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公开(公告)号：CN113337476B
公开(公告)日：2023-06-20
申请号：CN202110589782.7
申请日：2021-05-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/00 , C12N15/42 , C12N15/63 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种口蹄疫O型PanAsia‑2谱系储备疫苗毒株及其构建方法和应用，属于兽药生物制品技术领域。口蹄疫重组病毒rHN/TUR09/VP1以O/HN/CHA/93病毒株为骨架，嵌合O/TUR/5/2009的VP1基因所得。rHN/TUR09/VP1不仅与遗传关系较近的口蹄疫O型PanAsia谱系和Ind‑2001谱系毒株的抗原高度匹配，而且与遗传关系较远的口蹄疫O型Cathay谱系和Mya‑98谱系毒株的抗原匹配，表明rHN/TUR09/VP1不仅能很好的免疫防控我国当前O型多谱系FMD病毒株的流行，而且可作为战略储备疫苗毒株用于我国边境地区O/Panasia‑2谱系口蹄疫的有效防控。
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公开(公告)号：CN114736989B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202210339139.3
申请日：2022-04-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物、方法及试剂盒。本发明涉及了用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物和探针组合，包含引物和探针组合反应体系的检测试剂盒及方法；该方法快速省时，最低检测PRRSV载量为50copies/μL，且与常见感染猪的病毒无交叉反应，特异性好；该方法与实时荧光RT‑PCR检测结果符合率为100%。结果表明：本研究建立的PRRSV实时荧光RPA检测方法具有特异性强、敏感性高，满足美洲型PRRSV的快速诊断和流行病学调查。
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公开(公告)号：CN113265006A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110598098.5
申请日：2021-05-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种用于捕获PRRSV核衣壳蛋白抗体的融合蛋白3AN及其应用，属于病毒检测技术领域。本发明提供了一种用于捕获猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白抗体的融合蛋白3AN，氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。试验表明以FMDV的3A表位单抗3A24作为包被抗体，捕获3AN融合蛋白后形成包被酶标板，以C8单抗作为检测抗体，采用竞争ELISA反应模式检测猪血清PRRSV抗体，制备的PRRSV抗体检测试剂盒，具有很好的敏感性和特异性，为PRRSV血清流行病学调查提供了一种新工具。
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公开(公告)号：CN112301042A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN202011215796.4
申请日：2020-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/41 , C12N15/63 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了A型塞内卡病毒SVA/HN/11/2017兰兽研全长感染性cDNA克隆及其构建方法及应用，属于病毒技术领域。本发明在对SVA/HN/11/2017兰兽研进行全基因组测定的基础上，在其基因组cDNA序列的5’端引入了T7启动子序列，在3’端引入Not I酶切位点序列，同时在2B基因处引入了Xho I酶切位点，消除了Xma I酶切位点，构建含SVA/HN/11/2017兰兽研全长cDNA的重组质粒。基于感染性cDNA克隆拯救得到的病毒在制备A型塞内卡病毒标记疫苗中的应用。本发明提供的感染性cDNA克隆及制备方法为深入开展SVA的基础和应用研究提供了有效的平台，具有重要的科学应用价值。
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公开(公告)号：CN109536461B
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN201811406871.8
申请日：2018-11-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C07K16/10 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种O型口蹄疫病毒突变株及其制备方法和应用，属于疫苗候选株技术领域。O型口蹄疫病毒突变株以rHN病毒株作为母本病毒株，将VP3蛋白的G–H环中以下氨基酸发生突变：第173位天冬氨酸突变为天冬酰胺，第174位缬氨酸突变为谷氨酸和第179位天冬酰胺突变为半胱氨酸。所述病毒突变株具有遗传稳定性且获得了小窝蛋白介导侵染CHO‑K1细胞的能力。通过检测免疫阳性血清的交叉中和能力，结果表明病毒突变株与母本病毒株相比，其诱导机体产生的口蹄疫病毒中和抗体的交叉保护能力有显著提升，表现出优异的抗原广谱性。所述病毒突变株经灭活制备的疫苗应可用于预防O型口蹄疫病毒的感染。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110372791A
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201910694345.4
申请日：2019-07-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种抗口蹄疫病毒猪源单链基因工程抗体的制备方法，属于抗体制备技术领域。从口蹄疫病毒抗原免疫猪体内分离PBMCs，使用染料标记FMDV 146S抗原，对PBMCs进行染色，借助多色流式细胞仪分选结合FMDV的单个B细胞；结合单细胞抗体基因测序，分别获得VH和VL基因，通过柔性linker及CHO-S表达工程抗体技术，表达获得FMDV特异性猪源单链基因工程抗体。本发明所述制备方法获得的抗体具有基因多样性好，效率高，全宿主(猪)来源，需要细胞量少等优势。
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公开(公告)号：CN118955701A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411125184.4
申请日：2024-08-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Inventor： 李坤 , 卢曾军 , 孙颖 , 樊惠英 , 李平花 , 曹轶梅 , 包慧芳 , 孙普 , 付元芳 , 袁红 , 白兴文 , 马雪青 , 赵志荀 , 张婧 , 王健 , 李冬 , 张强
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种识别口蹄疫病毒VP2蛋白C末端线性抗原表位的广谱单克隆抗体及其应用。本发明成功构建了单克隆抗体pOTB‑1，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.6，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.7。经间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验、Western‑blot验证抗体的生物活性。该株抗体展现了对O型和A型FMDV的广谱反应性，结合亲和力强。该株抗体识别位于结构蛋白VP2 C末端的连续线性B细胞表位。该表位序列在FMDV O型、A型和Asia1型间高度保守，说明在衣壳蛋白VP2存在型间通用的抗原位点。基于生物素化的pOTB‑1建立竞争性ELISA检测方法，为FMDV的防控及血清学检测提供工具，并为FMDV标记疫苗的设计及免疫效果评估奠定基础。
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公开(公告)号：CN118344474B
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202410667691.4
申请日：2024-05-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒O型、A型和Asia1型广谱中和性猪源单克隆抗体pOA‑6、pOA‑13和pOA‑20。pOA‑6重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示；pOA‑13的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示；pOA‑20的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。本发明首次获得3株自然宿主源O型、A型和Asia1型FMDV广谱中和抗体，并鉴定其识别的关键抗原位点，为FMDV抗体药物开发和血清学检测方法建立提供了有力工具。
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公开(公告)号：CN118615435A
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410078858.3
申请日：2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种猪源IL‑28B作为免疫增强剂在制备猪瘟E2亚单位疫苗中的应用。CSF亚单位疫苗是CSF疫苗中的一种，主要以E2蛋白为抗原制备而成。为了增强E2蛋白的免疫原性，本发明使用IL‑28B做为免疫增强剂，制备了一种新型猪瘟E2亚单位疫苗，利用CHO‑S细胞成功表达了CSFV E2蛋白和IL‑28B蛋白，表达的蛋白制备猪瘟E2亚单位疫苗。与E2蛋白相比，E2+IL‑28B混合蛋白免疫小鼠后能够诱导更高水平的CSFV抗体阻断率和病毒中和抗体效价。免疫试验结果表明IL‑28B能够增强CHO‑S细胞表达的E2蛋白的体液免疫和细胞免疫效果，本发明将为CSF的防控提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN118530369A
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202410078848.X
申请日：2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种猪瘟病毒E2‑IL28B融合蛋白及其作为抗原在制备猪瘟亚单位疫苗中的应用。猪瘟病毒E2‑IL28B融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明将E2蛋白与免疫增强剂IL‑28B蛋白融合，利用哺乳动物CHO‑S细胞表达E2‑IL28B融合蛋白，免疫小鼠后发现，E2‑IL28B融合蛋白的体液免疫和细胞免疫效果均优于E2蛋白，表明E2‑IL28B融合蛋白更适合作为CSF亚单位疫苗的有效抗原。本发明将为CSF新型疫苗的研发提供技术支撑。
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