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公开(公告)号:CN102206611A
公开(公告)日:2011-10-05
申请号:CN201110107432.9
申请日:2011-04-27
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/0797
Abstract: 本发明公开了一种羊水源性神经干细胞的分离培养方法,首先分离到羊水细胞,然后再在羊水细胞中添加分离培养基,分离得到的神经干细胞生长形成神经球,将其消化分离为单细胞后进行传代培养。本发明提供的羊水源性神经干细胞的分离培养方法,开辟了分离培养神经干细胞的新途径,应用本发明方法从羊水中分离培养神经干细胞成功率高。所分离到的羊水源性神经干细胞在体外诱导后分化为星形胶质细胞和神经元细胞等功能细胞;所分离到的羊水源性神经干细胞具有可行性和有效性,具有自我更新、增殖和分化潜能。
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公开(公告)号:CN101591672A
公开(公告)日:2009-12-02
申请号:CN200910022664.7
申请日:2009-05-22
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种包含hBD3乳腺特异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞,包括一种hBD3乳腺特异性表达载体,包含目的基因hBD3,分别在hBD3基因的5′端和3′端插入调控元件;所述的hBD3乳腺特异性表达载体为pEBB表达载体。一种包含目的基因hBD3的牛胎儿成纤维细胞,其宿主细胞为牛胎儿成纤维细胞,通过转染外源性表达载体pEBB,将目的基因hBD3整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组。以包含目的基因hBD3的牛胎儿成纤维细胞作为核移植构建转基因克隆胚的核供体细胞,通过SCNT获得转基因克隆胚,将这些胚胎移入受体牛的子宫有望生产出转hBD3基因的奶牛。
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公开(公告)号:CN119876039A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510085252.7
申请日:2025-01-20
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/37 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法及其应用,属于乳腺上皮细胞系技术领域。本发明首次发现将绝缘子‑支架附着区外源性片段HS4‑SAR片段,与p‑Ef1a‑SV40LT‑Puro载体或pEF1a‑eGFP载体连接,转染商业化的永生化细胞系和原代细胞系,均可以显著提高乳腺上皮细胞系的传代次数,传代120代细胞形态仍然正常、未恶性转化、基因表达水平仍然未出现降低的现象,实现了永生化;建成的奶山羊乳腺上皮细胞系仍然具有合成和分泌蛋白的能力;提供的提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法,简单易操作,对永生化细胞系和原代细胞系均具有显著的效果,有望提高多种乳腺上皮细胞系的稳定传代的传代次数,降低相关研究的细胞成本。
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公开(公告)号:CN119331909A
公开(公告)日:2025-01-21
申请号:CN202411100396.7
申请日:2024-08-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了牛SP110基因剪接编辑在增强牛抗结核能力中的应用,属于牛抗结核病育种技术领域,本发明从剪接相关顺式作用元件入手,通过引入顺式作用元件调控牛SP110可变剪接反应,从而影响牛的抗结核能力。所述顺式作用元件序列命名为pre‑SAND‑exon序列,其位于人或马SP110基因的第12外显子及紧邻的5′端第12内含子,序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明首次通过向牛SP110基因中引入pre‑SAND‑exon序列,从而调控牛SP110基因的可变剪接,降低抗结核能力较低的剪接体bSP110c表达丰度,调控具有抗结核感染能力的bSP110a以及bSP110b剪接体丰度更高。提供的牛SP110基因剪接编辑可以有效提高牛的抗结核能力,可以用于抗结核牛的育种,有效简化选育方法、提高选育效率、节约选育成本。
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公开(公告)号:CN118703635A
公开(公告)日:2024-09-27
申请号:CN202410819603.8
申请日:2024-06-24
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种牛DDX58基因的单碱基突变在抗病毒感染中的应用,属于抗病毒感染防治技术领域。本发明提供的牛DDX58基因的单碱基突变可以显著影响RNA病毒的复制、IFNBI的表达,当DDX58蛋白的第858位氨基酸为天冬酰胺时,IFNBI的表达量显著提高,从而抑制RNA病毒的复制,提高抗病毒能力;该位点与抗RNA病毒感染能力高度连锁;提供的牛DDX58基因的单/碱基/氨基酸突变可以作为牛抗RNA病毒感染的连锁位点,用于抗病毒奶牛品种的基因型选育,进而简化选育方法、缩短培育时间。
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公开(公告)号:CN118497203A
公开(公告)日:2024-08-16
申请号:CN202410737289.9
申请日:2024-06-07
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了RNAmotif序列及其在提高先导编辑效率中的应用,属于基因编辑工具优化技术领域。本发明公开的RNAmotif序列,序列如下:CTTAGCCACTGCACCAGGGAATTCCCTGCCAGCGATTT。本发明的RNAmotif序列在不同细胞,不同位点以及不同的编辑类型,均有效地提高了先导编辑的效率,最高提高3.58倍;且序列较短,便于合成及连接。
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公开(公告)号:CN117568343A
公开(公告)日:2024-02-20
申请号:CN202311459090.6
申请日:2023-11-03
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/65
Abstract: 本发明公开了一种靶向编辑PRLR基因的sgRNA及其应用,属于动物基因工程技术领域。本发明公开的一种靶向编辑PRLR基因的sgRNA,包括PRLR sgRNA139、PRLR sgRNA188、PRLR sgRNA189。本发明提供的一种靶向编辑PRLR基因的sgRNA,为后续确定PRLR基因编辑效率较优的胞嘧啶碱基编辑系统和打靶位点,获得PRLR基因编辑抗热应激奶牛培育的体细胞核移植供体细胞以及牛体外受精显微注射胚胎奠定基础,最终为我国牛耐热品种选育提供技术支撑。
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公开(公告)号:CN111944745B
公开(公告)日:2023-12-19
申请号:CN202010858331.4
申请日:2020-08-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明公开了一种无血清的牛卵母细胞体外成熟培养液及卵母细胞培养方法,属于细胞培养技术领域。本发明公开的一种无血清的牛卵母细胞体外成熟培养液,包括无Hepes的M199基础培养液、无脂肪酸BSA、HMG、17β‑雌二醇、EGF、L‑cysteine、bFGF、100xGlutamax、叶酸、胆酸、CXCL12。本发明公开的牛卵母细胞体外成熟培养液在不使用血清的情况下培养牛卵母细胞,提高了牛卵母细胞的成熟率,并有效提高体外受精胚胎和体细胞核移植胚胎的早期胚胎发育率。
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公开(公告)号:CN111157710B
公开(公告)日:2021-12-31
申请号:CN202010047929.5
申请日:2020-01-16
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/48
Abstract: 本发明公开了一种挑选牛体外可移植胚胎的方法,属于家畜胚胎工程技术领域。本发明公开的一种挑选牛体外可移植胚胎的方法,从胚胎化学激活完毕或受精完毕开始计为第零天,在胚胎培养至第六天和第七天时进行挑选;挑选时第六天选择致密化桑葚胚及早期囊胚,挑选时第七天选择有腔囊胚及腔扩张囊胚。本发明公开的一种挑选牛体外可移植胚胎的方法,在进行体外胚胎移植之前进行挑选,能提高体外胚胎质量,从而保障移植后的怀孕率,以减少未怀孕牛的出现率并降低生产成本。
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