高通量筛选菌株的方法及其应用

    公开(公告)号:CN109810972A

    公开(公告)日:2019-05-28

    申请号:CN201711157804.2

    申请日:2017-11-20

    发明人: 刘然

    IPC分类号: C12N15/01 C12N13/00 C12R1/01

    摘要: 本发明涉及微生物学领域,具体涉及一种高通量筛选菌株的方法。所述方法包括:单因素实验确定菌株的对数生长期和诱变条件B1;选取指示剂,将不同浓度的菌株和指示剂指示菌反应,测定指示剂的指标数值,确定突变型菌株和指示剂反应的有效浓度C1和反应时间D1;将菌株培养至对数生长期,然后按照诱变条件B1处理,挑选出突变型菌株至于高通量筛选平板中培养,然后将培养好的突变型菌株稀释至有效浓度C1,然后和指示剂混合反应,反应时间为D1,以野生型菌株作为对照,测定指示剂的指标数值,筛选得到目的菌株。高通量筛选具有快速、稳定、高效的特点,提高了筛选效率,缩短了选育周期,是工业上筛选目的菌株的有效手段。

    一种改造萜类合酶的方法

    公开(公告)号:CN108239630B

    公开(公告)日:2021-07-16

    申请号:CN201710297632.2

    申请日:2017-04-28

    IPC分类号: C12N9/88 C12N15/60

    摘要: 本发明提出了一种萜类合酶、核酸分子、构建体、重组细胞、用途及获得萜类合酶的方法。与野生型萜类合酶相比,所述萜类合酶具有下列至少之一的突变:活性区域中的疏水性或者中性氨基酸中的芳香族氨基酸突变为非芳香族氨基酸;和活性区域中的疏水性或者中性氨基酸中的非芳香族氨基酸突变为芳香族氨基酸。在本发明的萜类合酶的催化作用下,能够改变催化产物中主产物的丰度、使得原本的副产物变为主产物或者获得了新的萜类化合物。

    马度米星化合物的生物合成基因簇及其应用

    公开(公告)号:CN112442507A

    公开(公告)日:2021-03-05

    申请号:CN201910838457.2

    申请日:2019-09-05

    发明人: 刘然

    摘要: 本发明公开了一种马度米星化合物的生物合成基因簇及其应用。其中,马度米星化合物的生物合成基因簇包括:Ⅰ型线性聚酮合成酶基因模块,所述Ⅰ型线性聚酮合成酶基因模块包括:madA1基因、madA2基因、madA3基因、madA4基因、madA5基因、madA6基因、madA7基因、madA8基因、madA9基因、madA10基因和madA11基因;糖基合成相关基因模块,所述糖基合成相关基因模块包括:madG1基因、madG2基因、madG3基因、madG4基因、madG5基因、madG6基因、madG7基因和madG8基因;以及修饰基因模块,所述修饰基因模块包括:madO1基因、madO2基因、madI基因、madE基因、madP1基因、madP2基因、madM1基因、madM2基因、madG9基因、madG10基因和madTE基因;以及调节基因模块,所述调节基因模板包括:madR1基因、madR2基因、madR3基因和madR4基因。

    羊毛硫肽的筛选方法及无细胞蛋白合成体系和羊毛硫肽

    公开(公告)号:CN112239490A

    公开(公告)日:2021-01-19

    申请号:CN201910642710.7

    申请日:2019-07-16

    发明人: 刘然

    摘要: 本发明涉及生物工程领域,具体涉及一种羊毛硫肽的筛选方法及无细胞蛋白合成体系和羊毛硫肽。该筛选方法包括:(1)基于参考羊毛硫肽的序列,确定候选羊毛硫肽;(2)将所述候选羊毛硫肽的核心肽编码序列与前导肽序列相连,所得连接产物和载体连接,以便获得重组表达载体;(3)将所述重组表达载体、细胞提取物和氨基酸预混液进行接触反应,以便获得所述候选羊毛硫肽;(4)基于所述候选羊毛硫肽的不同性能,筛选获得目标羊毛硫肽。该方法利用无细胞蛋白合成体系可以方便快速获得目标羊毛硫肽。

    一种提高无细胞体系蛋白质合成的方法

    公开(公告)号:CN108396034A

    公开(公告)日:2018-08-14

    申请号:CN201710065770.8

    申请日:2017-02-06

    IPC分类号: C12N15/70 C12R1/19

    摘要: 本发明的目的在于提供一种高效率的无细胞蛋白质的合成方法,属于合成生物学领域。该方法将含一种或多种特定蛋白质的混合溶液加入含有大肠杆菌或其他生物体提取物的无细胞蛋白质合成反应溶液,通过加入蛋白质溶液对无细胞蛋白质合成的促进,提高无细胞蛋白质合成体系的蛋白产量;同时提升了蛋白质合成反应的速率。相较于对照组,本发明中EGFP蛋白质的合成量提升了1.5倍。本发明声明的特定蛋白质包括:T7 RNAP、AspRS、CysRS、IF2、IF3、EF-G、EF-Tu、EF-Ts、RF2、RF3和RRF。

    聚醚类化合物在制备药物中的用途及筛选抗癌药物的方法

    公开(公告)号:CN107951879A

    公开(公告)日:2018-04-24

    申请号:CN201610898922.8

    申请日:2016-10-14

    CPC分类号: A61K31/351 G01N33/6848

    摘要: 本发明公开了聚醚类化合物在制备药物中的用途及筛选抗癌药物的方法。所述药物用于调控下列至少之一的信号通路:钙离子信号通路、Wnt信号通路、Hippo信号通路、TNF信号通路、VEGF信号通路、p53信号通路、NF-kappa B信号通路、Ras信号通路、mTOR信号通路、RNA降解信号通路、PPAR信号通路、cAMP信号通路、HIF-1信号通路、Insulin信号通路、AMPK信号通路、Rap1信号通路、凋亡信号通路、细胞周期、cGMP-PKG信号通路、DNA复制信号通路、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路以及自噬信号通路。本发明的聚醚类化合物能够通过调控多种信号通路,从而引起肿瘤细胞的死亡,起到较好的抗癌效果。