表达山羊α干扰素的重组毕赤酵母及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105907766A

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201610269580.3

    申请日:2016-04-27

    发明人: 于力 王芳

    摘要: 本发明公开了一株表达山羊α干扰素的重组毕赤酵母及其构建方法和应用。本发明首先公开了根据毕赤酵母的密码子偏嗜性进行优化的山羊α干扰素基因,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。本发明进一步公开了一株表达优化的山羊α干扰素基因的重组毕赤酵母,其微生物保藏编号为:CGMCC No.9088。本发明所构建的重组毕赤酵母能够稳定的表达山羊α干扰素,不仅表达量大,而且抗病毒活性高。本发明重组毕赤酵母表达的山羊α干扰素在牛源细胞和羊源细胞上均具有高度抗病毒活性,能够作为抗病毒感染的药物或疫苗佐剂使用,用于预防或治疗牛和羊等反刍动物病毒性传染病。

    一种改造后的犬α1-干扰素基因、表达载体的构建及其蛋白的制备方法

    公开(公告)号:CN104894139A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510264937.4

    申请日:2015-05-22

    摘要: 本发明公开了一种经修饰改造的犬α1-干扰素基因及犬α1-干扰素的制备方法。修饰改造后的犬α1-干扰素基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示,其编码氨基酸的序列如SEQ?ID?NO.2所示。本发明具体涉及犬α1-干扰素密码子对酵母密码子偏嗜性的匹配、改造,高效生产犬α1-干扰素的培养方法、避免污染的措施、确定加甲醇的量以及时间、对蛋白表达时间的控制即蛋白收获时间、无菌检验、蛋白含量以及活性测定、扩大培养条件等操作方法的优化控制,本发明方法简单易行,成本较低,实现了犬α1-干扰素在毕赤酵母中稳定高效的表达,表达的犬α1-干扰素对犬病毒性传染病有显著的疗效,可以增强狂犬疫苗的免疫效果。

    人工合成鸡干扰素基因序列及其重组工程菌的构建与应用

    公开(公告)号:CN102321631B

    公开(公告)日:2012-12-05

    申请号:CN201110251626.6

    申请日:2011-08-30

    申请人: 贵州大学

    摘要: 本发明涉及“人工合成鸡干扰素基因序列及其重组工程菌的构建与应用”,属于生物技术领域。本发明对采用人工合成的序列如SEQ ID NO1或SEQ ID NO2,以酿酒酵母作为宿主菌株,得到了重组工程菌,经PCR、酶切、测序、SDS-PAGE、ELISA和CPE检测结果表明:ChIFN-α和ChIFN-γ基因均能在宿主菌株中胞内表达,并表达蛋白具有明显的生物学活性。实验表明,本发明将酿酒酵母作为生物反应器生产鸡干扰素药用蛋白,不仅可以极大降低干扰素生产成本,而且可以在提供优质蛋白的同时达到改善机体免疫功能的目的,为利用酵母添加剂防治动物疫病奠定基础。

    编码猪α-干扰素的DNA分子和重组大肠杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN101955942B

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201010295921.7

    申请日:2010-09-29

    摘要: 本发明公开了一种编码猪α-干扰素的DNA分子和重组大肠杆菌及其应用。编码猪α-干扰素的DNA分子,其核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第1-501位。表达猪α-干扰素的重组菌,是稳定表达序列表中序列1自5’末端第1-498位所示的DNA分子编码的蛋白的重组大肠杆菌。本发明还公开了利用表达猪α-干扰素的重组菌生产猪α-干扰素蛋白的方法。本发明的编码猪α-干扰素的DNA分子适合在大肠杆菌中表达。本发明的猪α-干扰素,对猪是安全的;对仔猪日增重、生长猪料重比、受孕母猪生产繁殖性能无不良影响;对确诊的临床PED感染具有明显的治疗效果。接种猪α-干扰素的猪生活环境中没有抗性基因残留。

    人工合成鸡干扰素基因序列及其重组工程菌的构建与应用

    公开(公告)号:CN102321631A

    公开(公告)日:2012-01-18

    申请号:CN201110251626.6

    申请日:2011-08-30

    申请人: 贵州大学

    摘要: 本发明涉及“人工合成鸡干扰素基因序列及其重组工程菌的构建与应用”,属于生物技术领域。本发明对采用人工合成的序列如SEQ ID NO1或SEQ ID NO2,以酿酒酵母作为宿主菌株,得到了重组工程菌,经PCR、酶切、测序、SDS-PAGE、ELISA和CPE检测结果表明:ChIFN-α和ChIFN-γ基因均能在宿主菌株中胞内表达,并表达蛋白具有明显的生物学活性。实验表明,本发明将酿酒酵母作为生物反应器生产鸡干扰素药用蛋白,不仅可以极大降低干扰素生产成本,而且可以在提供优质蛋白的同时达到改善机体免疫功能的目的,为利用酵母添加剂防治动物疫病奠定基础。