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公开(公告)号:CN102417912B
公开(公告)日:2013-05-22
申请号:CN201110307176.8
申请日:2011-10-11
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N15/35 , C12N15/861 , C12N7/01 , A61K48/00
Abstract: 本发明涉及猪细小病毒样颗粒B细胞表位插入位点的分子设计,属于基因工程疫苗领域。使用生物信息学软件对猪细小病毒(PPV)衣壳蛋白VP2结构建模,经三维结构分析确定VP24个突出的Loop结构所在区;首先在分子模拟和文献支持的基础上,我们推测loop 2,4区可作为外源表位基因插入位点。试验证明,分别缺失PPV VP2 Loop2(212aa~245aa),Loop4(413aa-424aa)内的相应基因,再用腺病毒表达系统表达,结果Loop2,4缺失突变重组病毒均能装配出规则的病毒样颗粒[PPV:ΔVLPs]。本发明还涉及该重组病毒表达外源基因的重组PPVΔVP2病毒样颗粒在疫苗免疫等方面的应用。
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公开(公告)号:CN101487011A
公开(公告)日:2009-07-22
申请号:CN200910025577.7
申请日:2009-02-10
Applicant: 江苏省农业科学院 , 中国人民解放军南京军区军事医学研究所
IPC: C12N15/40 , C07K14/08 , C12N15/63 , C12N15/66 , C12N1/21 , A61K39/12 , A61P31/14 , G01N33/531 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及模拟IBDV多表位基因的分子设计及其应用,属于生物制药领域。根据对免疫保护有效的抗原表位基序设计合成具有免疫保护功能的模拟IBDV多表位基因epis,运用基因工程技术构建重组表达质粒pET-epis,使epis基因在大肠杆菌中表达,然后以大肠杆菌表达的重组IBDV多表位蛋白rEPIS作为抗原,加上相应的佐剂制成IBDV表位基因工程疫苗,可用于预防控制传染性法氏囊病。在进行epis分子设计时,由于采用线性化序列模拟了IBDV空间构象依赖性表位基序,因此重组大肠杆菌表达的rEPIS制备工艺简单、成本低、生物安全性高。
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公开(公告)号:CN114805494B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202210496763.4
申请日:2022-05-09
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 一种鸡DEC‑205受体亲和肽DL及其制备方法和应用,涉及生物医药领域,该鸡DEC‑205受体亲和肽DL,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该鸡DEC‑205受体亲和肽DL能特异性结合鸡DEC‑205(CTLD‑4、CTLD‑5、CTLD‑6)重组蛋白,可与鸡骨髓源DCs细胞结合;该鸡DEC‑205受体亲和肽DL相对分子质量小,易于合成、表达和结构修饰;该鸡DEC‑205受体亲和肽DL,可与多种药物输送载体联合使用,可作为药物先导分子和基因导向载体,还可与疫苗联合使用,提高免疫效果,可为细胞特异性小分子治疗奠定基础,对家禽的新型DCs靶向性疫苗的研制与开发提供新思路。
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公开(公告)号:CN110777121B
公开(公告)日:2022-11-04
申请号:CN201911239891.5
申请日:2019-12-06
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , A61K39/395 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种能分泌高中活性抗犬瘟热病毒H蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞3B5株,属于生物技术领域。从建立的127株杂交瘤细胞库中筛选出一株具有较高中和活性的杂交瘤细胞株3B5,抗原表位在犬瘟热病毒的H蛋白第228~237位氨基酸。单克隆抗体3B5与单克隆抗体1D7和2G3组成的抗体组合治疗剂中和效价为213,比单独使用3B5、1D7、2G3的中和效价提高8‑32倍中和病毒能力,单克隆抗体组合治疗剂的临床应用试验结果比联合使用单克隆抗体1D7和2G3效果从98%提高到100%,治疗周期从4天缩短为2天。可用于犬瘟热(CD)发病动物的临床治疗,降低生产成本,提高治疗效果。
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公开(公告)号:CN111849923B
公开(公告)日:2022-10-14
申请号:CN202010750673.4
申请日:2020-07-30
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/20 , C12N15/45 , C07K16/10 , C07K14/13 , G01N33/569 , A61K39/175 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及分泌抗犬瘟热病毒H蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞2D12株,属于生物技术领域。单克隆抗体2D12与犬瘟热病毒(CDV)疫苗株发生特异性反应并具有病毒中和活性,与CDV野毒株不发生反应。用单克隆抗体2D12建立双抗体夹心ELISA方法鉴别检测CDV疫苗株或野毒株;用CDV疫苗株或野毒株的中和抗原表位建立间接ELISA方法鉴别检测CDV疫苗株或野毒株产生的抗血清;将CDV野毒株中和抗原表位与犬细小病毒VP2蛋白融合表达,免疫小鼠产生的抗血清可中和CDV野毒株和犬细小病毒,可用于疫苗制备。本发明单克隆抗体2D12、中和抗原表位为CDV野毒株与疫苗株的鉴别诊断试剂盒和犬瘟热病毒疫苗研制奠定基础。
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公开(公告)号:CN112553168B
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN202011534381.3
申请日:2020-12-23
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 分泌抗猫细小病毒VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞3A6株及其应用,属于生物领域,该杂交瘤细胞3A6株于2020年12月10日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:C2020248。该杂交瘤细胞3A6株既能与真核表达的VP2蛋白反应又能与猫细小病毒反应,生物学性能十分优良,制备的小鼠腹水单克隆抗体对病毒的中和效价高达5×108、对VP2蛋白的反应效价高达108,且对多种猫细小病毒毒株的中和能力相当,用于猫细小病毒感染发病猫的临床治疗,有效率达到100%。
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公开(公告)号:CN113005099A
公开(公告)日:2021-06-22
申请号:CN202110317145.4
申请日:2021-03-25
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 一种W蛋白沉默的重组新城疫病毒rVII‑NJ‑Wko株及其制备方法和应用,属于微生物领域,该重组新城疫病毒rVII‑NJ‑Wko株于2020年12月10日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:V202082。本发明通过新城疫病毒反向遗传操作技术和定点突变技术使该重组病毒无法表达W蛋白,拯救的重组新城疫病毒rVII‑NJ‑Wko株的MDT值为64.8h,ICPI值为1.72,EID50/ml值为8.00log10,HA效价为8log2。该重组新城疫病毒rVII‑NJ‑Wko株可用于深入研究新城疫病毒W蛋白的功能和新城疫病毒W蛋白的作用机制,还可作为潜在的分子标记疫苗侯选株。
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公开(公告)号:CN111849923A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010750673.4
申请日:2020-07-30
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/20 , C12N15/45 , C07K16/10 , C07K14/13 , G01N33/569 , A61K39/175 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及分泌抗犬瘟热病毒H蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞2D12株,属于生物技术领域。单克隆抗体2D12与犬瘟热病毒(CDV)疫苗株发生特异性反应并具有病毒中和活性,与CDV野毒株不发生反应。用单克隆抗体2D12建立双抗体夹心ELISA方法鉴别检测CDV疫苗株或野毒株;用CDV疫苗株或野毒株的中和抗原表位建立间接ELISA方法鉴别检测CDV疫苗株或野毒株产生的抗血清;将CDV野毒株中和抗原表位与犬细小病毒VP2蛋白融合表达,免疫小鼠产生的抗血清可中和CDV野毒株和犬细小病毒,可用于疫苗制备。本发明单克隆抗体2D12、中和抗原表位为CDV野毒株与疫苗株的鉴别诊断试剂盒和犬瘟热病毒疫苗研制奠定基础。
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公开(公告)号:CN110893234A
公开(公告)日:2020-03-20
申请号:CN201911242612.0
申请日:2019-12-06
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: A61K39/175 , A61K39/23 , A61K39/205 , A61K39/39 , A61P31/20 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种犬瘟热、犬细小病毒病、狂犬病三联亚单位疫苗,属于兽用生物制品领域。本发明的亚单位疫苗是以重组犬瘟热病毒H蛋白、重组犬细小病毒VP2蛋白以及重组狂犬病病毒G蛋白作为抗原,是通过三种重组杆状病毒分别感染昆虫细胞后,经提纯处理制备而成。所述的重组杆状病毒都携带有提高蛋白表达的元件,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1;重组犬瘟热病毒H蛋白、重组犬细小病毒VP2蛋白以及重组狂犬病病毒G蛋白都是经昆虫细胞密码子优化后的序列,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4。本发明制备的亚单位疫苗免疫犬后能够快速产生特异性抗体,可用于预防犬的犬瘟热病毒、犬细小病毒以及狂犬病病毒的感染。
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公开(公告)号:CN110456047A
公开(公告)日:2019-11-15
申请号:CN201910846665.7
申请日:2019-09-09
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: G01N33/558 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种传染性法氏囊病病毒抗体竞争ELISA检测方法及试剂盒,属于生物技术领域。将IBDV VP2基因优化设计,构建原核表达质粒pET28+VP2,转化大肠杆菌,重组VP2蛋白的分子量约为50kDa。用纯化的rVP2蛋白作为筛选抗原,筛选IBDV VP2单抗。用rVP2蛋白作为包被抗原,HRP-标记的其中一株VP2单抗为竞争抗体,建立了IBDV抗体竞争ELISA检测方法(rVP2-cELISA)。与现有的商品化的IBDV抗体检测试剂盒相比,本发明传染性法氏囊病病毒抗体竞争ELISA检测方法,耗时更短、特异性更好、检测样品范围更广、成本更低廉和生产更方便等优势,具有巨大的生产应用价值。
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