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公开(公告)号:CN100355893C
公开(公告)日:2007-12-19
申请号:CN200510090872.2
申请日:2005-08-18
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种表达肝素酶的方法及其专用表达载体。本发明所提供的肝素酶表达载体,是在多克隆位点插入有由肝素酶和绿色荧光蛋白构成的融合蛋白的编码基因的大肠杆菌表达载体。本发明的肝素酶表达载体能够可溶表达和正确折叠,防止包涵体形成,并能快速定量菌体浓度和肝素酶酶活。本发明表达肝素酶的方法实现了高效可溶表达由肝素酶和绿色荧光蛋白构成的融合蛋白,肝素酶I的表达量高达350IU/l培养基,该表达方法并能利用荧光测量对工程菌浓度及肝素酶I酶活进行快速定量追踪,有利于肝素酶I生产过程的优化和控制,有利于肝素酶的保存和应用过程的快速评价,有利于解析大分子肝素的结构和降解机理。
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公开(公告)号:CN1757739A
公开(公告)日:2006-04-12
申请号:CN200510090872.2
申请日:2005-08-18
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种表达肝素酶的方法及其专用表达载体。本发明所提供的肝素酶表达载体,是在多克隆位点插入有由肝素酶和绿色荧光蛋白构成的融合蛋白的编码基因的原核细胞表达载体。本发明的肝素酶表达载体能够可溶表达和正确折叠,防止包涵体形成,并能快速定量菌体浓度和肝素酶酶活。本发明表达肝素酶的方法实现了高效可溶表达由肝素酶和绿色荧光蛋白构成的融合蛋白(GFP-hepA),肝素酶I的表达量高达350IU/L培养基,该表达方法并能利用荧光测量对工程菌浓度及肝素酶I酶活进行快速定量追踪,有利于肝素酶I生产过程的优化和控制,有利于肝素酶的保存和应用过程的快速评价,有利于解析大分子肝素的结构和降解机理。
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公开(公告)号:CN1702174A
公开(公告)日:2005-11-30
申请号:CN200510068343.2
申请日:2005-05-08
Applicant: 清华大学
IPC: C12P19/60
Abstract: 本发明公开了一种提高黄酮苷元极性的方法,是将黄酮苷元、转苷酶和糖基底物在浓度为0%-90%的乙醇水溶液中进行反应。所述黄酮苷元与乙醇水溶液的重量体积比为0.03-0.07克/100毫升。所述反应温度为20-90℃,反应时间为1-30小时。本发明可显著提高槲皮素和山萘酚等黄酮苷元的水溶性,使其在工业生产中易被水或乙醇等极性溶剂溶解,作为医药产品的槲皮素苷和山萘酚苷与槲皮素、山萘酚相比,更易被机体利用;还可提高天然产物中黄酮类物质的提取率,从而降低其提取过程中的乙醇用量;此外,本发明还提高了总黄酮及纯黄酮制品的可加工性,同时可扩大其实际应用范围。
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公开(公告)号:CN1597545A
公开(公告)日:2005-03-23
申请号:CN200410009462.6
申请日:2004-08-20
Applicant: 清华大学
Abstract: 一种含磷废水处理方法及其回收磷产物的应用,属于环境保护中污水处理领域。本发明以铁盐为絮凝剂,季铵盐单宁酸为助凝剂,两者协同作用,不仅可以有效去除废水或处理水中的含磷化合物,降低排放水的富营养化因子,同时季铵盐单宁酸的加入可降低水的浊度及残存铁含量,提高处理水的质量;并可加速絮凝速率,缩短絮凝时间。得到的含磷絮凝物可用于农业用缓释磷肥,有效增加磷的释放效果。本发明工艺简单,在有效去除废水或处理水中磷的同时,实现磷的回收,及其资源化利用,可产生良好的环境、经济和社会效益。
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公开(公告)号:CN100494353C
公开(公告)日:2009-06-03
申请号:CN200610072936.0
申请日:2006-04-06
Applicant: 清华大学
IPC: C12N1/26
Abstract: 本发明公开了一种甲烷氧化混合菌的培养方法。该方法是在甲烷氧化混合菌常规培养方法的基础上,在培养基中添加石蜡油。在用本发明的方法对甲烷氧化混合菌进行振荡培养过程中,石蜡油受到机械力的作用形成微小的分散液滴,这些液滴可以提高甲烷的溶解度,而且由于其与菌体细胞的亲和性,细胞可以在水相和有机相之间穿梭,强化了微生物利用甲烷的速度。与常规培养方法相比,本发明方法可以极大程度的提高甲烷氧化混合菌的生长速度和细胞密度,且培养方法简单,具有较高的工业化应用可行性。基于上述优点,本发明将在甲烷氧化菌及其相关产品的工业化生产中发挥巨大作用,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN101050439A
公开(公告)日:2007-10-10
申请号:CN200710064364.6
申请日:2007-03-13
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种生产1,2-环氧丙烷的方法及其专用混合菌群。该方法,是将含有发孢甲基弯曲菌的混合菌群MY9 CGMCC №.1893菌体悬于反应液中,在密闭的甲烷与丙烯的混合气体环境中,振荡反应得到1,2-环氧丙烷。本发明的方法,催化氧化丙烯合成1,2-环氧丙烷工艺简单,合成的1,2-环氧丙烷浓度高达0.85mM/OD600,生产效率高;本发明的含有发孢甲基弯曲菌的混合菌群MY9 CGMCC №.1893不仅菌群结构稳定,较纯甲烷氧化菌生长速度快,培养容易,而且酶催化效率高,具有工业应用前景。
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公开(公告)号:CN1763178A
公开(公告)日:2006-04-26
申请号:CN200510098409.2
申请日:2005-09-06
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种具有甲烷单加氧酶活性的重组菌及其应用。本发明所提供的具有颗粒状甲烷单加氧酶活性的重组菌,是将由颗粒状甲烷单加氧酶的编码基因及脱硫基因的启动子序列组成的融合基因导入红球菌,筛选得到表达颗粒状甲烷单加氧酶的菌株即为具有颗粒状甲烷单加氧酶活性的重组菌;所述脱硫基因的启动子序列位于所述颗粒状甲烷单加氧酶的编码基因的上游。该重组菌彻底避开甲醇脱氢酶基因的影响,使甲烷氧化停留在甲醇这一步反应,克服了野生型甲烷氧化菌的缺陷,更易培养。该重组菌能将天然气的烷烃液化成为相应的醇类,能将沼气转化为甲醇,能将丙烯氧化成1,2-环氧丙烷。
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公开(公告)号:CN1712418A
公开(公告)日:2005-12-28
申请号:CN200510088970.2
申请日:2005-08-04
Applicant: 清华大学
IPC: C08B37/10
Abstract: 本发明公开了一种制备低分子量肝素的方法。本发明的制备低分子量肝素的方法,是以肝素为底物,用麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白降解肝素,得到低分子量肝素;所述麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白,是具有序列表中的SEQ ID №:1的氨基酸残基序列的蛋白质。本发明的方法采用具有较高酶活的麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白制备肝素,通过控制降解时间,得到具有理想平均分子量和分子量分布较窄的低分子量肝素寡糖。本发明为低分子量肝素的酶法工业化生产提供了新的途径。
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公开(公告)号:CN101928731A
公开(公告)日:2010-12-29
申请号:CN201010034432.6
申请日:2010-01-19
Abstract: 本发明公开了一种甲烷生物转化生产甲醇的方法。该方法是以甲烷氧化菌作为生物催化剂,将含甲烷的气体和含氧气的气体分别通过透气膜通入含所述甲烷氧化菌和磷酸盐的溶液中进行反应,得到高浓度的甲醇溶液。本发明以高浓度磷酸盐作为甲醇脱氢酶抑制剂,抑制甲烷的进一步氧化,实现甲烷生物转化生产甲醇;通过以高细胞浓度甲烷氧化菌作为生物催化剂,实现高浓度甲醇生产;通过无泡膜曝气方式,既避免甲烷和氧气混合可能产生的不安全隐患,同时又强化甲烷和氧气的气液传质过程。采用本发明的方法可安全、高效的得到高浓度甲醇溶液,为甲烷生物转化生产甲醇的工业化提供可靠的技术。
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公开(公告)号:CN1834232A
公开(公告)日:2006-09-20
申请号:CN200610072936.0
申请日:2006-04-06
Applicant: 清华大学
IPC: C12N1/26
Abstract: 本发明公开了一种甲烷氧化混合菌的培养方法。该方法是在甲烷氧化混合菌常规培养方法的基础上,在培养基中添加石蜡油。在用本发明的方法对甲烷氧化混合菌进行振荡培养过程中,石蜡油受到机械力的作用形成微小的分散液滴,这些液滴可以提高甲烷的溶解度,而且由于其与菌体细胞的亲和性,细胞可以在水相和有机相之间穿梭,强化了微生物利用甲烷的速度。与常规培养方法相比,本发明方法可以极大程度的提高甲烷氧化混合菌的生长速度和细胞密度,且培养方法简单,具有较高的工业化应用可行性。基于上述优点,本发明将在甲烷氧化菌及其相关产品的工业化生产中发挥巨大作用,应用前景广阔。
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