公开(公告)号：CN118773041A

公开(公告)日：2024-10-15

申请号：CN202410699499.3

申请日：2024-05-31

Applicant: 江南大学 ,  上海韬睿生物科技有限公司

Inventor： 刘涛 ,  王真真 ,  王康 ,  马旭东 ,  陆剑文 ,  彭思明 ,  谢楠 ,  钱建瑛 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  苏畅 ,  徐凌锋 ,  许正宏

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/52 ,  C12N5/0775 ,  A23J3/30 ,  A23J3/04 ,  A23L29/00 ,  A61K8/99 ,  A61K8/65 ,  A61Q19/00 ,  A61Q5/12 ,  A61K35/742 ,  A61K38/39 ,  A61P35/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株产胶原蛋白酶的球形赖氨酸芽孢杆菌及其在组织分离中的应用，属于生物技术领域。本发明针对现有技术的不足，提供了一株能够产胶原蛋白酶、降解胶原蛋白的菌株及其在细胞分离中的应用。该菌株属于Lysinibacillus菌属，能够分泌胶原蛋白酶，可用于脂肪组织分离和干细胞的获取。本发明提供的球形赖氨酸芽孢杆菌JN‑51，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.29954，所述球形赖氨酸芽孢杆菌JN‑51及其发酵液可在生物医药领域、食品加工领域、制革工业、药物传递、环境保护领域、化妆品领域、医疗治疗领域中水解蛋白的应用。

公开(公告)号：CN116004593B

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202211559294.2

申请日：2022-12-06

Applicant: 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 ,  江南大学

Inventor： 龚劲松 ,  陆震鸣 ,  汪子凯 ,  许正宏 ,  史劲松 ,  苏畅 ,  冯丹婷

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/40 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种半理性设计酶定向进化方法及其在腈水解酶分子改造中的应用，本发明应用ALF‑扫描对腈水解酶的活性口袋进行了几何重塑，以改变底物偏好性并提高催化效率。通过利用该方法结合定点饱和突变，成功获得了4个具有强芳香腈底物偏好性和高催化活性的突变体，分别为W170G，V198L，M197F和F202M。为了探究这4个突变的协同关系，又围绕这4个突变体构建了6个双组合突变体以及4个三组合突变体。通过组合突变，获得了协同增强突变体V198L/W170G，该突变体对芳香腈具有显著的底物偏好性，并且具有更好的催化效率。与野生型相比，其对4种芳香腈底物的比酶活分别提高了11.10、12.10、26.25和2.55倍。

公开(公告)号：CN117025432A

公开(公告)日：2023-11-10

申请号：CN202311030579.1

申请日：2023-08-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 史劲松 ,  张岳升 ,  龚劲松 ,  许正宏 ,  苏畅 ,  李恒 ,  江佳宇

IPC: C12N1/19 ,  C12N9/26 ,  C12N15/81 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种组成型表达人透明质酸酶的毕赤酵母及其应用。本发明在保持人透明质酸酶PH‑20核心功能序列的基础上，首先对其信号肽序列进行替换，使rhPH‑20分泌表达水平提升20％；进一步对共翻译内质网转运途径进行针对性强化，使分泌表达提升48％；之后，通过强化内质网未折叠蛋白响应使分泌表达进一步提升31％。最终，经5‑L发酵罐培养，三步改造后的重组菌OE54‑ScHAC1分泌表达rhPH‑20产量达到19.82U·mL‑1，相较出发总共提升约9.38倍，为目前酵母体系组成型表达最高水平。

公开(公告)号：CN111514860B

公开(公告)日：2022-12-30

申请号：CN202010388464.X

申请日：2020-05-09

Applicant: 江南大学

Inventor： 史劲松 ,  龚劲松 ,  苏畅 ,  许正宏 ,  蒋敏 ,  何纪萌

IPC: B01J20/24 ,  B01J20/28 ,  B01J20/30 ,  C02F1/28 ,  C02F101/30

Abstract: 本发明公开了一种羊毛废弃物的高效综合回收再利用方法，本发明采用谷胱甘肽处理废弃羊毛，使其暴露出多种活性基团，能够有效吸附印染废水中的阳离子染料；采用本发明方法制备得到的羊毛海绵吸附剂对羊毛印染废水中阳离子染料去除率最高可达99％，吸附量可达263.16mg/g，是一种优良的生物吸附剂；采用本发明方法制备得到的羊毛吸附剂可重复吸附、解吸循环8‑10次。本发明实现了羊毛纺织工业废弃物的充分回收再利用，将羊毛废弃物转化成印染废水吸附剂。操作条件温和，绿色环保，步骤简洁，能耗低，易于扩大化生产；本发明获得的羊毛残渣海绵具有疏松多孔的结构，表面富含多种活性基团，是一种性质优良、效果显著的生物吸附剂。

公开(公告)号：CN114774316B

公开(公告)日：2022-11-08

申请号：CN202210391317.7

申请日：2022-04-14

Applicant: 江南大学

Inventor： 龚劲松 ,  史劲松 ,  姚志远 ,  许正宏 ,  李恒 ,  苏畅

IPC: C12N1/20 ,  C12N13/00 ,  C12P19/26 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明公开了一株马链球菌兽疫亚种突变株及其应用，本发明的马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)SFPE‑A17，于2021年11月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号的，保藏编号为CGMCC No.23795。利用本发明的马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)SFPE‑A17在发酵透明质酸的过程中，菌株生长速度显著加快，菌株更早开始积累透明质酸，透明质酸的产量较原始菌株提高42.9％，能够显著地降低生产成本，所得透明质酸分子量降低一倍，分子量平均分布为0.54×106Da，在中低分子量透明质酸市场能够提高产业效率，具有重要的工业应用前景。

公开(公告)号：CN111763677A

公开(公告)日：2020-10-13

申请号：CN202010700360.8

申请日：2018-08-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 史劲松 ,  龚劲松 ,  陶丽妍 ,  许正宏 ,  苏畅

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12N9/50

Abstract: 本发明公开了一种角蛋白酶异源表达的启动子，属于工业生物技术领域。本发明成功构建了携带16种不同启动子序列的角蛋白酶重组菌，其中7种能够提高角蛋白酶表达量，PaprE启动子改造重组菌的酶活水平最高，达到2605U/mL，相比对照菌提高20倍。在5L发酵罐上发酵液中角蛋白酶活力高达7176U/mL，是目前文献报道重组角蛋白酶表达的最高水平，能更好地服务于实际应用。本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效策略。传统基因工程改造通常需构建高通量筛选方法，进行大量文库筛选，工作量大、周期长、成本高，该改造方法相比传统方法极大的减小了工作量，提高了高表达效率。

公开(公告)号：CN119955662A

公开(公告)日：2025-05-09

申请号：CN202510113005.3

申请日：2025-01-24

Applicant: 上海韬睿生物科技有限公司 ,  江南大学

Inventor： 钱建瑛 ,  王康 ,  王真真 ,  马旭东 ,  陆剑文 ,  彭思明 ,  谢楠 ,  龚劲松 ,  苏畅 ,  史劲松 ,  许正宏

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/56 ,  C12N9/54 ,  C12N5/071 ,  C12N5/00 ,  C12P1/04 ,  A23J3/34 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明涉及一株栗褐芽孢杆菌及其在组织分离中的应用，属于生物技术领域。本发明的栗褐芽孢杆菌(Bacillus badius)JN‑42，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.29953，保藏日期为2024年03月07日。本发明所述的栗褐芽孢杆菌具有胶原蛋白降解能力，所产出的胶原蛋白酶能够用于肠组织分离，进一步培养为肠上皮细胞。使用所产胶原酶进行消化分离，可获得细胞数1.11×105/mL，可对肠上皮细胞进行有效的分化，具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN118995554A

公开(公告)日：2024-11-22

申请号：CN202411257100.2

申请日：2024-09-09

Applicant: 江南大学

Inventor： 史劲松 ,  汪子凯 ,  龚劲松 ,  江佳宇 ,  陆震鸣 ,  许正宏 ,  苏畅 ,  李恒

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/67 ,  C12N15/70 ,  C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N15/56 ,  C12N9/78 ,  C12N9/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌整合表达体系及其在酶高效表达中的应用。本发明从3个方面系统地优化了大肠杆菌的整合表达系统。首先，从大肠杆菌基因组ORI区域的18个位点中筛选出表达活性最高的整合位点slmA；其次，鉴定了大肠杆菌中的16个内源启动子并将其与T7启动子相结合构建多启动子；随后，在底盘细胞水平上优化了T7RNA聚合酶的表达。得到的组成型高效整合表达体系与质粒型重组表达方式相比，GFP表达量提升至2倍左右。最后，将其应用于腈水解酶和透明质酸酶的整合表达，实现了稳定高效的酶表达，酶活与质粒水平相当。总之，本发明提供了一种稳定高效的基因表达方法，无需抗生素和诱导剂，使其成为合成生物学、酶工程和相关应用的有力工具。

公开(公告)号：CN117264048A

公开(公告)日：2023-12-22

申请号：CN202311143196.5

申请日：2023-09-05

Applicant: 江苏南农高科技股份有限公司 ,  江南大学

Inventor： 龚劲松 ,  陈金平 ,  许正宏 ,  高新乐 ,  史劲松 ,  周琳 ,  徐国强 ,  缪芬芳 ,  苏畅

IPC: C07K14/79 ,  C07K14/00 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62

Abstract: 本发明公开了一种嵌合抗原、嵌合抗原突变体及其设计方法和提高其可溶性和高滴度表达的方法，本发明针对副猪嗜血杆菌设计了一种嵌合抗原TbpAB01，通过构建转铁蛋白结合蛋白TbpA和猪转铁蛋白pTf的模型，先预测loop区域，然后通过构建磷脂模型，动力学分析筛选出结合紧密的loop区域，并将loop区域嫁接到转铁蛋白结合蛋白TbpB，从而制备得到以TbpB为支架，含有多个线性表位的免疫原性高的TbpAB01；本发明还提供了提高其可溶性和滴度的方法，将编码该嵌合抗原的基因和融合助溶标签与分子伴侣共表达，显著提升了嵌合抗原的可溶性蛋白滴度和可溶性比例；本嵌合抗原最高可溶性蛋白产量达5.16g/L。

公开(公告)号：CN116286764B

公开(公告)日：2023-12-08

申请号：CN202310217653.4

申请日：2023-03-08

Applicant: 江南大学 ,  山东焦点福瑞达生物股份有限公司

Inventor： 龚劲松 ,  张岳升 ,  史劲松 ,  许正宏 ,  李恒 ,  苏畅 ,  江佳宇 ,  廉少杰 ,  康传利 ,  刘磊 ,  郑德强

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种透明质酸裂解酶及其重组菌与应用。本发明提供了一种来源于弗氏柠檬酸杆菌的透明质酸裂解酶，克隆了其编码基因并在大肠杆菌体系实现了重组表达，经过启动子优4化后酶活为2.64×10 U/mL，蛋白分子量为87kDa。酶学性质表征实验表明其为内切酶，能够在pH 5‑8范围内发挥透明质酸降解作用，最适反应pH为5.5，最适反应温度为37℃。该酶具有良好的热稳定性，pH稳定性与耐盐性，可以耐受1.5M的氯化钠溶液。该酶对透明质酸有着较高的底物特异性。本发明利用优化的培养基，在5‑L发酵罐中，重组菌产透明质酸裂解酶的最高活性在14h6可达2.65×10U/mL。