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公开(公告)号:CN101608178B
公开(公告)日:2011-05-18
申请号:CN200910090166.6
申请日:2009-07-29
Applicant: 清华大学
CPC classification number: C12N9/88 , C08B37/0075
Abstract: 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白:a)序列表中序列1的第8-1015所示的氨基酸序列组成的蛋白质;b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。本发明产生的三重融合蛋白的酶活通过摇瓶培养可达1214.4IU/L培养基,比酶活可达2.839IU/mg蛋白。本发明可以利用GFP蛋白实现菌体浓度和酶活的快速在线检测。
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公开(公告)号:CN101701212B
公开(公告)日:2011-05-11
申请号:CN200910237616.X
申请日:2009-11-13
Applicant: 清华大学 , 北京思清源生物科技有限公司
IPC: C12N9/20
Abstract: 利用大气压放电的冷等离子体发生器提高酶的活性的方法,属于冷等离子体技术应用领域,其特征在于,依次含有以下步骤:制备酶溶液、选择大气压放电的冷等离子体发生器的种类并设定工作参数,用大气压放电的冷等离子体处理所述酶溶液。本发明具有高效、方便改变酶的活性的优点。
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公开(公告)号:CN101659698A
公开(公告)日:2010-03-03
申请号:CN200810118914.2
申请日:2008-08-26
Applicant: 清华大学
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/63 , C12N15/11 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12P17/16 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种紫色杆菌素合成相关蛋白质系统及其编码基因簇与应用。紫色杆菌素合成相关蛋白质系统,是由如下1)至5)中五种蛋白质组成的:1)其氨基酸序列为序列表中的序列2;2)其氨基酸序列为序列表中的序列3;3)其氨基酸序列为序列表中的序列4;4)其氨基酸序列为序列表中的序列5;5)其氨基酸序列为序列表中的序列6。编码所述蛋白系统的基因簇的核苷酸序列是序列表中序列1。本发明的紫色杆菌素合成相关基因簇为构建高效基因工程菌生产紫色杆菌素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN101591633A
公开(公告)日:2009-12-02
申请号:CN200810113259.1
申请日:2008-05-28
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种用于培养微生物表达肝素酶的培养基。该培养基,是含有5-20g/L酵母提取物,0.5-20g/L葡萄糖,0.05mM-5.0mM钙离子的培养基。所述培养基中还含有10.0-25.0g/L Na2HPO4·12H2O,1.0-5.0g/L KH2PO4,0.1-1.0g/LNaCl;0.5-5.0g/L NH4Cl。重组肝素酶能够在上述培养基中高量表达,最高的肝素酶酶活达20652.63IU/L发酵液,远远高于普通的LB培养基的表达效果。该培养基大大地降低了肝素酶的生产成本,对于肝素酶的应用,尤其是酶法制备低分子量肝素具有极其显著的经济意义。
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公开(公告)号:CN101565230A
公开(公告)日:2009-10-28
申请号:CN200810104836.0
申请日:2008-04-24
Applicant: 清华大学
IPC: C02F3/12
CPC classification number: Y02W10/15
Abstract: 本发明提供了一种微米气泡的发生装置及其专用旋流器。旋流器包括一个中空的通腔体,由圆柱型腔体和位于其上的圆台型腔体组成;圆台型腔体的高、上底面内直径、下底面内直径和圆柱型腔体的高的比例为1∶(0.2-0.4)∶(0.8-1.1)∶(0.28-2.2);圆柱型空腔体侧面设有至少一对通孔;圆柱型空腔体下底面设有通孔(23),圆台型空腔体上底面设有通孔(24)。本发明提供的微米气泡发生装置,由所述的旋流器(2)和水泵(3)通过管路连接而成。本发明装置产生的微米气泡的粒径小于50微米,溶解氧浓度可达超饱和状态,显著提高充氧能力和氧转移效率,在污水处理、河道湖泊污染治理及水产养殖中有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN101549936A
公开(公告)日:2009-10-07
申请号:CN200910083386.6
申请日:2009-05-04
Applicant: 清华大学 , 北京思清源生物科技有限公司
CPC classification number: Y02W30/47
Abstract: 本发明属于水处理技术领域的一种利用白腐真菌和载体处理难降解废水的方法。先利用载体吸附废水中的COD,后利用载体给白腐真菌提供纤维素刺激性底物诱发其产酶,处理载体吸附的难降解物质,选用不同天然物作为载体的核心材料,经NaOH处理后制成载体包被,处理废水时,调节废水的初始pH、投加载体、加入白腐真菌、取水样到锥形瓶中;置入温度35-60℃、摇速170rpm摇床进行处理。本发明处理过程仅需调节初始pH,中间过程不用操作,无需再次调节即可进行后续处理;且所用的载体来源广泛,使用后可连同菌体直接做肥料处理,不产生二次污染;处理后脱色效果明显,脱色率90%以上。
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公开(公告)号:CN101392233A
公开(公告)日:2009-03-25
申请号:CN200810225730.6
申请日:2008-11-10
Applicant: 清华大学
IPC: C12N1/21 , C12N1/19 , C12N15/53 , C12N15/63 , C12N9/02 , C12R1/01 , C12R1/40 , C12R1/38 , C12R1/385 , C12R1/84 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种表达颗粒状甲烷单加氧酶的方法及其专用工程菌。该方法,是诱导表达具有颗粒状甲烷单加氧酶表达活性的工程菌,得到含有颗粒状甲烷单加氧酶的发酵菌液。该工程菌,是将可表达颗粒状甲烷单加氧酶的重组表达载体导入宿主菌中,筛选得到的可表达颗粒状甲烷单加氧酶的重组菌株。所述重组表达载体为含有单加氧酶的启动子及其下游连接的颗粒状甲烷单加氧酶的编码基因的可在宿主菌中表达的载体。本发明的工程菌可高效表达颗粒状甲烷单加氧酶,可用于沼气转化为甲醇,将丙烯氧化成1,2-环氧丙烷等的催化反应。
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公开(公告)号:CN101294177A
公开(公告)日:2008-10-29
申请号:CN200810112768.2
申请日:2008-05-26
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种制备低分子量肝素的方法。该方法,是以肝素为底物,用麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白降解肝素,得到低分子量肝素;所述麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白,是具有序列表中的SEQ ID №:1的氨基酸残基序列的蛋白质。本发明的方法采用具有较高酶活的麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白制备肝素,通过控制降解反应中的不同吸光度A235时终止反应,得到具有理想平均分子量和分子量分布较窄的,活性较高的低分子量肝素寡糖。
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公开(公告)号:CN100347285C
公开(公告)日:2007-11-07
申请号:CN200510130676.3
申请日:2005-12-21
Applicant: 中国石油化工股份有限公司 , 清华大学
Abstract: 一种用于石油污染物降解的液体微生物制剂,属于石油污染土壤的生物修复技术。本发明的技术特征是将具有石油烃降解能力的真菌和细菌分别通过液体培养后按照一定比例混合制成液体微生物制剂,采用本发明提供的微生物制剂具有在土壤中活性高、迁移迅速、能够与污染物充分接触并能够协同降解石油烃污染物的优点。在石油污染土壤的生物修复技术领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN100344769C
公开(公告)日:2007-10-24
申请号:CN200510088970.2
申请日:2005-08-04
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种制备低分子量肝素的方法。本发明的制备低分子量肝素的方法,是以肝素为底物,用麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白降解肝素,得到低分子量肝素;所述麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白,是具有序列表中的SEQ ID №:1的氨基酸残基序列的蛋白质。本发明的方法采用具有较高酶活的麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白制备肝素,通过控制降解时间,得到具有理想平均分子量和分子量分布较窄的低分子量肝素寡糖。本发明为低分子量肝素的酶法工业化生产提供了新的途径。
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