一种共轭聚酮还原酶及其突变体、共表达工程菌及应用

    公开(公告)号:CN117070485A

    公开(公告)日:2023-11-17

    申请号:CN202311035098.X

    申请日:2023-08-17

    Abstract: 本发明提供了一种来源于Kazachstania barnettii的共轭聚酮还原酶及其突变体、编码基因,含有该酶或其突变体基因的重组载体以及共表达工程菌和应用。以该共轭聚酮还原酶或其突变体与葡萄糖脱氢酶共表达工程菌作为生物催化剂,催化KPL生成D‑泛解酸内酯。其中,共轭聚酮还原酶突变体KbCPRY29K/R65N/K215R的酶活较共轭聚酮还原酶KbCPR提高到了7.43倍,反应速度也进一步得到提升。该共表达工程菌表现出良好的催化稳定性、高催化活力等优点,有望成为生物法制备D‑泛解酸内酯的良好工业催化剂,并促进其合成工艺的升级。

    一种O-琥珀酰巯基裂解酶突变体、编码基因及应用

    公开(公告)号:CN115960878A

    公开(公告)日:2023-04-14

    申请号:CN202310061519.X

    申请日:2023-01-18

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种O‑琥珀酰巯基裂解酶突变体及其编码基因,以及在生物催化制备L‑蛋氨酸中的应用,所述突变体由SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第59位和/或第125位进行单点突变或多点突变获得。本发明的有益效果主要体现在:本发明提供了一种转化率高的OSHS突变体,以含OSHS突变体的重组菌的破碎粗酶液为催化剂,以O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸为底物,以甲硫醇钠为巯基供体,合成L‑蛋氨酸,工业成本较低;在最优体系下,对400~800mM底物的转化率达到80%~85%,与野生型的底物的转化率71%相比较,分别提高了13%~20%,且具备大规模应用的潜力,在L‑蛋氨酸的工业化生产中具有极高应用价值。

    一种重组脂肪酶突变体、基因、载体及其应用

    公开(公告)号:CN111518789B

    公开(公告)日:2022-03-18

    申请号:CN202010229741.2

    申请日:2020-03-27

    Abstract: 本发明公开了一种重组脂肪酶突变体、基因、载体、工程菌及其制备(2S,3R)‑N‑乙酰‑哌啶‑2,3‑二甲酸二甲酯的应用,所述脂肪酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第145位、154位、194位、195位进行单突变或者组合突变获得的。该突变体相比于野生型酶在转化上述反应时催化活力和底物耐受性大大提高,反应进程耗时明显缩短。相比于化学法制备(S,S)‑2,8‑二氮杂双环[4,3,0]壬烷,本发明提供的技术所得产品立体选择性高,反应条件更加温和,对环境友好,且对设备要求降低,大大减少了生产成本。

    一种重组脂肪酶突变体、编码基因、重组工程菌及应用

    公开(公告)号:CN110358751A

    公开(公告)日:2019-10-22

    申请号:CN201910605485.X

    申请日:2019-07-05

    Abstract: 本发明公开了一种重组脂肪酶突变体、基因、载体、工程菌及其应用,所述突变体是丝孢堆黑粉菌脂肪酶(Sporisoriumreilianum SRZ2lipase,SRL)出发经过突变得到的。本发明中,脂肪酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第145位、194位进行单突变或者组合突变获得的。该突变体相比于野生型酶在转化上述反应时催化活力和底物耐受性大大提高,反应进程耗时明显缩短。相比于化学法制备(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷,本发明提供的技术所得产品立体选择性高,反应条件更加温和,对设备要求低,降低了反应成本,且对环境友好。

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