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公开(公告)号:CN102268056A
公开(公告)日:2011-12-07
申请号:CN201010191526.4
申请日:2010-06-04
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07H19/213 , C07H1/06 , B01D15/10
Abstract: 本发明提供一种连续分离环磷腺苷的方法,该方法使用一种连续离子交换系统,该连续离子交换系统包括分别位于吸附区、洗杂区、洗脱区和再生区的5-80根串联的阴离子交换柱;该方法包括将含有环磷腺苷的溶液连续地泵入位于吸附区的阴离子交换柱中进行吸附,使吸附后的阴离子交换柱依次通过洗杂区、洗脱区和再生区,再返回到吸附区再次进行吸附;该方法还包括将洗脱区流出的洗脱液脱盐、结晶、干燥得到环磷腺苷。本发明的分离方法简便易行,效果好,不仅其设备投资、运行成本低廉,而且可以根据分离量的多少,实现从公斤级到吨级的分离,通过本发明所得产品在收率和产品质量方面都获得了极好的结果,保证了产品品质。
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公开(公告)号:CN101538598B
公开(公告)日:2011-12-07
申请号:CN200810019854.9
申请日:2008-03-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种胞二磷胆碱的制备方法,以氯化胆碱、磷酸根离子和胞苷一磷酸或其前体为底物,以葡萄糖、果糖、蔗糖或麦芽糖为能量供体,加入小分子化学效应物质,利用有透性的酵母细胞全细胞催化制备胞二磷胆碱。本发明通过建立代谢网络模型和代谢流量分析、采用小分子化学效应物质调控代谢流量从而提高能量自耦联及胆碱磷酸化效率的方法,利用有透性的酵母细胞来高效制备胞二磷胆碱,产品浓度大幅提高,底物的利用率也有提高。
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公开(公告)号:CN101372699B
公开(公告)日:2011-11-30
申请号:CN200810124754.2
申请日:2008-09-02
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: C12P7/42 , C12N9/0004
Abstract: 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的羰酰还原酶在4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的羰酰还原酶为催化剂,以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,以NADPH为辅因子,不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的羰酰还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中,取得很好的效果,其对底物的得率高达95%、产物的对映体过量值为100%,且产量高,大大降低了生产成本。
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公开(公告)号:CN101230373B
公开(公告)日:2011-11-30
申请号:CN200810020215.4
申请日:2008-02-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种S-腺苷蛋氨酸的制备方法,以多羟基有机试剂保护酶的活性,以腺苷三磷酸前体、L-蛋氨酸和磷酸根离子为底物,以葡萄糖或/和麦芽糖为能量供体,加入金属离子的组合物,利用有透性的生产菌株全细胞催化生产S-腺苷蛋氨酸。本发明使用金属离子的组合物调控代谢流量从而提高能量自偶联效率,加入有机试剂对菌体和酶的活性进行保护,利用有透性的生产菌株来制备S-腺苷蛋氨酸,缩短了合成时间,并使得产物积累到胞外,从而可以节省后续分离的成本和简化操作步骤。
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公开(公告)号:CN101418026B
公开(公告)日:2011-05-18
申请号:CN200810156408.2
申请日:2008-10-09
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07H17/08
Abstract: 本发明公开了一种晶型和粒度可控的阿奇霉素结晶工艺,在pH7.0~11.0和初始浓度为80~200g·L-1阿奇霉素有机溶液中,加入无机钠盐和溶析剂,结晶温度控制在10~90℃,搅拌转速控制在10~1000r·min-1,采用溶析盐析协同方式结晶,结晶完全后抽滤,溶析剂反复洗涤,真空干燥。本发明通过对制备条件的调控达到阿奇霉素晶型稳定制备和粒度可控。利用本发明的结晶工艺得到的阿奇霉素晶型具有稳定性好、纯度高(纯度达99%以上)、颗粒大小均匀、光泽度好、吸湿性弱等优点。
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公开(公告)号:CN101974444A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010171377.5
申请日:2010-05-13
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株高产D-核糖且联产乙偶姻的枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,登记入册的编号是CGMCC No.3720,保藏日2010年04月08日。本发明还公开了利用上述的枯草芽孢杆菌发酵生产D-核糖且联产乙偶姻的方法。本发明筛选到的菌株能利用多种碳源和氮源发酵生产D-核糖并联产乙偶姻,操作方便简单,培养条件粗放,易于产业化。本发明通过在发酵培养基中添加有机酸,使D-核糖的产量比出发菌提高了64.5g/L,乙偶姻提高了17.3g/L。该菌具有较高的合成D-核糖和乙偶姻的能力,其中乙偶姻的还原态副产物2,3-丁二醇的产量很低。
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公开(公告)号:CN101768617A
公开(公告)日:2010-07-07
申请号:CN201019026027.7
申请日:2010-02-04
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种全细胞生物合成脱氧核苷三磷酸的新技术,是以脱氧核苷一磷酸dNMP和磷酸根离子为底物,以糖为能量供体,利用有透性的酵母细胞,在化学效应物质的存在下反应来制备脱氧核苷三磷酸。本发明通过运用全细胞催化和代谢工程的原理,采用化学效应物质调控代谢流量,建立了高效的能量自耦联和再生系统,最终实现脱氧核苷三磷酸的高效制备。本发明克服了传统脱氧核苷三磷酸生产工艺的不足,具有工艺简单、转化率高、成本低,以及污染小等特点。
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公开(公告)号:CN101654677A
公开(公告)日:2010-02-24
申请号:CN200910183311.5
申请日:2009-09-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达核酸酶P1的基因,及包含其的表达载体和宿主细胞和该基因的应用,本发明还公开了一种表达桔青霉产核酸酶P1基因的重组毕赤酵母菌CGMCC No.3188及其构建方法。本发明的重组工程菌株毕赤酵母CGMCC No.3188能够高效表达桔青霉nucP基因,分泌表达核酸酶P1具有较高的磷酸二酯酶活性,用于水解RNA,产物得率高,产生的杂质较少,有利于减少下游分离的工序和降低生产成本。利用本发明的重组工程菌株毕赤酵母CGMCC No.3188进行高密度发酵,酶活是野生菌株的1.5倍。将获得的重组酶应用于酶解RNA溶液,水解率达到40%以上,且得到的水解产物副产物大大减少。
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公开(公告)号:CN101392225A
公开(公告)日:2009-03-25
申请号:CN200810156168.6
申请日:2008-10-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种不对称转化制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的重组酵母菌,它是导入羰酰还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的酿酒酵母菌。本发明还公开了上述重组酵母菌的构建方法。利用本发明重组酵母菌制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的方法为:以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,以葡萄糖为辅助底物,由本发明的重组酵母菌进行转化反应制备得到(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯。本发明的重组酵母菌可在不添加任何辅酶的条件下,高效催化4-氯乙酰乙酸乙酯为(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯,光学纯度e.e值大于98%,对底物的转化率大于95%,降低了生产成本,比起其它无需外加昂贵辅酶的菌种,对底物的转发率高,光学活性高。
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公开(公告)号:CN101230373A
公开(公告)日:2008-07-30
申请号:CN200810020215.4
申请日:2008-02-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种S-腺苷蛋氨酸的制备方法,以多羟基有机试剂保护酶的活性,以腺苷三磷酸前体、L-蛋氨酸和磷酸根离子为底物,以葡萄糖或/和麦芽糖为能量供体,加入金属离子的组合物,利用有透性的生产菌株全细胞催化生产S-腺苷蛋氨酸。本发明使用金属离子的组合物调控代谢流量从而提高能量自偶联效率,加入有机试剂对菌体和酶的活性进行保护,利用有透性的生产菌株来制备S-腺苷蛋氨酸,缩短了合成时间,并使得产物积累到胞外,从而可以节省后续分离的成本和简化操作步骤。
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