公开(公告)号：CN105603015A

公开(公告)日：2016-05-25

申请号：CN201610045121.7

申请日：2016-01-22

申请人： 浙江大学

发明人： 杨立荣 ,  周海胜 ,  蒙丽钧 ,  刘善和 ,  韦永飞 ,  谷顺明 ,  袁晓路 ,  方红新 ,  刘亚运 ,  徐刚 ,  吴坚平

IPC分类号： C12P13/04 ,  C12N9/10 ,  C12R1/19

CPC分类号： C12P13/04 ,  C12N9/1096 ,  C12Y206/01002

摘要： 本发明公开了一种L-草铵膦的生产方法，该方法包括：以2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸及其盐为底物，在氨基供体存在的条件下，利用离体的转氨酶或体外表达转氨酶的细胞催化底物与氨基供体发生转氨反应，得到L-草铵膦；所述氨基供体为丙氨酸，所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1～3所示。本发明以2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸及其盐为底物，丙氨酸为氨基供体，通过特定的转氨酶催化底物发生转氨反应，能够将底物完全转化成为L-草铵膦，原料转化率高，转化率可达100％。

公开(公告)号：CN102051365B

公开(公告)日：2012-07-25

申请号：CN201010536832.7

申请日：2010-11-09

申请人： 浙江大学

发明人： 吴坚平 ,  常晓婷 ,  林春娇 ,  徐刚 ,  杨立荣

IPC分类号： C12N15/52 ,  C12N1/21 ,  C12N9/00 ,  C12P7/42 ,  C12R1/07

摘要： 本发明公开一种β-脱卤酶的基因及制备3-羟基丙酸的方法。其β-脱卤酶的基因具有如SEQ No.1所示序列；保藏号为CGMCC No.4196的芽孢杆菌含具有如SEQ No.1所示序列的基因；其β-脱卤酶由具有如SEQ No.1所示序列的基因所编码。本发明制备3-羟基丙酸的方法包括以下步骤：(1)将芽孢杆菌的具有如SEQ No.1所示序列的基因通过质粒导入宿主细胞，得到重组细胞；(2)将重组细胞加入到离子缓冲溶液中破胞，离心得到上清液，将上清液经镍离子亲和层析柱和脱盐柱纯化得到纯酶液；(3)将3-氯丙酸溶液加入到纯酶液中进行反应得到3-羟基丙酸，3-氯丙酸相对于3-氯丙酸溶液和纯酶液总量的摩尔浓度为10～50mmol/L。本发明可得单一产物，转化率高，以10mmol/L3-氯丙酸为底物，反应24h后转化率可达98％。

公开(公告)号：CN102154431A

公开(公告)日：2011-08-17

申请号：CN201010606378.8

申请日：2010-12-27

申请人： 浙江大学

发明人： 徐刚 ,  陈永军 ,  吴坚平 ,  杨立荣

IPC分类号： C12P41/00

摘要： 本发明公开了一种仲醇的动力学拆分方法。它的步骤如下：1)加入摩尔比为1:1～2:1～2:0.03～0.05的对氯苯酚、有机酸、二环己基碳二亚胺和4-二甲氨基吡啶，搅拌反应3～7小时，过滤，滤液干澡，浓缩，过柱，得到纯酯作为酰基供体备用；2)在2～6mL的有机溶剂中加入摩尔比为1：0.5～3的仲醇和酰基供体，5～20mg/mL脂肪酶，反应0.5～3小时，反应温度为30～60℃，得到转化率为50%，e.e值>99%的酯。本发明中，在极短的时间内，仲醇的转化率达到50%，所得酯的e.e值达到近100%，极大的提高了产品的性能，可以满足对纯度的各种要求，具有极大的应用价值。

公开(公告)号：CN102031237A

公开(公告)日：2011-04-27

申请号：CN201010545493.9

申请日：2010-11-12

申请人： 浙江大学

发明人： 李牧 ,  杨立荣 ,  吴坚平

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12P41/00 ,  C12P7/02 ,  C12R1/01

摘要： 本发明公开一种寡养单胞菌及其制备l-薄荷醇的方法和应用。其寡养单胞菌可用于作为通过分离薄荷醇异构体混合物来制备l-薄荷醇的催化剂。制备l-薄荷醇的方法包括如下步骤：(1)将寡养单胞菌加到培养基中发酵培养；(2)将发酵液处理，制备得到固体催化剂；(3)将固体催化剂和底物加到有机溶剂中进行转化反应，得到转化液，底物包括薄荷醇异构体混合物和酰化剂；薄荷醇异构体混合物含有l-薄荷醇，且含有l-异薄荷醇、l-新异薄荷醇、l-新薄荷醇、d-薄荷醇、d-异薄荷醇、d-新异薄荷醇、d-新薄荷醇中的任一种或任几种；(4)将转化液处理以除去有机溶剂和未反应的底物，得到l-薄荷醇的酯化物；(5)将l-薄荷醇的酯化物水解，收集得到l-薄荷醇。

公开(公告)号：CN102000516A

公开(公告)日：2011-04-06

申请号：CN201010298664.2

申请日：2010-09-30

申请人： 浙江大学

发明人： 陈雄 ,  吴坚平 ,  张林 ,  杨立荣

IPC分类号： B01D71/70 ,  B01D67/00 ,  B01D69/08 ,  B01D69/10

摘要： 本发明公开一种PDMS/PVDF复合中空纤维膜的制备方法，其步骤为：(1)将聚二甲基硅氧烷溶于正己烷中，后加入交联剂混合搅拌0.5～2小时，再加入催化剂，后补充加入正己烷至混合液中聚二甲基硅氧烷的质量百分比浓度为5～30％，室温搅拌8～16小时，离心、脱泡制成制膜液；所述交联剂为正硅酸乙酯，交联剂与聚二甲基硅氧烷的质量比为0.06～0.1∶1；催化剂为二月桂酸二丁基锡，催化剂与聚二甲基硅氧烷的质量比为0.01～0.05∶1；(2)将已晾干的中性聚偏氟乙烯中空纤维基膜浸入制膜液中2～3秒，后取出在室温下晾干，重复上述浸膜、晾干操作2～3次，后在30～110℃下真空干燥至完全交联。本发明工艺简单，所得中空纤维膜对低浓度的酮/丁醇/乙醇溶液有较好分离效果。

公开(公告)号：CN101985609A

公开(公告)日：2011-03-16

申请号：CN201010520179.5

申请日：2010-10-26

申请人： 浙江大学

发明人： 吴薇 ,  杨立荣 ,  吴坚平

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12P41/00 ,  C12R1/38

摘要： 本发明公开一种假单胞菌及用其对普瑞巴林中间体进行微生物转化的方法。该假单胞菌保藏号为CGMCC No.4184；用其对普瑞巴林中间体进行微生物转化的方法包括如下步骤：(1)将该假单胞菌加入到培养基中进行发酵培养；(2)利用培养后的发酵液对普瑞巴林中间体进行转化反应，得到转化液，所述普瑞巴林中间体为消旋2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸乙酯；(3)将所述转化液用溶剂萃取，将萃取得到的有机相脱水后蒸发溶剂得到(S)-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸乙酯。本发明通过所述假单胞菌转化消旋-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸乙酯制备(S)-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸乙酯，收率可以达到43.0％，底物对映体过量值(ees)达到98.3％。

公开(公告)号：CN101514338A

公开(公告)日：2009-08-26

申请号：CN200810162594.0

申请日：2008-12-04

申请人： 浙江大学

发明人： 杨立荣 ,  杨光 ,  徐刚 ,  吴坚平

IPC分类号： C12N11/04

摘要： 本发明公开了一种采用甲基丙烯酰氧丙基凝胶制备固定化脂肪酶的方法。包括如下步骤：1)加入γ－甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷、γ－甲基丙烯酰氧丙基三乙氧基硅烷或γ－甲基丙烯酰氧丙基甲基二甲氧基硅烷与正硅酸甲酯或正硅酸乙酯，搅拌混合，加入去离子水和酸或碱催化剂，搅拌，得到均匀的溶胶；2)向溶胶中加入缓冲液，缓冲液含有0.005－0.04g/ml溶胶的脂肪酶，缓冲液的用量为0.5～1ml，搅拌；3)静置老化，真空干燥，研磨，得到固定化脂肪酶。本发明操作过程简便易行，所制备的多种固定化脂肪酶其酶活力较游离酶均有明显提高，其中，固定化的Arthrobacter sp.脂肪酶的水解活力为游离酶的11倍。

公开(公告)号：CN1974542A

公开(公告)日：2007-06-06

申请号：CN200610155058.9

申请日：2006-12-07

申请人： 浙江大学

发明人： 王世珍 ,  杨立荣 ,  吴坚平 ,  徐刚

IPC分类号： C07C215/34 ,  C07C219/22

摘要： 本发明公开了一种S－和R－型二醇和酯的西酞普兰中间体的制备方法。它是将0.001～0.05mol酯，0.002～0.2mol醇和10～500ml含有0％～1％水的有机溶剂加入到反应器中，然后加入25～1500mg脂肪酶，在0℃～70℃反应温度下，搅拌反应30～180小时，获得二醇S－或R－对映体或其酯的方法。本发明反应选择性好，转化率高，获得的产物二醇S－或R－对映体或其酯的光学纯度高，反应适用温度范围宽，可在常温下进行，操作方便，设备简单。本发明在有机溶剂中实现，酶活力稳定，不流失，可反复循环使用，因而具有较大的工业应用前景。

公开(公告)号：CN1932031A

公开(公告)日：2007-03-21

申请号：CN200610053475.2

申请日：2006-09-20

申请人： 浙江大学

发明人： 孙丰来 ,  徐刚 ,  吴坚平 ,  杨立荣

IPC分类号： C12P41/00 ,  C12P13/00

摘要： 本发明公开了一种酶法拆分制备手性β－羟基腈化物的方法。方法的步骤如下：1)将消旋β－羟基腈化物溶解在有机反应溶剂中，然后加入酯，充分混合；2)在反应体系中加入酶催化β－羟基腈化物转酯化反应，然后在反应温度 10℃－60℃下搅拌反应0.5－300小时，β－羟基腈化物和酶的用量比为0.001－100molβ－羟基腈化物/l克酶；3)将反应液过滤，回收酶，即可。本发明是通过将β－羟基腈化物和酯溶解于有机溶剂中，然后加入酶，在酶的催化作用下，β－羟基腈化物和酯发生不对称转酯化反应，获得具有较高光学活性的R－β－羟基腈化物，反应选择性好，转化率高，获得的产物R－β－羟基腈化物光学纯度高，反应适用温度范围宽。

公开(公告)号：CN117700321A

公开(公告)日：2024-03-15

申请号：CN202211096083.X

申请日：2022-09-08

申请人： 浙江新安化工集团股份有限公司 ,  浙江大学

发明人： 周曙光 ,  杨立荣 ,  秦龙 ,  周海胜 ,  余神銮 ,  吴坚平 ,  王林林 ,  詹波 ,  王萍

IPC分类号： C07C67/08 ,  C07C69/716 ,  C07C51/08 ,  C07C59/21 ,  C07C253/14 ,  C07C255/10

摘要： 本发明提供了一种4‑卤代‑2‑羰基丁酸酯中间体的合成方法，包括以下步骤：a)将氰化物、相转移催化剂和3‑卤代丙酰卤混合，进行取代反应，过滤后得到3‑卤代丙酰氰粗料液；所述相转移催化剂选自聚乙二醇、冠醚类化合物、聚脂肪醇蓖麻油、季铵盐和季膦盐中的一种或多种；b)将步骤a)得到的3‑卤代丙酰氰粗料液与酸水溶液混合，进行水解反应，纯化后得到4‑卤代‑2‑羰基丁酸粗料液；c)将步骤b)得到的4‑卤代‑2‑羰基丁酸粗料液与醇混合，进行酯化反应，再经纯化处理，得到4‑卤代‑2‑羰基丁酸酯中间体。该合成方法工艺简单，条件温和、易控，且具有较高收率。