一种在猪肌肉组织高效表达的融合启动子

    公开(公告)号:CN102453720A

    公开(公告)日:2012-05-16

    申请号:CN201010527097.3

    申请日:2010-10-28

    Inventor: 蒋思文 邓兵

    Abstract: 本发明属于动物基因工程应用领域。从大白猪中克隆了MSTN基因上游6个不同启动子缺失片段,它们分别为MSTN-P1、MSTN-P2、MSTN-P3、MSTN-P4、MSTN-P5、MSTN-P6。将这些片段构建至pGL3-Basic载体中后确定它们的活性,MSTN-P2活性相对较强,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。通过在该片段中加入SV40增强子片段,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:3所示,构建融合启动子载体pGL3-MSTNp2-EnhancerNX,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。通过转染肌源性细胞及非肌源性细胞发现该启动子片段的活性大大增强。本发明公开了该融合启动子的构建过程,从而为构建肌肉特异的转基因动物或诱导外源基因在肌肉组织中高效表达提供了新的遗传资源。

    猪miR-27a前体侧翼序列SNP作为猪产仔数性状的遗传标记及应用

    公开(公告)号:CN101818195A

    公开(公告)日:2010-09-01

    申请号:CN200910272588.5

    申请日:2009-11-02

    Abstract: 本发明属于猪遗传标记制备与应用技术领域,具体涉及一种猪miR-27a前体侧翼基因片段作为猪产仔数性状的遗传标记,其制备方法与应用。本发明获得了一种与猪产仔数性状相关的遗传标记,它包含猪miR-27a前体侧翼基因片段,它是序列表SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列;在序列表SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5序列的461bp处有一个C461-T461的碱基突变,该突变导致PCR-HpaII-RFLP多态性。设计了扩增miR-27a前体侧翼基因片段的引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示。本发明公开了该遗传标记的制备方法及其在猪标记辅助选择中的应用。

    Zfp217基因在制备治疗骨质疏松的药物中的应用

    公开(公告)号:CN117838861A

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202311601755.2

    申请日:2023-11-28

    Abstract: 本发明公开了Zfp217基因在制备治疗骨质疏松的药物中的应用,属于生物医药领域。本发明提供了抑制Zfp217基因表达的试剂在制备治疗骨质疏松的药物中的应用。所述抑制Zfp217基因表达的试剂包括抑制骨髓间充质干细胞中Zfp217基因表达的适配体。本发明首次通过试验证实了抑制Zfp217基因的表达,可以缓解因雌激素缺失或机械应力缺失造成的骨质流失。本发明还揭示了Zfp217负调控成骨细胞分化、正调控脂肪生成的作用部分通过与ERα竞争性结合Zfp521启动子,从而抑制Zfp521的表达,导致间充质干细胞向脂肪组织分化,最终减少骨形成,增加脂肪生成。本发明为治疗骨质疏松提供了新的机制和新的治疗靶点。

    一种仔猪福利木头气味固体凝胶剂的制备方法

    公开(公告)号:CN111919782A

    公开(公告)日:2020-11-13

    申请号:CN202010804543.4

    申请日:2020-08-11

    Abstract: 本发明公开了一种仔猪福利木头气味固体凝胶剂的制备方法,步骤是:A、在三口圆底烧瓶中将琼脂1.5克、自来水97ml、活化剂吐温-40 1.0ml混合搅拌,用微波炉加热至沸腾,加热温度控制在100℃以上,形成澄清透明的液体;B、加热之后放置室温条件下,冷却至60℃;C、将甲醛0.75ml、气味香精2.0ml加入步骤(1)中,用玻璃棒搅拌均匀,获得一种混合物;搅拌均匀后趁热,温度60℃倒入模具,放置室温,自然冷却,得到凝胶产品。方法易行,操作简便,增加仔猪福利玩具对于仔猪的吸引力,诱导仔猪对福利玩具进行咀嚼、啃咬和玩耍,增加仔猪探索行为,减少仔猪追赶、咬尾等异常行为,缓解仔猪断奶应激,增加福利水平。

    一种K88黏附素蛋白FaeG的可溶性表达重组菌及其发酵培养方法

    公开(公告)号:CN106119182A

    公开(公告)日:2016-11-16

    申请号:CN201610527504.8

    申请日:2016-07-06

    Abstract: 本发明公开了一种产肠毒素大肠杆菌K88黏附素蛋白FaeG的可溶性表达重组菌,先构建表达产肠毒素大肠杆菌K88黏附素FaeG基因的重组质粒pET28a–FaeG,然后将重组质粒pET28a–FaeG与分子伴侣GroEL/GroES载体质粒pGro7共转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,获得共表达黏附素FaeG基因和分子伴侣GroEL/GroES基因的重组菌,本发明还公开了该重组菌的高密度发酵培养方法。本发明所提供的重组菌具有较高的黏附素蛋白FaeG可溶性表达水平,包涵体表达量明显降低,能够获得较高纯度的免疫原,并且获得的蛋白与理论蛋白具有较高一致性。

    COX1基因作为猪妊娠期长短性状的遗传标记

    公开(公告)号:CN103789310B

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201410052408.3

    申请日:2014-02-15

    Abstract: 本发明属于分子标记制备技术领域,具体涉及一种与猪妊娠期长短性状相关的SNP遗传标记的制备与关联分析。从猪COX1基因中克隆获得一种作为遗传标记应用的猪妊娠期长短性状相关的基因片段,其核苷酸序列如图4所示,在图4所示序列的452bp处有一个等位基因突变(碱基替换),该突变导致Bg II-RFLP多态性。本发明还公开了制备猪妊娠期长短性状遗传标记的方法及其在猪妊娠期长短性状多态性检测中的应用。本发明的标记可应用于猪的标记辅助选择上。

    猪脂肪组织特异性表达基因plin启动子及应用

    公开(公告)号:CN103421780B

    公开(公告)日:2014-12-31

    申请号:CN201210229852.9

    申请日:2012-07-04

    Inventor: 蒋思文 高瑞娟

    Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域,具体涉及到猪的脂肪组织特异性表达基因plin不同长度启动子区域的分离鉴定和功能验证。从猪的基因组中克隆了脂肪组织特异性表达基因plin上游6个不同长度的启动子,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO:2-7所示;结果表明-130bp到-910bp和-435bp到-896bp有独立的启动活性。本发明同时公开了6个不同缺失启动子片段、相应重组表达载体的制备方法及双荧光素酶活性检测系统对启动子活性分析的应用。

    COX1基因作为猪妊娠期长短性状的遗传标记

    公开(公告)号:CN103789310A

    公开(公告)日:2014-05-14

    申请号:CN201410052408.3

    申请日:2014-02-15

    Abstract: 本发明属于分子标记制备技术领域,具体涉及一种与猪妊娠期长短性状相关的SNP遗传标记的制备与关联分析。从猪COX1基因中克隆获得一种作为遗传标记应用的猪妊娠期长短性状相关的基因片段,其核苷酸序列如图4所示,在图4所示序列的452bp处有一个等位基因突变(碱基替换),该突变导致Bg?II-RFLP多态性。本发明还公开了制备猪妊娠期长短性状遗传标记的方法及其在猪妊娠期长短性状多态性检测中的应用。本发明的标记可应用于猪的标记辅助选择上。

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