一种具有群体淬灭活性的枯草芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法、应用

    公开(公告)号:CN113416682A

    公开(公告)日:2021-09-21

    申请号:CN202110523054.6

    申请日:2021-05-13

    Abstract: 本发明涉及生物技术和基因工程技术领域,尤其涉及一种具有群体淬灭活性的枯草芽孢杆菌基因工程菌及其应用,所述构建方法为将酰基高丝氨酸内酯酶编码基因克隆到枯草芽孢杆菌表达载体上,去掉载体上调控蛋白编码基因lacI,再转入枯草芽孢杆菌,得到具有群体淬灭活性的枯草芽孢杆菌基因工程菌。本发明所构建的表达AHL内酯酶的重组枯草芽孢杆菌,不需要额外添加诱导剂就能持续性表达高活性的群体感应淬灭酶AhlX,所用的宿主为环境友好型的枯草芽孢杆菌,在防治植物细菌性病害方面有着天然的优势,与化学农药相比无污染,无毒害,无残留,对环境无伤害,是一个绿色防控措施,在防治细菌性病害方面具有很大的潜力。

    一种L-天冬氨酸-α-脱羧酶及其应用

    公开(公告)号:CN112779243A

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN201911088195.9

    申请日:2019-11-08

    Abstract: 本发明涉及生物工程领域,尤其涉及一种L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶,其氨基酸序列以及基因序列如序列表中SEQ ID NO.1,SEQ ID NO.2以及SEQ ID NO.3所示。其根据桃蚜(Myzus persicae)基因组中编码半胱氨酸亚磺酸脱羧酶的基因序列,进行密码子优化后,体外合成该基因。克隆到表达载体,转入大肠杆菌构建成高表达工程菌。将该工程菌培养诱导后,检测发现该酶具有L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶活性,该酶在合适条件下能将L‑天冬氨酸转化为β‑丙氨酸,克服了现有技术中的原核来源的L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶易失活的缺陷,因而可在酶用量较小以及较低成本的条件下用于β‑丙氨酸的工业化生产。

    一种金黄霉素A的规模化制备方法

    公开(公告)号:CN112574185A

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN202011069587.3

    申请日:2020-09-30

    Abstract: 本发明属于分离提纯领域,具体涉及一种金黄霉素A的规模化分离纯化方法。所述分离纯化方法是将金黄霉素发酵液板框过滤后烘干得到干菌渣,粉碎后用有机溶剂超声提取,提取液浓干后加入溶剂清洗水溶性杂质,再加入二氯甲烷萃取,二氯甲烷萃取液脱色后抽滤,滤液浓干得金黄霉素A粗品,将其加入溶剂溶解后上制备色谱分离得到金黄霉素A纯品。所述方法操作简单,有机溶剂用量很少,避免了因使用大孔树脂、硅胶或有机溶剂结晶而产生大量废水和有机溶剂,且最终金黄霉素A的收率达到95%以上,获得的金黄霉素A纯品中金黄霉素A的含量在96%以上,纯度在98%以上,更适合规模化生产,成本低,效益高。

    一种丙酮酸和左旋多巴联产工艺与应用

    公开(公告)号:CN110055292A

    公开(公告)日:2019-07-26

    申请号:CN201810907765.1

    申请日:2018-08-10

    Abstract: 本发明涉及一种丙酮酸和左旋多巴联产工艺与应用。采取如下的技术方案:(1)利用光滑球拟酵母发酵获得丙酮酸料液,料液经过陶瓷膜除菌,超滤膜除蛋白、核酸、色素等大分子;(2)根据丙酮酸的摩尔量向丙酮酸浓缩液加入一定量的邻苯二酚、醋酸铵、EDTA、亚硫酸钠等化合物,调pH7.0-9.0,配制成酶催化底物溶液;(3)利用酪氨酸酚裂解酶基因工程菌发酵获得酪氨酸酚裂解酶菌液,离心收菌体,高压均质机破胞,离心,收集酶液;(4)酶液加入一定量的底物溶液,搅匀,25℃,密封震荡反应;所述底物溶液为丙酮酸浓缩液配制,通过流加底物溶液控制邻苯二酚的浓度0-10g/L,产物达到120g/L以上,停止流加底物溶液,当反应液中邻苯二酚含量低于0.2g/L,停止反应。

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