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公开(公告)号：CN113265431B
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN202110496791.1
申请日：2021-05-07
Applicant: 三峡大学
IPC: C12P7/42
Abstract: 本发明提供了一种多酶级联催化合成对香豆酸的方法。以对羟基苯丙酮酸为原料，经过羰基还原酶还原为对羟基苯基乳酸，然后通过脱水酶制备对香豆酸。本方法可以在管式反应器‑膜分离耦合装置中进行连续化生产，也可以在间歇反应釜法，羰基还原酶所需要的辅酶NAD(P)H通过葡萄糖脱氢酶和葡萄糖反应再生。每批羰基还原酶、葡萄糖脱氢酶、脱水酶均可回收利用5次以上，生产效率最高可达到50 g/L.h。本发明生产成本低、效率高、产品纯度好。
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公开(公告)号：CN113355366B
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN202110496774.8
申请日：2021-05-07
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明涉及属于基因工程和酶工程领域，本发明利用基因工程和定点突变的方法，将来源于近平滑假丝酵母（保藏号ATCC7330）的羰基还原酶进行表达，并开展定点突变，获得羰基还原酶的酶活力提高6倍的突变体A121N，为利用羰基还原酶或其突变体酶还原苯乙醛制备2‑苯乙醇提供了酶源。在此基础上，本发明以苯乙醛为原料，利用葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶耦合，原位再生辅酶NADPH，催化反应后采用超滤设备分离浓缩回收酶，可以实现酶回收5次以上，极大降低2‑苯乙醇的制备成本，在优化工艺下，管式反应转化率达到90%以上，间歇式反应转化率可达到80%以上。
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公开(公告)号：CN113355366A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110496774.8
申请日：2021-05-07
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明涉及属于基因工程和酶工程领域，本发明利用基因工程和定点突变的方法，将来源于近平滑假丝酵母（保藏号ATCC7330）的羰基还原酶进行表达，并开展定点突变，获得羰基还原酶的酶活力提高6倍的突变体A121N，为利用羰基还原酶或其突变体酶还原苯乙醛制备2‑苯乙醇提供了酶源。在此基础上，本发明以苯乙醛为原料，利用葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶耦合，原位再生辅酶NADPH，催化反应后采用超滤设备分离浓缩回收酶，可以实现酶回收5次以上，极大降低2‑苯乙醇的制备成本，在优化工艺下，管式反应转化率达到90%以上，间歇式反应转化率可达到80%以上。
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公开(公告)号：CN113265431A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110496791.1
申请日：2021-05-07
Applicant: 三峡大学
IPC: C12P7/42
Abstract: 本发明提供了一种多酶级联催化合成对香豆酸的方法。以对羟基苯丙酮酸为原料，经过羰基还原酶还原为对羟基苯基乳酸，然后通过脱水酶制备对香豆酸。本方法可以在管式反应器‑膜分离耦合装置中进行连续化生产，也可以在间歇反应釜法，羰基还原酶所需要的辅酶NAD(P)H通过葡萄糖脱氢酶和葡萄糖反应再生。每批羰基还原酶、葡萄糖脱氢酶、脱水酶均可回收利用5次以上，生产效率最高可达到50 g/L.h。本发明生产成本低、效率高、产品纯度好。
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