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公开(公告)号：CN113355366A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110496774.8
申请日：2021-05-07
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明涉及属于基因工程和酶工程领域，本发明利用基因工程和定点突变的方法，将来源于近平滑假丝酵母（保藏号ATCC7330）的羰基还原酶进行表达，并开展定点突变，获得羰基还原酶的酶活力提高6倍的突变体A121N，为利用羰基还原酶或其突变体酶还原苯乙醛制备2‑苯乙醇提供了酶源。在此基础上，本发明以苯乙醛为原料，利用葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶耦合，原位再生辅酶NADPH，催化反应后采用超滤设备分离浓缩回收酶，可以实现酶回收5次以上，极大降低2‑苯乙醇的制备成本，在优化工艺下，管式反应转化率达到90%以上，间歇式反应转化率可达到80%以上。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115074260A
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202210542548.3
申请日：2022-05-18
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明提供一种耐热克鲁维酵母突变株及制备(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇的方法，利用Kluyveromyces thermotolerans ST耐热克鲁维酵母ST，保藏号CCTCC NO：M 2022498，整细胞催化制备手性药物贝托司汀药物中间体(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇的方法，属于生物催化技术领域。本发明采用常温常压等离子体诱变和适应性进化技术，筛选得到具有耐毒耐高温优势菌株耐热克鲁维酵母突变株，在反应温度40℃、底物4‑氯苯基‑(吡啶‑2‑基)‑甲酮浓度50g/L、菌体浓度50g/L、pH为8的PEG和磷酸二氢钠组成的双水相体系中，进行不对称还原反应36h，产物(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇的光学纯度和产率分别可以达到99.2%e.e.和92.9%。该方法具有温度低、操作简便、产品光学纯度和收率高等优点，具有产业化应用前景。
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公开(公告)号：CN113088443A
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN202110264566.5
申请日：2021-03-11
Applicant: 三峡大学
Abstract: 一种多酶级联反应分离耦合系统，包括反应器，反应器上设有输入管道，输入管道上设有文丘里预混合器，输入管道的输入端连接原料罐与酶液罐上，反应器一端设有输出管道，输出管道连接至超滤系统上，超滤系统中设有超透膜，超透膜与输出管道之间的超滤系统上设有回收酶总管，回收酶总管连接至文丘里预混合器上；超透膜与远离输出管道的超滤系统一端之间上设有透过液输出管，透过液输出管连接至另一反应器上，透过液输出管上也设有文丘里预混合器，透过液输出管上的文丘里预混合器上还通过管道与二次反应酶液罐连接。本发明专利采用上述结构及方法，依靠多级管式反应、酶分离纯化浓缩回用系统，实现目标产物手性化合物的低成本高纯度的连续化生产。
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公开(公告)号：CN115074260B
公开(公告)日：2024-12-17
申请号：CN202210542548.3
申请日：2022-05-18
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明提供一种耐热克鲁维酵母突变株及制备(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇的方法，利用Kluyveromyces thermotolerans ST耐热克鲁维酵母ST，保藏号CCTCC NO：M 2022498，整细胞催化制备手性药物贝托司汀药物中间体(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇的方法，属于生物催化技术领域。本发明采用常温常压等离子体诱变和适应性进化技术，筛选得到具有耐毒耐高温优势菌株耐热克鲁维酵母突变株，在反应温度40℃、底物4‑氯苯基‑(吡啶‑2‑基)‑甲酮浓度50g/L、菌体浓度50g/L、pH为8的PEG和磷酸二氢钠组成的双水相体系中，进行不对称还原反应36h，产物(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇的光学纯度和产率分别可以达到99.2%e.e.和92.9%。该方法具有温度低、操作简便、产品光学纯度和收率高等优点，具有产业化应用前景。
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公开(公告)号：CN113355366B
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN202110496774.8
申请日：2021-05-07
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明涉及属于基因工程和酶工程领域，本发明利用基因工程和定点突变的方法，将来源于近平滑假丝酵母（保藏号ATCC7330）的羰基还原酶进行表达，并开展定点突变，获得羰基还原酶的酶活力提高6倍的突变体A121N，为利用羰基还原酶或其突变体酶还原苯乙醛制备2‑苯乙醇提供了酶源。在此基础上，本发明以苯乙醛为原料，利用葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶耦合，原位再生辅酶NADPH，催化反应后采用超滤设备分离浓缩回收酶，可以实现酶回收5次以上，极大降低2‑苯乙醇的制备成本，在优化工艺下，管式反应转化率达到90%以上，间歇式反应转化率可达到80%以上。
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公开(公告)号：CN215209478U
公开(公告)日：2021-12-17
申请号：CN202120520527.2
申请日：2021-03-11
Applicant: 三峡大学
Abstract: 一种用于多酶级联的管式反应器，包括反应器，所述的反应器包括内部的反应腔，反应腔外围设有密闭的环形腔，环形腔内设有加热盘管，加热盘管的进水端与出水端均延伸至反应器外，反应器内设有多个折流板，反应器内还设有一根穿过多个折流板的转轴，转轴一端与反应器一端外的电机之间轴连接；反应器一端设有进料管，另一端设有出料管；进料管连接至混料系统上；反应器上还设有温度控制系统。本实用新型专利采用上述结构，能够实现精确温度、PH控制目的，反应器采用管式结构，属于平推流反应器的一种，有利于大分子量酶和小分子底物的充分反应，避免产物抑制，通过多管拼接，可以避免多酶元件“交叉反应”和“辅酶干扰反应”发生。
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