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公开(公告)号：CN118995978A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411345728.8
申请日：2024-09-26
Applicant: 南京农业大学 , 江苏南农高科技股份有限公司
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/21
Abstract: 本发明提供了一种用于副猪嗜血杆菌5型、7型和11型血清型检测的引物探针组、试剂盒及其应用，属于分子生物学检测技术领域。本发明的引物探针组是根据5型、7型、11型的特异性基因wcwK、funQ、amtA的保守序列设计。本发明的引物探针组能够通过多重荧光定量PCR同时鉴别三种血清型，检测效率高，且对其他常见病原菌无交叉反应。本发明的引物探针组为临床上副猪嗜血杆菌优势血清型的检测提供了有力的技术手段，也为疾病的预防和控制奠定了一定的技术基础。
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公开(公告)号：CN102321638B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110262408.2
申请日：2011-09-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了一种新的猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5修饰基因及其应用。猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5修饰基因，序列如SEQ IDNO.2、SEQ IDNO.3、SEQ IDNO.4或SEQ IDNO.5所示。含有该猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5修饰基因的重组质粒。含有所述的重组质粒的减毒沙门氏菌SL-pCI-SynGP5/GP4-5。结果显示所构建的重组质粒能够诱导产生较高水平的体液免疫应答、淋巴细胞增殖应答以及细胞因子应答。重组沙门氏菌能够诱导较高水平的抗体应答；诱导较高水平的干扰素；病毒血症水平低；攻毒后组织器官的损伤比较轻微，生物安全水平高。
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公开(公告)号：CN102399750B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201110151701.1
申请日：2011-06-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/20
Abstract: 本发明公开了重组MSG1蛋白单克隆抗体及检测猪嗜血支原体特异性抗体的阻断ELISA方法。分泌猪嗜血支原体重组MSG1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1A7，保藏号为CGMCC NO.4860，保藏日为2011年5月13日。猪嗜血支原体重组MSG1蛋白的单克隆抗体，该单克隆抗体由保藏号为CGMCC NO.4860的杂交瘤细胞株1A7分泌。该单克隆抗体与猪嗜血支原体MSG1重组蛋白和病原蛋白都具有良好的反应特异性。本发明将该单克隆抗体应用于检测猪嗜血支原体特异性抗体的阻断ELISA法，通过大量实验优化了检测条件，使该方法具备良好的重复性、敏感性和特异性。
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公开(公告)号：CN102698289A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210165822.6
申请日：2012-05-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了PABP抑制剂在制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中的应用。所述的PABP抑制剂为表达PABP shRNA的重组质粒,优选以pSUPER为出发载体，含有表达PABP shRNA的DNA模板序列。本发明成功构建并筛选了以pSUPER为载体，可以表达靶向PABP的小发卡RNA的重组质粒。将这种质粒转染到Marc-145细胞后接种PRRSV，发现干扰PABP表达之后，PRRSV的mRNA水平比对照组有所下降，免疫荧光结果显示N蛋白表达也比对照组有所减弱。可见通过抑制PABP表达，能够减弱PRRSV N蛋白的表达，从而实现对PRRSV的抑制。
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公开(公告)号：CN101935716A
公开(公告)日：2011-01-05
申请号：CN201010278493.7
申请日：2010-09-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双重RT-PCR检测方法，属于生物技术领域。分别设计了针对PRRSV和BVDV的一对基因特异性引物，建立了BVDV和PRRSV双重RT-PCR检测方法，对于PRRSV和BVDV的cDNA最低检测量分别为3.8×10-4ng和7×10-4ng，用该方法对江苏省75份仔猪的肺脏、脾脏和淋巴结等病料进行检测，结果PRRSV阳性55份，BVDV阳性14份，其中PRRSV和BVDV混合感染12份，PRRSV和BVDV与单一RT-PCR的检测结果符合率分别为89.3％和92％，证明建立的双重RT-PCR检测方法可用于临床样品中BVDV和PRRSV的检测。同单一检测方法相比，双重PCR检测方法能够节省实验时间和成本，提高检测的效率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101240264A
公开(公告)日：2008-08-13
申请号：CN200810024423.1
申请日：2008-03-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗(SH株)，属于生物技术领域。猪圆环病毒2型毒株SH属于圆环病毒科圆环病毒属，已在中国科学院武汉病毒研究所进行保藏，保藏日期：，保藏号为。2002年从上海地区发生严重的断奶仔猪多系统衰竭综合症的猪场采集病料，进行病毒分离、鉴定、纯化获得了纯化的PCV2病毒的上海分离株SH。将PCV2－SH株在PK－15细胞中大量增殖，经甲醛灭活加入白油佐剂进行乳化，制备常规的白油佐剂疫苗。实验室试制成功5批疫苗，猪体试验证明具有较好安全性，并可以诱导猪体产生免疫保护效果，并起草制定了疫苗生产和检验规程。通过各方面实验证明该灭活疫苗已完全符合国家生物制品标准。
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公开(公告)号：CN1328373C
公开(公告)日：2007-07-25
申请号：CN200510038694.9
申请日：2005-04-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , A61K39/235 , A61P31/12
Abstract: 本发明猪II型圆环病毒(PCV-2)重组腺病毒，属于高新生物技术领域。通过PCR技术扩增PCV-2编码Cap蛋白的ORF2全基因序列，并把该基因序列克隆入腺病毒载体系统的穿梭载体pShuttle-CMV中，与腺病毒载体系统的骨架载体pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183菌株获得重组质粒，重组质粒转染HEK293-A细胞获得了重组腺病毒并成功的进行了噬斑纯化，通过RT-PCR、间接ELISA、Western-blot和IPMA证明构建成功表达了PCV-2 Cap蛋白的重组腺病毒rAd-Cap。在该重组毒中可以使PCV-2的Cap蛋白获得正确表达和表达量提高，从而能更有效的刺激机体的免疫保护反应。
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公开(公告)号：CN118755674A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410786638.6
申请日：2024-06-18
Applicant: 南京农业大学 , 江苏南农高科技股份有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , C07K14/01 , C12N15/34 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/535 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一株杂交瘤细胞株和一种单克隆抗体及其应用，属于生物技术领域。所述杂交瘤细胞株用于生产针对猪圆环病毒3型Cap蛋白的单克隆抗体，所述杂交瘤细胞株的保藏编号为CCTCC NO：C2022379。本发明还提供了一种HRP酶标单抗，所述HRP酶标单抗由上述的单克隆抗体通过HRP酶标制得。本发明还提供了一种阻断ELISA方法，使用猪圆环病毒3型Cap蛋白的重组蛋白进行抗原包被，使用上述的HRP酶标单抗作为检测抗体。本发明的阻断ELISA方法具有良好的特异性与较高的符合率，可用于后期进行PCV3抗体的检测，为PCV3的流行病学调查与临床诊断提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN113980908B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202111065245.9
申请日：2021-09-11
Applicant: 南京农业大学 , 江苏南农高科技股份有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一株胸膜肺炎放线杆菌ApxIV蛋白制备的杂交瘤细胞株、其分泌的单克隆抗体以及制备的用于检测胸膜肺炎放线杆菌的阻断ELISA试剂盒，所述试剂盒包括包被酶标版，辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体，所述杂交瘤细胞株的保藏编号为：CCTCCNO:C2021112，所述胸膜肺炎放线杆菌ApxIV蛋白单克隆抗体由上述杂交瘤细胞株所分泌，所述包被酶标板以ApxIV蛋白作为包被抗原。本发明的试剂盒以阻断ELISA法为原理，检测胸膜肺炎放线杆菌，具有灵敏性和特异性高，重复性好，检测快速方便，易于标准化等优点，非常方便。
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公开(公告)号：CN105400745B
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201510886074.4
申请日：2015-12-04
Applicant: 南京农业大学 , 江苏南农高科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒基因工程毒株及灭活疫苗和疫苗的制备方法，毒株是通过对高致病性的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）毒株进行定点突变，使其GP5第35位和第44位的糖基化位点缺失的方式构建而成；灭活疫苗的有效成分为灭活的该毒株病毒液。本发明首次采用过氧化氢为灭活剂，通过过氧化氢灭活浓度、时间优化和免疫佐剂的优化获得新型灭活疫苗。与其他灭活剂和佐剂相比，该毒株制备的新型灭活疫苗可以有效诱导仔猪产生PRRSV细胞免疫应答和中和抗体，保护仔猪抵抗PRRSV强毒攻击的效果更好。该基因工程灭活疫苗比传统灭活疫苗更为有效，相比商品化的PRRSV活疫苗更为安全，具有很好的应用前景。
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