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公开(公告)号：CN105648116A
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201610113660.X
申请日：2016-02-29
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明涉及生物毒株鉴别技术领域，特别涉及一种猪伪狂犬病毒变异毒株的PCR鉴别方法，提取待鉴别病毒DNA，进行第一步扩增，扩增出两条条带的为变异株或HB98疫苗毒株，扩增出1条条带的为经典毒株；扩增出两条条带的病毒DNA再进行第二步扩增，扩增产物分子量大小为293bp的为变异株,扩增产物分子量大小为239bp的为HB98疫苗毒株。第一步PCR的敏感度可以达到2-20TCID50病毒量或0.5ng/ml质粒量，而第二步PCR敏感度达到50TCID50病毒量或者100ng/ml质粒量。该敏感度可以有效的检测出临床病料中是否有伪狂犬病毒感染，并区分出伪狂犬病毒经典毒株或者变异毒株感染，并且准确率高。
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公开(公告)号：CN118516215B
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202410848660.9
申请日：2024-06-27
Applicant: 南京农业大学 , 明杰生物科技(扬州)有限公司
Abstract: 本发明公开了一种病原微生物的综合检测设备，包括箱体、箱门、托盘和感应系统，箱体的内侧安装有调节架，调节架的外部活动连接有多个连接板，连接板的外部滑动连接有支撑板，且托盘转动连接有支撑板的外部，托盘的外部开设有多个若干个盛放病原微生物的放置槽，托盘的外部设置有用于病原微生物的固定组件，固定组件包括设置在箱体上的伺服电机和处于箱体上并在若干个放置槽处分别对应设置的固定板，连接板与箱体之间共同设置有用于托盘的调节组件，本发明通过设置调节组件可使多个托盘根据本身所放置的病原微生物的大小进行调节使用，这样可以更有效地利用箱体内的空间，提高箱体的容量和效率。
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公开(公告)号：CN117363807A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311522822.1
申请日：2023-11-15
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开一种非洲猪瘟病毒的LAMP检测引物及检测方法，该LAMP检测引物包括一对外引物F3/B3、一对内引物FIP/BIP及两条环引物Loop F/Loop B。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒LAMP检测方法。该方法特异性高，与PRV、PCV2、PRRSV和PEDV等均无交叉反应。敏感性与荧光定量PCR一致，最低检测限为102 copies·μL‑1，而且快速、便捷，可用于ASFV的检测和临床诊断，具有较好应用前景。该方法对于条件的要求不高，不需要高昂价格的仪器设备，使用简单的水浴锅装置就能满足实验所需要的条件，具有良好的前景和应用价值。
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公开(公告)号：CN113563431B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202110752863.4
申请日：2021-07-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/08 , C12N15/40 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N7/01 , C12N15/866 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫保护蛋白杂合基因、重组杆状病毒及疫苗。成功构建了2株可溶性表达PRRSV GP5和M蛋白基因的重组杆状病毒BMP541与FMP542，制备的重组蛋白可以形成病毒样颗粒，诱导仔猪产生体液免疫和细胞免疫，并且能够抵抗高致病性PRRSV和类NADC30毒株的攻击，为PRRSV亚单位疫苗的研制奠定了重要基础。
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公开(公告)号：CN116904402A
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202310846981.0
申请日：2023-07-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开一株分泌猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用，该杂交瘤细胞株的保藏编号为：CGMCC NO.45603。本发明筛选出一株具有PRRSV阳性血清阻断效果的单抗12E1，成功建立可PRRSV N蛋白阻断ELISA抗体检测方法。该方法具有较高的敏感性和特异性，与IDEXX PRRSV ELISA抗体检测试剂盒符合率94.3％，可用于PRRSV抗体检测和血清流行病学调查。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114014916B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202111422353.7
申请日：2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/005 , G01N33/68 , C07K16/08
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白、其编码基因及在ELISA抗体检测中的应用，本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第60‑120aa的基因片段删除，得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因，将该编码基因克隆至pET32a，再转化至Rosseta感受态细胞，经IPTG诱导表达，可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达，可与His标签抗体结合，采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫，可以得到多克隆抗体，该多克隆抗体效价高，与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板，对PCV3进行间接ELISA抗体检测，具有敏感性、特异性和重复性好等优势。
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公开(公告)号：CN115927745A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210943330.9
申请日：2022-08-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种检测6种猪冠状病毒的RT‑PCR检测方法。本发明的检测方法可用于检测6种猪冠状病毒，实验结果表明，本发明的方法通过一对引物即可检测6种猪源冠状病毒的核酸，提高了检测效率，可节省检测的费用，对于临床发病猪未知样品检测具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN109762052B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN201910046124.6
申请日：2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白及其编码基因和应用，本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第1‑120aa或60‑120aa的基因片段删除，得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因，将该编码基因克隆至pET32a，再转化至Rosseta感受态细胞，经IPTG诱导表达，可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达，可与His标签抗体结合，采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫，可以得到多克隆抗体，该多克隆抗体效价高，与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板，对PCV3进行间接ELISA抗体检测，具有敏感性、特异性和重复性好等优势。
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公开(公告)号：CN107841507B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN201711177363.2
申请日：2017-11-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种高效表达的猪圆环病毒2型Cap‑穿膜肽融合蛋白基因及其应用，该融合蛋白的编码基因为(1)～(3)中的任意一种：(1)融合穿膜肽TAT基因序列的Cap基因；(2)融合穿膜肽ppTG20基因序列的Cap基因；(3)融合蜜蜂信号肽HBM基因序列的Cap基因。本课题组研究发现，穿膜肽与pVAX‑Cap质粒混合制备的DNA疫苗能提高其在小鼠体内的免疫应答水平。本研究将TAT、ppTG20，HBM与PCV2 Cap蛋白N端融合，成功构建重组杆状病毒，实现了Cap蛋白有效表达，为PCV2基因工程疫苗研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106511991B
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201611139167.1
申请日：2016-12-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K39/215 , A61K39/39 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12N15/85
Abstract: 本发明涉及基因疫苗技术领域，特别涉及一种Ii基因序列在猪流行性腹泻病毒基因疫苗中的应用，Ii基因碱基序列见序列表中序列8。将Ii基因载体和S1（m）基因载体混合或者将Ii基因与S1（m）基因连接后用于猪流行性腹泻病毒基因疫苗的制备，S1（m）基因碱基序列见序列表中序列10。在经密码子优化的S1基因的基础上，成功构建了真核表达质粒pVAX‑S1（m）和pVAX‑Ii‑S1（m），小鼠免疫试验验证S1蛋白的免疫原性和Ii作为分子佐剂在提高体液和细胞免疫中发挥的作用，首免后63d出现特异性抗体，首免后84d抗体明显升高，为研制PEDV疫苗提出新的思路，为猪体试验奠定了基础。
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