一种重组人Ⅲ型胶原蛋白及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN117700528A

    公开(公告)日:2024-03-15

    申请号:CN202311583579.4

    申请日:2023-11-24

    IPC分类号: C07K14/78 C12N15/12 C12N15/85

    摘要: 本发明提供了一种重组人Ⅲ型胶原蛋白及其制备方法和应用,属于蛋白质工程技术领域,所述重组人Ⅲ型胶原蛋白的氨基酸序列与SEQ ID No.1所示的序列有90%以上的同源性;本发明还提供了所述重组人Ⅲ型胶原蛋白在哺乳动物细胞中表达的方法。本发明提供的重组人Ⅲ型胶原蛋白纯度高、生物活性高,分子量不超过40kDa,远小于天然全长的人Ⅲ型胶原蛋白,具有显著的促细胞迁移作用,为胶原蛋白穿过皮肤屏障发挥生物学功能减少障碍。

    一种检测生物标志物的试剂盒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114720691B

    公开(公告)日:2022-12-09

    申请号:CN202210532120.0

    申请日:2022-05-10

    摘要: 本发明公开了一种检测生物标志物的试剂盒,所述的生物标志物为MBTPS2蛋白;所述的试剂盒包括有效量的MBTPS2突变蛋白和有效量的特异性识别MBTPS2突变蛋白的单克隆抗体,所述的MBTPS2突变蛋白为aa459位N突变为S、aa505位L突变为F;所述的MBTPS2突变蛋白的密码子优化后的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述的有效量的特异性识别MBTPS2突变蛋白的单克隆抗体为单克隆抗体1,所述的单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。本发明制备的检测MBTPS2突变蛋白的试剂盒(如werstern blot、双抗体夹心ELISA)具有良好的特异性、敏感性和准确度,适合MBTPS2突变蛋白的大量准确的检测。

    一种利用化学交联制备纯化泛素化或类泛素化组蛋白八聚体的方法

    公开(公告)号:CN115716878A

    公开(公告)日:2023-02-28

    申请号:CN202211119498.4

    申请日:2022-09-14

    摘要: 本发明公开一种利用化学交联制备纯化泛素化或类泛素化组蛋白八聚体的方法,包括以下步骤:(1)表达纯化得到突变型泛素或类泛素蛋白;所述突变型泛素的C末端为半胱氨酸,所述突变型类泛素蛋白的C末端甘氨酸对应的核苷酸序列突变为半胱氨酸对应的核苷酸序列;(2)表达纯化得到突变型的组蛋白八聚体;所述突变型的组蛋白八聚体在进行泛素化/类泛素化修饰位点上的赖氨酸突变为半胱氨酸;(3)利用化学交联剂,将突变型泛素或类泛素蛋白与突变型组蛋白八聚体在非变性条件下进行交联反应;(4)将化学交联反应产物进行标准色谱纯化。该方法利用化学交联方法直接在组蛋白八聚体水平上进行体外构建泛素化/类泛素化组蛋白八聚体。