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公开(公告)号：CN101880728A
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN201010240001.5
申请日：2010-07-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种肠球菌属多重PCR检测引物，包括肠球菌属引物的序列、粪肠球菌种引物的序列和屎肠球菌种引物的序列。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌的多重PCR方法，大大简化了查验程序，可以在很多基层实验室使用。能一次PCR鉴定到肠球菌属及粪肠球菌或屎肠球菌种，能最少检测出1ng的基因组DNA，敏感性高，特异性比较强，有利于肠球菌的鉴别与诊断，并且具有的较好敏感性、重复性和稳定性，为临床中肠球菌的检测提供了一种新的快速检测方法，也为肠球菌感染的分子流行病学调查，研究肠球菌分子发病机制，早期诊断，诊断试剂盒的研制与开发，药物或疫苗的免疫机制提供了试验依据和技术手段。
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公开(公告)号：CN119291184A
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202411399114.8
申请日：2024-10-08
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪δ冠状病毒IgA抗体的间接ELISA试剂盒，涉及免疫学检测领域。该间接ELISA试剂盒，包括包被抗原的酶标板；该抗原为重组PDCoV S2蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该间接ELISA试剂盒，以重组PDCoV S2蛋白为包被抗原捕获PDCoV特异性的IgA抗体，辣根过氧化物酶标记的山羊抗猪IgA抗体为检测抗体，可以在酶标板上形成“PDCoV‑S2蛋白‑PDCoV‑S2特异性IgA抗体‑酶标记抗体”三聚体复合物，通过底物颜色变化和吸光度值的测定即可直接判定结果，可以明显提高检测效率。该间接ELISA试剂盒可用于PDCoV的临床检测和免疫评价。
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公开(公告)号：CN117143829B
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202311162703.X
申请日：2023-09-11
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K14/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了抗5型猪星状病毒的杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其识别的抗原表位肽和应用，属于生物技术领域，该杂交瘤细胞株的保藏编号为CCTCC NO：C2023237；本发明还公开了所述杂交瘤细胞株分泌的抗5型猪星状病毒的单克隆抗体6C6。本发明提供的抗5型猪星状病毒(PAstV5)衣壳蛋白(Cap)单克隆抗体6C6，经鉴定重链亚型为IgG1，轻链亚型为Kappa，其识别的抗原表位的氨基酸序列为75‑NFVRQ‑79，呈现α螺旋结构；本发明制备的单抗6C6特异性和反应性好，能够特异性识别PAstV5，与其他常见的猪肠道病毒没有交叉反应，可应用于实验室以及临床检测。
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公开(公告)号：CN118222574A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410502959.9
申请日：2024-04-25
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N5/10 , C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除RIPK1基因的Neuro‑2a细胞模型及其应用，属于分子生物学与细胞生物学领域，本发明公开了一种靶向敲除RIPK1基因的sgRNA，包含sgRNA‑1、sgRNA‑2或sgRNA‑3。本发明还公开了一种Neuro‑2a细胞模型，所述Neuro‑2a细胞模型为RIPK1基因敲除的Neuro‑2a细胞系。本发明制备了敲除RIPK1基因的Neuro‑2a细胞系，该敲除细胞与野生型细胞相比，生长功能不受影响，为研究RIPK1基因在乙型脑炎病毒复制方面的功能提供有效的细胞模型，并为RIPK1基因缺失与乙型脑炎病毒感染Neuro‑2a细胞的分子机制相关研究奠定重要基础。
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公开(公告)号：CN117701510A
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202311725602.9
申请日：2023-12-15
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K35/765 , A61K49/00 , A61K35/741 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一株哺乳动物呼肠孤病毒3型毒株及其感染动物模型的建立方法和应用，属于生物技术领域，该毒株保藏编号为CCTCC NO：V202373；该建立方法包括利用该呼肠孤病毒3型(MRV3)HN2021‑01毒株感染仔猪的步骤。本发明分离到一株MRV3型流行毒株HN2021‑01，将该病毒接种五日龄仔猪，对仔猪的致病性具有明显的病理变化，然而在临床上无明显症状，证实HN2021‑01毒株在感染仔猪后，仔猪机体呈隐性感染，处于亚健康状态；本发明成功构建了MRV3型流行毒株感染动物模型，并进一步发现，该病毒对仔猪肠道菌群多样性及微生物群落组成产生较大影响，为益生菌药物筛选提供了研究基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116875562A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202310864470.1
申请日：2023-07-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一株猪δ冠状病毒传代致弱毒株及其应用，属于生物医药技术领域。该弱毒株的保藏编号为CCTCC NO:V202363。该弱毒株是在猪肾上皮细胞上传代后经克隆纯化而得的传代致弱毒株。该毒株随着体外传代次数的增加，其在细胞上的敏感性和适应性逐渐增强，而其毒力显著降低，感染新生仔猪无明显临床症状。经序列分析，与强毒株相比，致弱毒株存在多个基因突变，且集中在S1蛋白。蛋白结构预测结果表明，部分突变可能改变了S蛋白的结构进而影响其致病性。致弱毒株和强毒株对仔猪肠道菌群的影响具有显著性差异，致弱毒株的感染会引起大量有益菌的丰度增加。该弱毒株生物安全风险较低，是具有较高安全性的疫苗候选弱毒株。
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公开(公告)号：CN111337670A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN202010219003.X
申请日：2020-03-25
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , C12N15/31 , C12N15/70 , C07K14/315
Abstract: 本发明属于微生物检测领域，特别是指一种菌毛亚单位蛋白EbpA1猪源粪肠球菌抗体间接ELISA检测方法。利用纯化复性后的EbpA1亚单位蛋白初步建立了间接ELISA方法，采用棋盘法确定了最佳的包被浓度为2µg/mL；封闭液可以排除其他物质的非特异性吸附，我们选用1%的BSA进行封闭，达到了较好的效果；此外，对血清、酶标二抗的稀释比例和作用时间和底物的显色时间进行了摸索，均选择最佳的条件使建立的ELISA方法达到最优水平。ELISA结果的判定：在方法建立时采用P/N﹥2.1可视为阳性；而最终的结果采用阴性样品OD450值的平均数加3倍的标准差等于阳性的临界值。
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公开(公告)号：CN105400910B
公开(公告)日：2018-09-21
申请号：CN201511025198.X
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种病毒的检测方法，具体涉及一种猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR检测引物及检测方法。本发明利用引物检测猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR的方法，该方法不用于疾病的诊断和治疗，包括提取病毒的DNA后，按多重荧光定量RT‑PCR反应体系和反应条件对病毒进行检测，本发明的57份临床样品的多重RT‑PCR检测结果显示，同时感染这2种病毒的阳性率为1.75％，感染PDCoV阳性率为19.30％，感染TGEV阳性率为1.75％。结果表明，建立多重RT‑PCR方法能够对PDCoV和TGEV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN105483290A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201511018859.6
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测引物，猪德尔塔冠状病毒的引物序列如下：上游引物：5＇- TTAGTCGGGTCCTTTGCG -3＇，下游引物：5＇- ACTCTCGTTGAAAGTCCG-3＇，扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段260 bp。本发明根据GenBank中登录的PDCoV（KJ567050.1）Illinois121株的N基因序列的保守区设计一对特异性引物，经过对反应条件进行优化，建立了检测PDCoV的SYBRGreen 荧光定量PCR方法。该方法对常见的病毒均检测不到荧光信号，仅对PDCoV检测为阳性，其灵敏度为54拷贝/μL；组内和组间变异系数均小于1%。本试验建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点，可用于临床PDCoV的检测。
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