纯化的ppGalNAc‑T2酶。