适用于链霉菌染色体基因敲除的系列双功能科斯载体

    公开(公告)号:CN1587417A

    公开(公告)日:2005-03-02

    申请号:CN200410066203.7

    申请日:2004-09-09

    Abstract: 一种适用于链霉菌染色体基因敲除的系列双功能科斯载体。包括pJTU390、pJTU391、pJTU407、pJTU408、pJTU409、pJTU410、pJTU411、pJTU412,由以下DNA元件组成:①包含来自大肠杆菌质粒CoIE1复制起始位点(ori),②包含氨苄青霉素抗性基因(bla),③包含来自链霉菌质粒pIJ101复制起始位点(ori)和复制子,④包含硫链丝菌素抗性基因(tsr),⑤包含λ噬菌体科斯(cos)位点,⑥包含来自RP4的接合转移起始位点(oriT),⑦包含可被T3和T7噬菌体RNA聚合酶特异性识别启动子,⑧包含来自Tn5的不包含启动子的新霉素抗性基因(neo)。本发明同时包含有大肠杆菌质粒和链霉菌质粒复制子和抗性筛选标记,同时在两种宿主进行自主复制和遗传的功能,方便地在大肠杆菌中进行体外遗传操作和在链霉菌中进行基因功能分析研究。

    梅岭霉素细胞色素P450羟化酶基因

    公开(公告)号:CN1472323A

    公开(公告)日:2004-02-04

    申请号:CN03116990.2

    申请日:2003-05-16

    Abstract: 一种梅岭霉素细胞色素P450羟化酶基因,属于基因技术领域。它编码细胞色素P450羟化酶,催化梅岭霉素糖苷配基C6-C8a呋喃环的形成,基因的核苷酸序列长度为1380个碱基对(bp),编码459个氨基酸。根据已知的阿弗菌素生物合成基因簇序列,通过聚合酶链式反应扩增出阿弗菌素生物合成基因簇中负责催化阿弗菌素糖苷配基C6-C8a呋喃环形成的细胞色素P450羟化酶基因片段,并以之为探针进行Southern杂交,从南昌链霉菌基因文库中获得包含有其同源序列的阳性科斯质粒,经过测序与功能分析,获得梅岭霉素细胞色素P450羟化酶基因。本发明开以辟利用组合生物合成及遗传工程技术创新微生物药物的新途径,为已知生物活性分子的高产和新微生物农药的创新提供新的技术和手段。

    积累井冈霉亚基胺A的基因工程菌株及其构建方法

    公开(公告)号:CN101440357A

    公开(公告)日:2009-05-27

    申请号:CN200810204013.5

    申请日:2008-12-04

    Abstract: 一种生物医药技术领域的积累井冈霉亚基胺A的基因工程菌株及其构建方法。本发明涉及的工程菌株是在染色体上引入基因突变,从而导致井冈霉素生物合成途径中的糖基转移酶基因valG发生突变。该菌株的构建方法具体为:设计并构建用于对糖基转移酶基因valG进行突变的同源重组质粒载体pJTU609;把质粒pJTU609接合转移导入到受体链霉菌5008细胞中进行同源重组;先通过突变株的筛选和验证硫链丝菌素抗性影印筛选,进而通过PCR产物片段大小的差异最终筛选到LL-1突变株。本发明积累井冈霉素前体物质井冈霉亚基胺A的基因工程菌株,其产量为野生菌株的5倍。通过该工程菌可以大规模生产高纯度的井冈霉亚基胺A。

    FR-008聚酮抗生素生物合成相关的基因簇

    公开(公告)号:CN102021187A

    公开(公告)日:2011-04-20

    申请号:CN201010501401.7

    申请日:2003-10-23

    Abstract: 一种链霉菌FR-008中负责FR-008聚酮合成的基因簇,属于基因技术领域,包含fscA、fscB、fscC、fscD、fscE、fscF、fscTI、fscTII、fscRI、fscRII、fscRIII、fscRIV、fscP、fscFE、fscTE、fscMI、fscMII、fscMIII、fscO、pabAB、pabC这一系列共21个基因及其DNA序列,即序列1,并提供了这些基因及其DNA序列所编码FR-008生物合成酶的氨基酸序列,即序列2-22。本发明所提供的基因及其所编码的蛋白质可以用来查找和发展可用于医药,工业,农业的化合物或蛋白。

    南寡霉素生物合成基因簇

    公开(公告)号:CN1257282C

    公开(公告)日:2006-05-24

    申请号:CN03150923.1

    申请日:2003-09-11

    Abstract: 一种南寡霉素生物合成基因簇,属于基因技术领域。其具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列,整个南寡霉素生物合成基因簇共13个基因,具体为:(1)聚酮合酶基因,即nlmA1,nlmA2,nlmA3,nlmA4,nlmA5,nlmA6,nlmA7共7个基因;(2)南寡霉素的修饰基因,即nlmB,nlmOI共2个基因;(3)南寡霉素转座酶基因,即nlmTI,nlmTII共2个基因;(4)南寡霉素的调节基因,即nlmRI;(5)南寡霉素前体物合成基因,即ccrA。本发明所提供的基因及其蛋白质、抗体也可以用来查找和发展可用于医药、工业、农业的化合物或蛋白。

    梅岭霉素C5-酮基还原酶基因

    公开(公告)号:CN1472322A

    公开(公告)日:2004-02-04

    申请号:CN03116989.9

    申请日:2003-05-16

    Abstract: 一种梅岭霉素C5-酮基还原酶基因,属于基因技术领域。本发明编码C5-酮基还原酶,催化梅岭霉素糖苷配基C5-酮基还原为羟基,基因的核苷酸序列长度为936个碱基对(bp),编码311个氨基酸。根据已知的阿弗菌素生物合成基因簇序列,通过聚合酶链式反应扩增出阿弗菌素生物合成基因簇中负责催化阿弗菌素糖苷配基C5-酮基进行还原的C5-酮基还原酶基因片段,并以之为探针进行Southern杂交,从南昌链霉菌基因文库中获得包含有其同源序列的阳性科斯质粒,经过测序与功能分析,获得梅岭霉素C5-酮基还原酶基因。本发明开辟以利用组合生物合成及遗传工程技术创新微生物药物的新途径,为已知生物活性分子的高产和新微生物农药的创新提供新的技术和手段。

    链霉菌线性质粒中抗砷基因簇

    公开(公告)号:CN1793368A

    公开(公告)日:2006-06-28

    申请号:CN200510030980.0

    申请日:2005-11-03

    Abstract: 一种基因技术领域的链霉菌线性质粒中抗砷基因簇。本发明整个线性质粒上抗砷基因簇共6个基因及其DNA序列,具体为:砷抗性基因:sasB和sasC 2个基因,砷抗性调节基因:sasR和sasR22个基因,黄素单加氧酶基因:sasO基因,硫氧还蛋白还原酶基因:sasT基因;DNA序列为序列1。本发明提供一种链霉菌FR-008线性质粒上抗砷基因簇,所提供的基因及其蛋白质,抗体可用于环境保护,工业应用上构建新的工程菌。

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